Effects of arotinoid acid on induction of apoptosis and differentiation and telomerase activity and cell cycle in the HL～60 cell line

Objective To investigate the effects of arotinoid acid (Ro13-7410) on the morphological and functional alterations of leukemia HL-60 cell line and compared with those of RA.Methods Differentiation of HL-60 cells was assessed by morphology and by NBT reduction.Trypan blue exclusion was used to determine viability.Apoptosis was assessed by changes in cell morphology and by measurement of fragmented DNA using the PCD-assay-kit.Telomerase PCR ELISA-kit tested telomerase activity.The cell cycle was analyzed by flow cytometry.Results Incubation of the HL-60 cells with 10(-6)-10(-8) mol/L Ro13-7410 resulted in suppression of cell growth.Apoptotic cells were detected following exposure to 10(-6) mol/LRo13-7410 for 3 hours by measurement of the 'in situ' enzymatic labeling of DNA breaks with biotinylated dUTP.Ultrastructural examination of Ro13-7410-treated samples showed cells with chromatin compaction and cytoplasm condensation and the presence of 'apoptotic bodies'.Cells induced into apoptosis were accompanied by increase of intracellular free Ca[2+].Percentage of HL-60 cells reduced NBT following incubation with Ro13-7410 was lower than with all-trans retinoic acid (RA) (27% vas 85%).Telomerase PCR-ELISA assay showed that HL-60 cells cultured in the absence of inducing agents had significant telomerase activity.Telomerase activity declined gradually after 10(-6) mol/L Ro13-7410 treatment, and changes becoming evident at 1 day.The inhibition of telomerase activity at day 5 of treatment with Ro13-7410 was less effective than with RA.DNA flow cytofluorimetric analysis revealed that Ro13-7410 caused partial cell arrest in the G(2)/M phase after a 2-day treatment and the percentage of cells arrested in the G(2)/M phase increased after 4-days treatment.With RA-treated cells, a reduction in the percentage of cells in the G(2)/M phase was observed after 2-day of treatment.Conclusion Our study shows that Ro13-7410 suppresses HL-60 cells growth mainly via the induction of apoptosis and is less effective than RA in induction differentiation.Ro13-7410 dramatically inhibits telomerase activity during the course of induction and results in G(2)/M arrest within 2 days.These findings suggest that Ro13-7410 is worthy of further study for its effects on leukemic cells.     

复发性脑出血的临床研究

目的探讨复发性脑出血的发生率、危险因素及预后。方法180例首次脑出血病人,随访5年,对其临床及实验室资料进行分析。结果8例(4．4％)病人随访中脑出血复发,其中7例有高血压,且血压控制不良,1例无高血压但高龄。8例脑出血复发病人中,4例死亡,2例留有重度后遗症,2例留有轻度后遗症。结论复发性脑出血临床并不少见;血压控制不良及脑淀粉样血管病是其发生的危险因素;复发性脑出血预后不良。     

亚硝基谷胱甘肽对大鼠肝微粒体谷胱甘肽转移酶的激活及机制

目的　探索一氧化氮供体亚硝基谷胱甘肽(GSNO)能否在体外通过S 亚硝酰化机制激活大鼠肝微粒体谷胱甘肽转移酶 (mGST)。方法　微粒体粗提物与GSNO体外共孵育 ,测定mGST催化动力学改变 ,结合N 乙基马来酰亚胺 (NEM )再激活实验和二巯基苏醇 (DTT)逆转实验 ,以及酶蛋白游离巯基和酶S 亚硝酰化蛋白的改变 ,研究酶的激活机制。结果　GSNO在 0 .12 5～ 2mmol·L- 1浓度范围内呈浓度和时间 (3～ 15min)依赖性地激活mGST ,NEM对酶的再激活效应消失 ,DTT可以逆转上述激活作用 ,同时酶蛋白游离巯基浓度依赖性减少 ,而S 亚硝酰化蛋白浓度依赖性增多。结论　GSNO体外可激活大鼠肝mGST ,激活机制可能与mGST第 4 9位半胱氨酸 (Cys4 9)的巯基被亚硝酰化形成S 亚硝基硫醇结构有关。     

上海郊区老年痴呆症病人α-雌激素受体及芳香烃受体基因多态性

目的：探索上海地区农民人群中α-雌激素受体基因(ER-α)及芳香烃受体基因(Ahr)不同基因形态和老年痴呆症高发风险的可能联系．方法：分别以PCR—RFLP和AS—PCR方法分析一组老年痴呆症患者(n=52)ER-α基因及Ahr基因的多态位点，同一地区的健康人群(n=125)为对照．结果：Alzheimer症病人ER-α基因两个位点突变形态频率显著高于对照人群(Pvu Ⅱ位点：P=0．023，OR=2．94，95％CI 1．13—7．71；Xba I位点：P=0．046，0R=2．28，95％ CI 1．003—5．17)．Ahr G1721A位点基因型频率在病人组和对照组间无显著差异．结论：ER-α基因多态性可能与Alzheimer症易感性个体差异有关，本工作不支持Ahr基因多态性与老年痴呆症高发风险间的可能关联．     

含羟基喜树碱联合方案治疗中晚期非小细胞肺癌

目的 :观察含羟基喜树碱 (HCPT)联合方案治疗中晚期非小细胞肺癌 (NSCLC)患者的客观疗效及毒副作用。方法 :4 6例中晚期非小细胞肺癌患者为治疗组 ,应用含羟基喜树碱方案化疗 ,其中 2 5例肺腺癌患者接受HFAP方案 ,2 1例肺鳞癌患者接受HCAP方案 ,4周为一周期 ,2周期为一疗程 ;以同期住院的未用HCPT联合化疗的同类患者 4 2例作为对照组 ,其剂量、周期、疗程与治疗组相同 ,但不用HCPT。结果 :治疗组 4 3例患者完成一疗程治疗 ,肺腺癌有效率为 5 6 % ,CR 2例 ,PR 12例 ;肺鳞癌有效率为 5 5 5 % ,CR为 0 ,PR 10例 ,总有效率 (CR +PR)为 5 5 8% ;对照组 4 2例均完成一疗程治疗 ,肺腺癌有效率为37 5 % ,CR 1例 ,PR 9例 ;肺鳞癌有效率为 33 3% ,PR 6例 ,有效率 35 7% ;两组间差异显著 (P <0 0 5 )。治疗组和对照组的毒副反应主要表现为食欲不振、脱发、恶心呕吐和白细胞及血小板减少 ,两组毒副反应发生率无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :羟基喜树碱联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌疗效确切 ,副作用可耐受 ,该药是治疗非小细胞肺癌较为有效的药物 ,值得进一步在临床中观察和研究。     

青钱柳嫩叶中多糖的含量测定

目的建立青钱柳叶中多糖含量的测定方法.方法采用苯酚-浓硫酸显色法,于490 nm处测吸光度.结果青钱柳嫩叶中多糖含量为0.65 32%;平均回收率99.03%;r=0.9991.结论方法简便、快速,结果准确、可靠,适合多糖的含量测定.     

应用彩色血流像素定量技术分析子宫肌瘤介入治疗后的血流灌注变化

目的提出一种新的基于计算机彩色目标分割技术的声像图彩色血流像素定量技术。方法应用笔者开发的计算机彩色血流像素定量软件 ,分析经阴道超声引导下穿刺注射无水酒精治疗子宫肌瘤前后的血流灌注状态变化 ,对照组应用半定量计数法分析血管条数增减评介血流灌注变化。结果应用计算机彩色血流像素定量软件统计肿块血流像素/肿块像素的比值 ,介入前肿块血流像素/肿块像素比值是(15.65±9.61) % ,介入治疗后第4～6个月减少为(5.91±3.35) % ,半定量血管计数结果分别为(4.8±2.34)条和(1.23±0.59)条 ,后者结果的准确性低于应用计算机彩色血流像素定量技术自动检测的结果。结论通过临床应用分析 ,使用计算机彩色血流像素定量技术 ,对兴趣区血流灌注状态进行定量分析的方法 ,比传统半定量方法的定量概念、精确度和可操作性都有了进一步的改进和提高。     

泪点栓塞治疗眼干燥症

目的　探讨泪点栓塞治疗眼干燥症的手术方法 ,评价临床治疗效果。方法　临床确诊并经其他方法治疗无效眼干燥症患者 ,先采用临时性可溶性泪点栓治疗 ,对其中有效者行永久性泪点栓 ,栓塞泪点及泪小管。结果　栓塞后所有病例症状均有所改善 ,其中完全消失 2 5例 ,减轻 7例。角膜荧光素着色明显减少 ,泪液量明显增加 ,泪液分泌试验由治疗前的平均(2 67± 1 3 2 )mm到治疗后的 (10 13± 2 16)mm。泪膜破裂时间明显延长 ,术前平均 (3 42± 0 93 )秒 ,术后平均 (8 3 4± 3 5 8)秒。均无明显并发症。结论　采用泪点栓塞治疗眼干燥症可以有效地减少泪液排出 ,延长泪膜破裂时间 ,重建泪液平衡 ,动态地改变眼表面泪液动力学。具有操作简单、疗效确切、并发症少及有可逆性等优点     

应用高效液相色谱法检测男性不育患者精浆丙二醛水平

目的:探讨高效液相色谱法(HPLC)检测精浆中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平的意义。方法:93例不育男性分为:阻塞性无精子症组(12例);非阻塞性无精子症组(15例);少精子症组(21例);弱精子症组(19例);少弱精子症组(16例);少弱畸精子症组(10例)。18例生育男性作为对照组。采用HPLC检测生育与不育男性精浆MDA含量。结果:生育组精浆MDA值除与阻塞性无精子症组差异无显著性(P>0.05)外,与其他各组相比均有极显著性差异(P均<0.01)。各不育男性组间精浆MDA值也有统计学差异。结论:应用HPLC检测精浆MDA水平是诊断活性氧产生过高所致男性不育的一个重要指标。     

男性参与计划生育状况及其影响因素分析

目的:分析男性参与计划生育状况及其影响因素。方法:对全国31个省16 994名已婚育龄妇女进行问卷调查。结果:近10年来,有48.05%的男性与妻子讨论过避孕,25.75%的男性参加过计划生育/生殖健康培训,14.90%的男性参与避孕方法决策,27.59%的男性曾经使用过避孕套,5.10%的男性采用男性绝育术。多因素分析结果提示:男性参与与居住地(城镇/农村)、本人或妻子的文化程度等有较大关联。结论:我国男性尤其是农村男性参与计划生育程度有待提高。建议加大男性参与宣传教育的力度,扩展男用避孕方法种类以及全面推进避孕方法知情选择。