2008年北京市HIV-1耐药株传播调查

目的 了解2008年北京市未经抗病毒治疗HIV-1感染者中耐药株传播水平,为耐药监测和临床抗病毒治疗工作提供本底资料.方法 参照WHO提出的HIV耐药警戒线调查方法(HIV drug resistance threshold survey,HIVDR-TS)指导方案,收集6个月内检测发现的60～70名小于25岁的感染者血浆样本,检测HIV-1 pol区亚型及耐药基因型,并计算耐药株检出率、评价传播水平.结果 61份符合要求的样本共获得50个有效pol区序列.感染途径以同性传播为主,占62%;亚型分布以B(42%)、CRF01_AE(28%)、CRF07_BC(26%)3种为主.出现1例针对PI类药物的耐药突变株,检出率为2%(1/50);出现1例针对NRTI类药物的耐药突变株,检出率为2%(1/50);未出现针对NNRTI类药物的耐药突变株,检出率为0.蛋白酶(PR)区和逆转录酶(RT)区的耐药突变株检出率均为2%,均属于低度传播范围(<5%).结论 北京市未经抗病毒治疗HIV-1感染者中出现PR和RT区的耐药突变株,传播水平尚处于低流行状态,现有的抗病毒治疗方案是可行的,治疗前尚不需要进行大规模耐药性检测.     

巢式RT-PCR检测甲肝疫苗的感染性滴度研究

目的 建立一种快速灵敏特异的检测甲肝疫苗滴度的巢式RT-PCR检测方法。方法 运用巢式RT-PCR法对甲肝疫苗病毒滴度进行检测，并与细胞培养ELISA检测法进行比较。结果 巢式RT-PCR灵敏度和特异性均与细胞培养ELISA检测法相似。结论 巢式RT-PCR是一种简便、快速、灵敏的甲肝病毒检测方法，用于疫苗的常规检测有较好前景。     

人冠状病毒229E、OC43与SARS-CoV血清学相关性的研究

目的 检测正常人和SARS患者血清中3种人冠状病毒（229E、OCA3和SARS-CoV）特异性抗体．分析3种冠状病毒血清学相关性。方法 采用免疫印迹、免疫荧光和ELISA方法检测100例健康献血员、34例SARS患者恢复期以及11例SARS患者双份血清中229E、OCA3和SARS-CoV3种冠状病毒核衣壳（N）蛋白抗体。结果 用免疫荧光方法检测100例健康献血员血清中229E、OCA3和SARS-CoV IgG阳性率分别为98％、100％和1％，34例SARS患者恢复期血清中3种冠状病毒IgG的阳性率均为100％；免疫印迹检测100例健康献血员血清中229E、OCA3和SARS-CoVN蛋白IgG阳性率分别9r7％、99％和2％，34例SARS患者恢复期血清中229E、OCA3和SARS-CoVN蛋白IgG阳性率分别97％、100％和100％；11例SARS患者的急性期和恢复期双份血清中，免疫荧光检测有5例出现229E IgG滴度4倍或以上升高，10例出现OC43 IgG滴度4倍或以上升高，ELISA检测2例出现229EN蛋白IgG滴度4倍以上升高，没有一例出现OCA3N蛋白抗体滴度升高。结论 正常人群中普遍存在229E和OCA3两种人冠状病毒抗体，SARS-CoV感染者存在对人冠状病毒229E和OCA3血清学交叉反应，提示核衣壳蛋白不是引起血清学交叉反应的主要抗原，结果对研究SARS溯源有重要意义。     

小关节角矢状化、椎间盘退变对退变性腰椎滑移作用的有限元研究

目的探讨小关节矢状化与椎间盘退变间的关系及其对退变性腰椎滑移的作用和意义。方法采用一种新型CAD方法精确构建65°小关节角、45°小关节角、25°小关节角与正常椎间盘、轻度退变椎间盘、重度退变椎间盘相组配的9种腰椎L4-L5活动节段有限元模型。生理压缩载荷下,分别对9种有限元模型的生物力学参数进行测试。结果与小关节角45°和25°有限元模型相比,小关节角65°有限元模型的矢状方向椎体前移位增加,关节突、峡部等效应力和关节突水平方向接触力明显增加;小关节角65°有限元模型的终板膨出减小,纤维环基质应力增加。与正常有限元模型相比,椎间盘轻度退变有限元模型刚度下降,小关节突及峡部应力轻度增加。9种有限元模型中,轻度退变椎间盘结合小关节角65°有限元模型的抗前剪力能力最差。结论小关节角矢状化既是退变性腰椎滑移的原发诱因,又是局部应力变化导致关节突再塑形的继发病理改变,矢状型小关节腰椎活动节段矢状方向内在不稳定性受椎间盘退变程度的影响,椎间盘退变对小关节角矢状化无明显促进作用。     

CartoXP Guided Catheter Ablation for Paroxysmal Atrial Fibrillation Without Three-dimensional Modeling of Left Atrium and Pulmonary Veins

Objectives This study was to investigate the differences between modeling and non-modeling left atrium （LA） in CartoXP system guided catheter ablation for paroxysmal atrial fibrillation （PAF）. Methods From Jan to Dec in 2008 total 31 cases with PAF were enrolled. All were treated by the same electrophysiologist with CartoXP guidance. Catheter ablation was accomplished without left atrium and pulmonary veins modeling in 17 patients （non-modeling group） and with left atrium modeling in 14 patients （modeling group）. The detailed ablation method was based on circumferential pulmonary veins isolation （CPVI）. And linear ablation of tricuspid valvular isthmus was performed individually. The ablation endpoint was a complete isolation of pulmonary vein potential from left atrium and no further induced continuous fast atrial arrhythmia including atrial fibrillation （AF）, atrial flutter （AFL） and atrial tachycardia （AT）. Each step for the procedures and the follow-up outcomes were compared correspondingly. Results The total procedure time was 107.23 ± 28.92 min in modeling group vs 93.47 ±26.09 min in non-modeling group （ P 〉 0.05 ）. The X-ray exposure time was significantly longer in modeling group （21.09 ±6. 49 rain） than in non-modeling group （14. 16 ± 5.35 min）. The CPVI times of right pulmonary veins and left pulmonary veins were 28. 14 ± 9. 26 min was 27.29 ± 18.53 min in modeling group respectively, vs 18.00 ±4. 51 min and 23.94 ± 7. 10 min in non-modeling group respectively, （P 〈 0. 05 ）. There is no significant difference between modeling group （85.7%） and non-modeling group （82.4%） over follow-up period of 2 to 13 months. Confusions CartoXP system guided catheter ablation of PAF without modeling of left atrium and pulmonary veins took less time in X-ray exposure and ablation steps, comparing with left atrium modeling procedure.     

大鼠肋生长板软骨细胞的分离、培养及生物学特性的研究

目的：建立大鼠肋生长板软骨细胞（RGC）分离、培养的方法，探讨其生物学特性，为软骨细胞增殖分化的调控和软骨组织工程修复的研究建立实验基础。 方法： 显微解剖出大鼠肋生长板软骨，酶消化法获得分散的单个RGC。观察单层培养的不同代数RGC的细胞形态变化,并进行细胞生长动力学分析；组织化学和免疫细胞化学方法检测不同代数RGC蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达。 结果： 本实验分离的RGC中活细胞比例大于98%；原代培养细胞呈多角形或圆形，第6代细胞仍保持多角的形态；前4代细胞的每日倍增指数随着传代次数的增加而增加，第5代后显著降低；原代培养的RGC中Ⅱ型胶原阳性染色细胞比例大于95%，阿尔新蓝染色也呈阳性；随着传代次数增加阳性细胞的比例下降。 结论： 本研究所建立的分离培养方法可以获得高纯度、高活性的软骨细胞，前3代RGC保持了在体软骨细胞的表型是研究软骨增殖分化调控的良好材料。     

应用荧光原位杂交快速产前诊断唐氏综合征

目的建立稳定的荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术并用于唐氏综合征的产前诊断.方法对126例孕17w～24w未培养羊水细胞进行FISH快速产前诊断,以培养羊水细胞常规G显带核型分析作为FISH检测结果对照.结果被检126例羊水未培养细胞均获得诊断结果,发现4例异常胎儿.3例为标准型唐氏综合征;另1例为嵌合体.FISH检测与常规核型分析结果一致.结论FISH用于唐氏综合征产前诊断具有快速、简便、所用样本量少的优势,结果准确可靠,可达到产前诊断要求,有较大临床应用价值.     

体质指数对女性胫骨超声传导速度的影响

目的研究体质指数(BMI)对骨峰值期和绝经后女性的胫骨超声传导速度(SOS)的影响。方法采用骨定量超声仪测量399例骨峰值期和589例绝经后女性的胫骨SOS值,并按BMI不同各分为低体重组、正常体重组和肥胖组进行分析。结果骨峰值期,女性BMI与胫骨SOS无相关性(r=0.054,P=0.287),低体重组、正常体重组和肥胖组的胫骨SOS差异无显著性(F=0.2,P=0.801);绝经后,女性BMI与胫骨SOS呈正相关(r=0.115,P=0.006),肥胖组的胫骨SOS高于低体重组和正常体重组(F=4.2,P=0.016),且肥胖组和正常体重组骨质疏松症的患病率均低于低体重组(P<0.001)。结论女性骨峰值期,BMI对胫骨的强度影响小;绝经后,BMI大者能延缓胫骨的强度下降。     

激发型CD28单抗直接激发的T细胞及其表型

1.用羊抗鼠IgG(20μg/ml)包被96孔细胞培养板,再加入游离的激发型CD28单抗(终浓度为5 μg/ml);2.用激发型CD28单抗(10 μg/ml)直接包被96孔细胞培养板,然后分别加入10~5个/孔经E-花结实验获取的人外周血T细胞(PBTC),其中CD3+T>95％。逐日观察细胞的生长状态并绘制生长曲线,用3H-TdR掺入法分析PBTC的增殖效应,用FITC标记的单抗经流式细胞仪(FCM)分析细胞CD3、CD4、CD8、CTLA-4、4-1BB及OX40的表达。逐日细胞计数的结果表明,经羊抗鼠IgG包被后加入游离激发型CD28单抗或直接用激发型CD28单抗包被,均能引发PBTC的活化与增殖效应,激发3 d时的刺激指数(SI)大于9,细胞CD3、CD4、CD8、CTLA-4、4-1BB及OX40的阳性表达率(x±s,％)分别为98.6±0.2、74.4±3.1、22.5±2.0、2.1±0.4、18.4±2.2、35.2±3.5。与XGB7(作为APC)刺激的T细胞相比,经CD28单抗直接激发的T细胞,CD4+/CD8+T细胞的比值及OX40+T细胞的百分率升高(P<0.01),但不表达负性调节分子CTLA-4。     

金粉蕨素对甲萘醌损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的: 探讨金粉蕨素对氧化应激损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用。方法: 以甲萘醌损伤人脐静脉内皮细胞,作为氧化损伤模型;采用MTT法,测定内皮细胞的生长抑制率;用硝酸还原酶法测定培养液中NO₂^-／NO₃^-含量;以Westernblot方法检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性及小凹蛋白(caveolin-1)表达。结果: 金粉蕨素呈剂量依赖性地降低甲萘醌对内皮细胞的生长抑制率,增加培养液中NO₂^-／NO₃^-含量,保护eNOS活性、阻止caveolin-1表达下降。结论: 金粉蕨素可能通过caveolin-1/eNOS通路介导对抗甲萘醌对内皮细胞的氧化损伤作用。