一株碱性低温脂肪酶产生菌发酵条件的优化

通过单因素实验,对SYBC Wu-3菌摇床发酵产脂肪酶的培养基组成和培养条件进行优化,得出较佳的产酶培养基组成配方为:蛋白胨5 g/L,酵母膏 6 g/L,NaH2PO4 3 g/L; 油脂250 mL/L,乳化剂OP 25 mL/L.最优发酵条件为250 mL的摇瓶装液量50 mL,培养温度30 ℃,发酵时间72 h.经过优化后发酵液脂肪酶酶活力最高可达到10.68 U/mL,较优化前提高了2.8倍.     

肝功能衰竭大鼠脑水通道蛋白-4表达与MR扩散加权成像的相关性研究

目的研究水通道蛋白-4（AQP-4）在急、慢性肝功能衰竭时脑组织中的表达规律，应用MR扩散加权成像（DWI）探讨脑水肿的分子生物学机制。方法雄性SD大鼠65只采用数字表法随机分为急性组（25只）、慢性组（25只）和对照组（15只），分别诱发急、慢性肝功能衰竭。行DWI观察异常信号分布情况，测量顶部皮质区、外侧部皮质区和邻近侧脑室区的DWI信号强度。处死后进行血氨检测，取与DWI检查对应的大脑层面切片行病理观察、免疫组织化学及逆转录．聚合酶链式反应（RT—PCR）检测，检测AQP-4蛋白表达水平，并进行统计学分析。结果急性组肝细胞坏死及脑水肿明显，慢性组呈肝硬化改变，脑水肿不明显。血氨浓度急性组、慢性组和对照组分别为（516±46）、（158±26）和（148±32）μmol／L，差异有统计学意义（F=188．325，P〈0．01）。顶部皮质区、外侧部皮质区和邻近侧脑室区的DWI信号强度对照组分别为516±160、727±183和656±181；急性组分别为1766±438、1223±503和1216±446；慢性组分别为700±213、820±263和713±243，差异均有统计学意义（F值分别为44．612、3．422和5．581，P值均〈0．05）。相应区域AQP-4蛋白表达水平（用平均灰度值表示）对照组分别为7379±1617、8104±2093和4851±2178；急性组分别为9580±2616、11057±2334和2949±1735；慢性组分别为12137±2332、11135±3102和7688±2925，3组间差异均有统计学意义（F值分别为11．414、4．602和7．002，P值均〈0．05）。急性组AQP-4蛋白表达水平与DWI信号强度有相关性（r=0．756，P〈0．05），慢性组AQP-4蛋白表达水平与DWI信号强度无相关关系（r=0．236，P〉0．05）。结论在急、慢性肝功能衰竭中血氨增高是导致脑内能量代谢异常、星形胶质细胞内AQP-4mRNA和蛋白表达增加的主要因素；DWI技术发现的信号异常可很好的反映脑水肿、AQP-4蛋白表达异常的范围、程度。     

丘脑底核电刺激治疗帕金森病术后程控问题分析

目的 总结丘脑底核电刺激治疗帕金森病术后程控经验，提高术后程控水平，改善疗效。方法 对32例丘脑底核电刺激术后的帕金森病患者进行程控，其中单侧植入者6例，双侧26例；年龄40～73岁，在不同刺激器植入中心接受手术，程控时间术后3周至4年之间。程控前均停药10h以上，程控参数调整主要为刺激电极触点、电压、频率、脉宽四项，程控过程中密切观察病员肌张力和震颤等症状改变以及副反应发生情况，作好详细记录，并分别评估患者程控前后药物“关期”和“开期”症状改善情况，部分行UPDRS评分。结果 31例（97％）患者术后症状得到不同程度改善。刺激电极触点选择中，共29例患者采用单极模式，3例因出现持续、无法耐受的副反应采用双极模式。除1位患者使用循环模式外，其他患者均使用持续刺激模式。刺激电压2．0-4．0V，主要集中于2．8～3-3V，是主要的程控调整参数，电压的高低与病人UPDRS运动评分不具有相关性（P〉0．05）。刺激脉宽60～120μs，刺激频率130～185Hz。药物“关”期，患者UPDRS运动评分，在刺激器打开时，平均18．7分；刺激器关闭时平均47．9分。在刺激器打开情况下，药物“开”期患者症状仍然有进一步缓解．主要表现为步态、全身协调动作方面。合并异动患者6例中，3例适当降低刺激电量，1例提高电压后，异动缓解。结论 丘脑底核电刺激术是有效的帕金森病症状控制手段。准确植入刺激电极是术后获得良好症状控制的前提条件，而术后程控是脑深部刺激器置入术后的关键环节．精确的参数调整能够满意控制病人症状。     

用SYBR Green I实时逆转录-聚合酶链反应定量检测人、小鼠精子中CatSper1 mRNA

目的:建立并优化SYBR GreenI实时RT-PCR体系,定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。方法:用TRIzol分别提取人、小鼠成熟精子中的总RNA,逆转录后用SYBR GreenI实时PCR定量检测CatSper1 mRNA。SYBR GreenI实时PCR采用普通PCR试剂,加入SYBR GreenI染料,优化退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例,并在PCR循环时采用四步法以消除引物二聚体的影响。优化完成后用不同浓度的精子cDNA为模板做标准曲线,以检测SYBR GreenI实时PCR的扩增效率。结果:定量检测CatSper1 mRNA的SYBR GreenI实时PCR体系适宜退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例分别为63℃、3.0mmol/L和1∶1,四步法中采集荧光的温度为88℃。优化后用人和小鼠精子cDNA为模板做标准曲线分别为Y=-3.402log(X)+25.99和Y=-3.409log(X)+24.09,扩增效率分别为96.8%和96.5%,可定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。结论:用普通的逆转录及PCR系统和试剂,建立了一种方便、廉价、可靠的SYBR GreenI实时荧光定量RT-PCR系统,可用于人、小鼠精子中CatSper1 mRNA定量检测。     

定量评估64层螺旋CT血管成像与DSA显示冠状动脉狭窄的能力和可靠性

目的定量评估64层螺旋CT（MSCT）与DSA2种成像方法显示冠状动脉狭窄及支架内再狭窄的能力和可靠性。方法应用心脏动态体模，设定心率为0、50、70、90次／min，对内径3mm的模拟冠状动脉（内设25％、50％、75％3段狭窄）及内径4mm的模拟带支架冠状动脉（支架段内设50％、75％2段狭窄）分别进行MSCT与DSA成像，将MSCT与DSA对应数据进行分析。结果（1）MSCT对25％、50％、75％3段狭窄的平均测量值为（30．0±1．4）％、（49．5±1．3）％、（72．9±3．9）％（P值分别为0．005、0．531、0．369）；DSA分别为（24．8±2．0）％、（48．2±2．1）％、（75．3±2．4）％（P值分别为0．883、0．180、0．796）。（2）MSCT图像伪影随心率增快而增加，心率≥70次／min影响变明显；DSA不受心率影响，所有心率下都可清晰地显示狭窄程度，无伪影。（3）MSCT与DSA测量血管狭窄程度有较好的相关性（r=0．995，P=0．000）。（4）MSCT可同时显示支架及支架内狭窄，但显示支架内狭窄能力有限，对50％狭窄分别显示为（46．4±4．5）％（心率为0）和（43．6±5．7）％（心率为50次／min），与标准值（50％）相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。DSA可清晰显示支架内狭窄，但不能很好显示支架形态。结论（1）MSCT与DSA评价冠状动脉狭窄结果可靠，MSCT受心率的影响大，时间分辨率有待提高，作为排除性诊断有很高的临床应用价值；MSCT对于支架内再狭窄的判断尚有一定局限性，但在管径较粗和低心率条件下评价支架内再狭窄有一定价值。     

全膝关节置换翻修术的Meta分析

目的 通过对已报道的全膝关节置换翻修术文献进行总结分析,讨探膝关节置换翻修术前后的膝关节功能、翻修的主要原因、主要并发症及不同假体的术后疗效.方法 按照以下标准收集和分析有关全膝关节置换翻修术的文献:①1990年至2002年间发表,②报告患者数大于10例,③采用通用的膝关节评分标准.一名骨科专科医生独立收集数据,一名医学统计学专家独立采用Meta统计方法分析数据.结果 共有33 篇符合条件的文献被收集.患者共1356 例,其中男429例,女611例(部分文献性别分类数据缺失),平均年龄67岁(45～49岁),加权平均随访时间57个月( 6～108 个月),加权平均术前膝关节功能总评分为49 分(15～94分),术后为84分( 58～109分),全膝关节置换翻修术前后的总评分、功能评分、活动范围等有显著性提高,差异有统计学意义(总评分t=12.507,P<0.01, 功能评分t=4.704,P<0.01,活动范围:t=5.346,P< 0.01).全膝关节置换翻修术的原因主要是假体松动(55%),其它包括聚乙烯磨损(11%)、假体不稳(10%)、感染(7%).翻修术后的主要并发症仍然为假体松动(18%),其它包括假体不稳(16% )、感染(16% )、髌骨问题( 15% )及不明原因的膝关节疼痛(13%).髌骨问题包括髌骨脱位、半脱位、髌韧带撕裂、髌股关节疼痛等.结论 可以认为膝关节置换后翻修术是一种安全有效的手术.假体松动是膝关节置换翻新的主要原因和并发症.     

构筑健康教育工程实现社会医院双赢

介绍了四川大学华西医院10年来构筑普及医疗卫生保健知识系统工程的认识体会、经验和取得的成效,指出医院在普及卫生保健知识中的职责和优势。     

中西药物保留灌肠合并针灸治疗溃疡性结肠炎的临床研究

目的 观察中西药物保留灌肠合并针灸治疗溃疡性结肠炎(UC)的疗效.方法 对确诊的63例UC患者随机分为两组,治疗组(32例)用中西药物150 mL睡前保留灌肠合并针灸治疗,每日1次,疗程4周;对照组(31例)用强的松龙100 mg、庆大霉素16万u加生理盐水150 mL睡前保留灌肠,每日1次,疗程4周.然后比较疗效.结果 治疗组疗效明显高于对照组,总有效率分别为96.9%和77.4%,1年复发率分别为9.37%和25.8% (P<0.05).两组差异有统计学意义.结论 中西药物保留灌肠合并针灸治疗UC疗效显著,复发率低,有临床应用价值.     

预稀释末稍血样IHA诊断血吸虫病的评价

目的时预稀释末稍血样IHA诊断血吸虫的效果进行评价。方法在实验室内对46例确诊病例分别以预稀释末稍血样和静脉血清作IHA，对二者敏感性进行比较，等于3w后用上述两种血样重复操作，对二者稳定性进行比较；在查病现场对327例人群分别以预稀释末稍血样和静脉血清作IHA，对二者阳性检出率进行比较。结果实验室敏感性评价两组血样1：10、1：201：40和1：640四个滴度阳性数完全相同，其余滴度二者阳性数虽有不同，但经检验差异均无显著性（P〉0．05）；实验室稳定性评价两组血样间隔3w重复操作，各滴度阳性符合率经检验，差异均无显著性（P〉0．05）；现场查病评价两种血样1：10、1：20和1：40三个滴度各自阳性检出率经检验，差异均无显著性（P〉0．05）。结论预稀释末稍血样IHA敏感性、稳定性和阳性检出率与血清IHA比较，差异均无显著性（P〉0．05），可以用于血吸虫病的诊断。     

血清铁和铁蛋白与肝病患者肝纤维化指标的关系

OBJECTIVE: To study the relationship of serum iron and ferritin with the indicators for hepatic fibrosis and hepatic iron overload. METHODS: Liver tissue specimens were obtained from 41 patients with benign (16) or malignant (25) liver diseases by 1 second liver biopsy, and routine microscopic examination was performed after haematoxylin-eosin (HE) and Perl's Prussian staining. Atomic absorption spectrum, radioimmunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay were respectively employed to examine the serum levels of iron, ferritin, hyaluronic acid, laminin, human procollagen type , and collagen type . RESULTS: Between patients with benign and malignant liver diseases, significant differences were found in the serum ferritin levels (P < 0.05), but not in serum iron levels (P > 0.05). It was also noted that the levels of the indicators for hepatic fibrosis in patients with benign and early-stage malignant diseases varied significantly from the levels in normal subjects, but these differences were not observed between normal subjects and patients with end-stage hepatic malignancies. Serum iron and ferritin were found to be associated with serum laminin levels (serum iron: r=0.439, P=0.031; serum ferritin: r=0.476, P=0.016), and no iron granules detected in the tissue specimens of hepatocellular carcinoma. CONCLUSIONS: Most of the patients with hepatocellular carcinoma have elevated serum ferritin levels. The serum levels of iron and ferritin are statistically correlated with serum laminin level. Obvious reduction of iron content is typical of hepatic malignant tissues in comparison with the benign tissues, and the reduction in the levels of the indicators for hepatic fibrosis might involve the inhibition of collagen synthesis in the tumor tissues from patients with end-stage hepatocellular carcinoma. Most of the cases of alcoholic fatty liver are complicated by liver iron overload, often marked by serum iron and ferritin levels.