用SYBR Green I实时逆转录-聚合酶链反应定量检测人、小鼠精子中CatSper1 mRNA

目的:建立并优化SYBR GreenI实时RT-PCR体系,定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。方法:用TRIzol分别提取人、小鼠成熟精子中的总RNA,逆转录后用SYBR GreenI实时PCR定量检测CatSper1 mRNA。SYBR GreenI实时PCR采用普通PCR试剂,加入SYBR GreenI染料,优化退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例,并在PCR循环时采用四步法以消除引物二聚体的影响。优化完成后用不同浓度的精子cDNA为模板做标准曲线,以检测SYBR GreenI实时PCR的扩增效率。结果:定量检测CatSper1 mRNA的SYBR GreenI实时PCR体系适宜退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例分别为63℃、3.0mmol/L和1∶1,四步法中采集荧光的温度为88℃。优化后用人和小鼠精子cDNA为模板做标准曲线分别为Y=-3.402log(X)+25.99和Y=-3.409log(X)+24.09,扩增效率分别为96.8%和96.5%,可定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。结论:用普通的逆转录及PCR系统和试剂,建立了一种方便、廉价、可靠的SYBR GreenI实时荧光定量RT-PCR系统,可用于人、小鼠精子中CatSper1 mRNA定量检测。     

定量评估64层螺旋CT血管成像与DSA显示冠状动脉狭窄的能力和可靠性

目的定量评估64层螺旋CT（MSCT）与DSA2种成像方法显示冠状动脉狭窄及支架内再狭窄的能力和可靠性。方法应用心脏动态体模，设定心率为0、50、70、90次／min，对内径3mm的模拟冠状动脉（内设25％、50％、75％3段狭窄）及内径4mm的模拟带支架冠状动脉（支架段内设50％、75％2段狭窄）分别进行MSCT与DSA成像，将MSCT与DSA对应数据进行分析。结果（1）MSCT对25％、50％、75％3段狭窄的平均测量值为（30．0±1．4）％、（49．5±1．3）％、（72．9±3．9）％（P值分别为0．005、0．531、0．369）；DSA分别为（24．8±2．0）％、（48．2±2．1）％、（75．3±2．4）％（P值分别为0．883、0．180、0．796）。（2）MSCT图像伪影随心率增快而增加，心率≥70次／min影响变明显；DSA不受心率影响，所有心率下都可清晰地显示狭窄程度，无伪影。（3）MSCT与DSA测量血管狭窄程度有较好的相关性（r=0．995，P=0．000）。（4）MSCT可同时显示支架及支架内狭窄，但显示支架内狭窄能力有限，对50％狭窄分别显示为（46．4±4．5）％（心率为0）和（43．6±5．7）％（心率为50次／min），与标准值（50％）相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。DSA可清晰显示支架内狭窄，但不能很好显示支架形态。结论（1）MSCT与DSA评价冠状动脉狭窄结果可靠，MSCT受心率的影响大，时间分辨率有待提高，作为排除性诊断有很高的临床应用价值；MSCT对于支架内再狭窄的判断尚有一定局限性，但在管径较粗和低心率条件下评价支架内再狭窄有一定价值。     

全膝关节置换翻修术的Meta分析

目的 通过对已报道的全膝关节置换翻修术文献进行总结分析,讨探膝关节置换翻修术前后的膝关节功能、翻修的主要原因、主要并发症及不同假体的术后疗效.方法 按照以下标准收集和分析有关全膝关节置换翻修术的文献:①1990年至2002年间发表,②报告患者数大于10例,③采用通用的膝关节评分标准.一名骨科专科医生独立收集数据,一名医学统计学专家独立采用Meta统计方法分析数据.结果 共有33 篇符合条件的文献被收集.患者共1356 例,其中男429例,女611例(部分文献性别分类数据缺失),平均年龄67岁(45～49岁),加权平均随访时间57个月( 6～108 个月),加权平均术前膝关节功能总评分为49 分(15～94分),术后为84分( 58～109分),全膝关节置换翻修术前后的总评分、功能评分、活动范围等有显著性提高,差异有统计学意义(总评分t=12.507,P<0.01, 功能评分t=4.704,P<0.01,活动范围:t=5.346,P< 0.01).全膝关节置换翻修术的原因主要是假体松动(55%),其它包括聚乙烯磨损(11%)、假体不稳(10%)、感染(7%).翻修术后的主要并发症仍然为假体松动(18%),其它包括假体不稳(16% )、感染(16% )、髌骨问题( 15% )及不明原因的膝关节疼痛(13%).髌骨问题包括髌骨脱位、半脱位、髌韧带撕裂、髌股关节疼痛等.结论 可以认为膝关节置换后翻修术是一种安全有效的手术.假体松动是膝关节置换翻新的主要原因和并发症.     

眼刺激试验替代方法研究进展

由于动物眼刺激试验 (Draizetest)本身存在的问题和“3R”运动的兴起 ,各国广泛开展了动物眼刺激试验替代方法的研究和验证试验。各种替代方法作用机制不一 ,优缺点各异 ,故需要一组互补性体外试验来对化学物质的眼刺激性进行评价     

构筑健康教育工程实现社会医院双赢

介绍了四川大学华西医院10年来构筑普及医疗卫生保健知识系统工程的认识体会、经验和取得的成效,指出医院在普及卫生保健知识中的职责和优势。     

BRMS1在不同转移性乳腺癌细胞中的表达及其与HDAC活性的关系

目的:探讨肿瘤转移抑制基因（BRMS1）在不同转移性乳腺癌细胞中的表达及其与组蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性的关系和意义。方法:采用 RT-PCR技术检测3种细胞株〔非转移性MCF-7(A株)，低转移性MDA-MB-453（B株），高转移性MDA-MB-231（C株）〕中BRMS1基因的表达。用Western blot检测在上述3种细胞株中BRMS1蛋白的表达。ELISA检测3种细胞株中HDAC的活性。结果:(1) 在A，B，C 3种细胞株中BRMS1 基因表达依次比例为3.1∶2.0∶1.0。C细胞株比A细胞株BRMS1基因表达降低2.1倍，BRMS1 基因表达随转移程度的增高而明显降低（P＜0. 001)。(2)在A，B，C 3种细胞株中BRMS1蛋白表达依次比例为3.2∶1.9∶1.0。C细胞株比A细胞株BRMS1蛋白表达降低2.2倍，BRMS1随转移程度的增高而明显降低（P＜0. 001)。(3)A，B，C 3种细胞株中HDAC活性依次比例为1.0∶1. 8∶2.6。C细胞株比A细胞株HDAC活性增高1.6倍，随转移程度的增高HDAC活性升高（P＜0. 001)。结论:（1）BRMS1基因和蛋白的表达在3种细胞株中随转移程度的增高而呈递减趋势。（2）HDAC活性在3种细胞株中随转移潜能的增高而呈递增趋势;提示BRMS1可能通过参与调节HDAC活性调控乳腺癌的转移。     

预稀释末稍血样IHA诊断血吸虫病的评价

目的时预稀释末稍血样IHA诊断血吸虫的效果进行评价。方法在实验室内对46例确诊病例分别以预稀释末稍血样和静脉血清作IHA，对二者敏感性进行比较，等于3w后用上述两种血样重复操作，对二者稳定性进行比较；在查病现场对327例人群分别以预稀释末稍血样和静脉血清作IHA，对二者阳性检出率进行比较。结果实验室敏感性评价两组血样1：10、1：201：40和1：640四个滴度阳性数完全相同，其余滴度二者阳性数虽有不同，但经检验差异均无显著性（P〉0．05）；实验室稳定性评价两组血样间隔3w重复操作，各滴度阳性符合率经检验，差异均无显著性（P〉0．05）；现场查病评价两种血样1：10、1：20和1：40三个滴度各自阳性检出率经检验，差异均无显著性（P〉0．05）。结论预稀释末稍血样IHA敏感性、稳定性和阳性检出率与血清IHA比较，差异均无显著性（P〉0．05），可以用于血吸虫病的诊断。     

增白牙膏去除牙面外源性色素临床实验

目的测试一种增白牙膏用于减少牙面外源性色素的效果. 方法 研究对象121例,年龄21～57岁.实验组60例,对照组61例,两组年龄和性别分布差异无显著性.采用双盲法两组平行设计,根据Lobene色斑指数(LSI)和性别均衡分为两组,随机分配使用实验牙膏或对照牙膏.实验组牙膏含3 %植酸钠和1.3 %焦磷酸钠,对照组牙膏不含相应成分.临床检查分别在基线、3周和6周后进行,由同一人测定LSI.问卷询问刷牙情况. 结果 基线检查、实验3周和6周后实验组LSI分别为3.00、2.16和1.47, 对照组分别为3.10、3.08和2.18.基线检查两组LSI差别无显著性意义, 实验3周和6周后两组LSI比较差异均有显著性意义. 实验组LSI在3周和6周后分别比基线时降低28 %和51 %. 结论含3 %植酸钠和1.3 %焦磷酸钠牙膏能有效减少牙面色素,效果随使用时间而增强.     

微创小切口全髋关节置换术的手术配合

目的 探讨医疗服务中心工作中常见的安全问题及其对策。方法 对我院医疗服务中心2004年4月至2007年3月存在的护理安全隐患问题进行回顾性分析。结果 发生安全隐患共80次，造成不良后果25次。结论 医疗服务中心工作存在较大的安全隐患，应采取措施优化服务流程，严格遵守操作规程；强化法律意识．做好各项记录；建立不良事件报告系统，加强职业防护意识培训；完善医疗职业保险制度，保障员工利益等措施以保障医疗安全，提高服务质量。     

尼尔雌醇和左炔诺孕酮对人成骨肉瘤 MG-63细胞株雌激素受体亚型的作用

目的：观察不同浓度的尼尔雌醇(NYL)和左炔诺孕酮(LNG)对人成骨肉瘤MG-63细胞株ERα和ERβ表达的作用，探讨旁分泌效应对ERα和ERβ基因表达的影响。方法：人成骨肉瘤MG-63细胞株分为（1）空白对照组：用含1% BSA无血清MEM培养液培养48 h；（2）阳性对照组：培养液中加入10-8 mol/L的17β-estradiol (E2) 培养48 h；（3）药物处理组：培养液中分别加入10-10，10-8，10-6 mol/L的NYL或LNG培养48 h；（4）药物处理+换液组：培养液中分别加入10-10 mol/L的NYL或10-8 mol/L LNG培养48 h，每12 h更换新的含有相应药物的培养液。用半定量RT-PCR检测各组细胞ERα和ERβmRNA的表达。结果：NYL及LNG均能诱导ERα和ERβ亚型mRNA表达上调，诱导ERαmRNA表达的最强作用浓度均为10-6 mol/L。NYL，LNG对ERβ mRNA表达最强作用浓度分别为10-10，10-8 mol/L。每12 h更换干预培养液对ERα表达无影响，但可抑制ERβ的表达。结论：NYL和LNG均可诱导MG-63细胞株ERα和ERβ mRNA表达上调，且2种亚型的表达存在相互制约关系；在NYL和LNG诱导ER亚型表达上调过程中ERβ的表达可能受到旁分泌作用的影响。