sTRAIL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

克隆TRAIL基因的95-281位(sTRAIL)，构建表达载体，建立原核表达体系，优化诱导表达的条件。分离人外周血淋巴细胞，提取总RNA，RT-PCR，克隆sTRAIL的cDNA，构建原核表达载体，优化IPIG诱导的条件。结果：(1)克隆了TRAIL基因95-281位的cDNA，DNA测序结果与报道的一致。(2)构建了sTRAIL基因的原核表达载体，酶切结果与预期的一致。(3)转化宿主菌，优化IPIG诱导条件，发现3mmol/L，诱导3～4h表达最好。sTRAIL基因的克隆及表达为下游中试发酵及纯化奠定了上游的基础，也为研究TRAIL抗肿瘤的机制提供了可能。     

刺五加鲨烯合酶和鲨烯环氧酶基因单核苷酸多态性及其与总皂苷量的相关性研究

目的 筛选刺五加鲨烯合酶(SS)和鲨烯环氧酶(SE)基因存在的单核苷酸多态性(SNP)位点,分析各SNP位点与刺五加总皂苷量的相关性.方法 采用分光光度法测定刺五加总皂苷的量,并划分为具有显著差异(P＜0.01)的高、低量组;RT-PCR法扩增刺五加SS、SE基因,根据测序结果筛选SNP位点,利用R×C表的x2检验分析相关关系.结果 刺五加SS基因存在6处SNP,其中704 bp位点为错义突变,其他位点为同义突变,各位点均不与刺五加总皂苷量显著相关.SE基因存在9处SNP,其中导致错义突变的164、199、227、232 bp位点及同义突变的279、285 bp位点与刺五加总皂苷量显著相关(P＜0.05),其他位点为同义突变,与刺五加总皂苷量间无显著相关性.结论 刺五加SS和SE基因存在SNP,SE基因164～285 bp位点的AGAACG与刺五加总皂苷高量组显著相关,TAGTTC与低量组显著相关.     

肺癌手术方式的临床病理学探讨

目的　从病理学角度探索合理选择肺癌手术方式的理论依据。方法　对 3 98例肺癌根除性肺切除标本近侧支气管及肺门纵隔淋巴结进行病理学研究。结果　①癌直接沿近侧支气管壁粘膜层、粘膜下层或多层面侵袭蔓延 ,分别占 9.3 %、2 1.8%与 68.9%。 96.4%的癌侵袭是发生在距瘤缘 1.5cm以内的管壁上。其侵袭距离与肺癌病理类型、侵袭方式及TNM分期有密切关系。②癌细胞经转移淋巴结间接侵袭近侧支气管壁外膜或软骨层 2 2例 ,其中N1者侵袭叶支气管壁 3例 ,N2 者侵袭主支气管壁 19例 ,以腺癌为突出 ,尤其低分化腺癌N2 转移率与侵袭率均显著高于高分化者 (P <0 .0 1,P <0 .0 1)。结论　合理选择肺癌手术方式的病理学原则是确保支气管切端距瘤缘的安全界限 >1.5cm ;即使是周围型肺腺癌 ,也应重视淋巴结转移对支气管壁的侵袭性并主动清除同侧肺门及上、下纵隔淋巴结。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药特征及其耐药机制的研究

目的分析临床分离耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药特征及其对亚胺培南耐药机制。方法应用BD Phoenix100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,头孢哌酮/舒巴坦采用K-B法;应用聚合酶链反应（PCR）方法检测碳青酶烯酶相关基因（IMP、VIM、GIM、SPM、OXA、GES）、膜微孔蛋白基因oprD2,采用Etest试验观察氰氯苯腙（CCCP）对亚胺培南最低抑菌浓度（MIC）的影响,以研究细胞内主动外排机制。结果耐亚胺培南铜绿假单胞菌除对阿米卡星100%敏感外,对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦敏感率为48.0%~54.0%,对三代、四代头孢菌素、氨曲南、喹诺酮类等抗菌药物抗菌活性差,敏感率为3.0%~29.0%;对美罗培南29.0%敏感,对氨苄西林/舒巴坦、氯霉素、四环素、复方新诺明全部耐药;检测到IMP阳性率17.6%,oprD2阳性率2.9%,其余耐药基因未检测到;当CCCP存在时,亚胺培南的MIC值下降4个浓度梯度,提示存在主动外排机制的菌株占11.8%。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌除阿米卡星外,对其他常用抗菌药物耐药严重;产IMP型金属β-内酰胺酶、细胞内主动外排机制以及膜微孔蛋白基因oprD2缺失,是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因,但膜微孔蛋白基因oprD2缺失,不是铜绿假单胞对亚胺培南耐药的主要机制。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌亲缘性分析

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌菌株的亲缘性。方法聚合酶链反应（PCR）法对耐亚胺培南铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因、消毒剂耐药基因（qacE△1-sul1）、膜微孔蛋白基因（oprD2）及整合酶基因（intⅠ1）的检测,并以耐药基因为分子标记作聚类分析。结果β-内酰胺类耐药相关基因TEM、CARB、DHA、IMP阳性率分别为5.9%、32.4%、14.7%、17.6%,而SHV、OXA-10、PER、VEB、GES、VIM、GIM、SPM均为阴性;oprD2缺失率为2.9%;aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ和ant（2″）-Ⅰ阳性率分别为21.2%、33.3%、48.5%;qacE△1-sull基因为41.2%;IntⅠ1阳性率为3.0%,试验菌株存在克隆传播和近缘关系现象。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌可导致克隆传播,遗传标志物聚类分析方法可快速了解试验菌株间的亲缘关系。     

我院12232张门急诊处方分析

目的:了解我院门急诊处方不合理用药情况,提高医院合理用药水平。方法:抽取2007年1～6月门急诊处方,以《处方管理办法》、《中国药典》及药品说明书相关要求为依据,判断不合理用药处方并进行归类分析。结果:共审核处方12232张,其中含注射液处方1456张,抗菌药物处方2637张。所有审核处方中存在不合理用药处方569张,占总审核处方的4.65%,分别在用法用量、溶媒使用、合并用药等方面存在问题。结论:我院门急诊处方用药情况基本合理,但仍存在问题,需进一步改善和提高。     

中国体外循环状况调查分析报告

目的通过对全国开展体外循环的医院进行调查，分析我国体外循环的市场和现状，并对发展提出建议和预测。方法按年度对全国开展心脏手术的医院进行问卷调查，内容包括我国心脏手术的规模、体外循环人员组成，体外循环心脏手术（on—pump）和非体外循环心脏手术（off—pump）的比例，氧合器的使用数量和类型分布等。结果全国心脏手术量已由2003年的76319例增加至2007年的136015例，其中体外循环为113465例，占心脏手术量的83．42％。近5年来手术例数平均每年增长约15％。2007年有41个单位开展体外膜式氧合（extracorporeal membrane oxygenation，ECMO），总数为153例；进口膜式氧合器使用率为46．16％，国产膜式氧合器使用率为23．9％。2007年全国从事体外循环人员1497人，其中医生为795人，占55％；体外循环从业人员均未接受正规专业训练。结论中国心脏手术与体外循环发展快速，体外循环从业人员需接受正规、系统的培训。近年来，体外循环主要使用膜式氧合器，鼓泡式氧合器将逐渐消失。     

乌司他丁对腔静脉成形肝移植术肾功能的保护作用

目的观察腔静脉成形肝移植术患者肾功能的变化与乌司他丁对肾功能的保护作用。方法71例腔静脉成形肝移植术患者,随机给予乌司他丁30万IU或等量生理盐水,持续静脉输注1h,新肝期再重复一次。根据腔静脉平均阻断时间分成≤62min组,其中用乌司他丁23例(U1组)、生理盐水18例(C1组);>62min组,其中用乌司他丁13例(U2组)、生理盐水17例(C2组)。监测血流动力学、血气、生化指标、肾功能指标、凝血功能、体温、尿量及出血量等。结果下腔静脉阻断(IVC)时间为(62.3±11.2)min。与术前相比,所有患者术后24h血尿素氮(BUN)明显升高(P<0.01),血肌酐(Cr)在新肝期1h、术毕、术后24h均明显升高(P<0.01)。术后24hBUN、CrU1组明显低于C1组(P<0.01),U2组亦明显低于C2组(P<0.01)。而U1与U2组、C1与C2组BUN、Cr差异无统计学意义。结论腔静脉成形术肝移植术对肾功能有明显损伤,术中使用乌司他丁对肾脏有一定程度的保护作用。     

经十二指肠镜取蛔虫治疗胆管蛔虫症

目的 讨论胆管蛔虫的治疗方法。方法 采用十二指肠镜下取蛔虫和鼻胆管引流治疗难治性胆管蛔虫症。结果 １７例取出蛔虫或残骸，４例并发胆管炎或胰腺炎的患者取出蛔虫后，再予鼻胆管引流，所有病人均治愈，未出现并发症。结论 经十二指肠镜取蛔虫可以迅速有效地解除症状，控制病情发展，即使在并发胆管炎或胰腺炎，加用鼻胆管引流后，亦能取得满意疗效。