小柴胡汤逆转人肝癌细胞BEL-7402／5-FU 的多药耐药作用

目的:研究小柴胡汤对BEL-7402/5-FU细胞多药耐药的逆转作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同化疗药物以及小柴胡汤对BEL-7402/5-FU细胞的半数抑制浓度(IC50),计算耐药指数和小柴胡汤的逆转倍数;流式细胞仪检测细胞内阿霉素的荧光强度;RT-PCR检测mdr1基因表达;western blot检测p-gp蛋白表达。结果:BEL-7402/5-FU耐药株对5-FU和阿霉素顺铂均具有耐药性,耐药指数分别是6 501.99和31.73;0.5 mg/ml小柴胡汤和5-FU、阿霉素联合应用,其逆转倍数分别是1.66、1.50;1.0 mg/ml小柴胡汤和5-FU、阿霉素联合应用,其逆转倍数分别是3.44、5.58;小柴胡汤增强阿霉素的荧光强度;小柴胡汤降低mdr1基因表达和p-gp蛋白表达,各个浓度均具有统计学意义。结论:小柴胡汤可以抑制mdr1基因编码蛋白产物p-gp的表达,增加细胞内化疗药物的浓度,从而逆转了肝癌细胞的多药耐药性。     

石印玉运用经方辨治伤科疾病经验

整理石氏伤科第四代传人石印玉教授的4则临床病案,体现了石教授运用经方治疗伤科疾病的经验,反映石氏伤科提倡“十三科一理贯之”、注重整体观念、强调气血兼顾、内外结合的学术思想。     

腹腔镜手术治疗老年结直肠癌患者的安全性

目的:评价腹腔镜手术治疗老年结直肠癌患者的安全性。方法:回顾性分析我院年2003年6月至2013年6月收治的903例行腹腔镜与开腹手术的老年结直肠癌患者的临床资料,比较两组的手术学指标、术后恢复及肿瘤学指标。结果:两组患者的临床病理资料及常见慢性合并症构成比较,差异无统计学意义。腹腔镜组与开腹组比较,患者手术时间[(268.3±105)min vs.(201.5±81.0)min]、术中出血量[(130.8±142.2)m L vs.(232.5±292.4)m L]、术后肠功能恢复时间为[(3.2±1.6)d vs.(3.8±1.4)d]、进食流质时间(4.4±1.6)d vs.(4.9±1.5)d]、术后住院时间[(13.4±6.8)d vs.(15.4±8.5)d]、术中主要并发症发生率[2.0%vs.3.4%]、术后主要并发症发生率[18.0%vs.25.2%]比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。肺部感染、切口愈合不良和心血管意外发生率腹腔镜组显著低于开腹组(P<0.05)。在切除标本长度、清扫淋巴结数量方面两组比较差异无统计学意义(P>0.05),所有标本切缘病理学检查均为阴性。结论:只要做好充分的术前准备,掌握好手术时机,在熟练掌握腹腔镜结直肠癌手术技术的基础上,对老年结直肠癌患者实施腹腔镜手术是安全可行的。     

轮状病毒细胞免疫机制的研究进展

轮状病毒（RV）是婴幼儿腹泻的主要病原，随着对RV感染免疫研究的不断深入，细胞免疫在其发病和疫苗研究中的作用越来越受到重视。T淋巴细胞参与了RV感染的免疫及保护，CD4^＋T细胞与CD8^＋T细胞对于RV感染清除均起到非常关键的作用，而且对于不同的RV表位随着时间的变化及组织的不同T细胞的应答也不同。细胞毒性T细胞则通过杀伤RV感染的细胞以清除病毒感染。此外IL-6、IL-2、IL-12、TNF—α和IFN-γ等细胞因子在轮状病毒感染时均有升高，在轮状病毒免疫调节中发挥作用。     

RAPD技术在宁夏人源细粒棘球蚴基因分型中的应用

目的建立RAPD分子分型技术并将其应用于人源细粒棘球蚴基因分型研究。方法用单因素筛选方法建立PCR-RAPD分析体系,并用建立的RAPD分析方法对分离自宁夏不同地区13例包虫病病人的细粒棘球蚴进行RAPD指纹图谱分析。结果采用20条随机引物对细粒棘球蚴DNA进行扩增,其中11条引物呈现良好的多态性和稳定性,共得到232条片段。根据RAPD指纹图谱将13株人源细粒棘球蚴分为Ⅰ型(53.85%)、Ⅱ型(23.08%)、Ⅲ型(7.69%)和Ⅳ型(15.38%)4个种内基因类群。结论宁夏地区人源细粒棘球蚴之间存在不同的种内遗传差异。     

后路腰椎间盘镜髓核摘除术的远期疗效

目的比较MED术与开窗术治疗单节段腰椎间盘突出症的远期疗效。方法对后路单节段腰椎间盘摘除术的39例患者(MED组22例;开窗组17例)进行问卷调查、JOA评分和复查腰椎MRI。在MRI图像上观察并测量手术前后硬膜外压痕的大小、椎间隙的高度、软骨终板的退变以及手术区域信号的改变情况。结果MED组随访(81±8)个月与开窗组随访(73±6)个月的主观评价(满意率、恢复原工作情况、对手术的评价)、客观评价(JOA评分、改善率和优良率)、MRI改变以及并发症比较差异无统计学意义(P0.05)。结论两种手术方式术后长期随访在患者的主观评价、客观评价、MRI改变以及并发症方面没有明显差别。     

联合激动Toll样受体的树突细胞诱导抗结肠癌免疫反应

目的 观察联合激动Toll样受体(TLR)能否使树突细胞(OC)达到更理想的成熟状态,并诱导出抗结肠癌免疫反应.方法 在体外培养DC过程中加入TLR3和TLR7/8配体,流式细胞仪检测Dc重要表型表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-12分泌量,~3H-thymidine掺入法检测DC促淋巴细胞增殖能力,使用CEA转基因鼠和转染CEA的MC38小鼠结肠癌细胞株(MC38-CEA)构建动物模型,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测DC诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对MC38-CEA的体外杀伤作用.结果 联合激动TLR的DC与常规组比较,能高水平表达DC重要表型,分泌更多IL-12(P＜0.01),更有效刺激淋巴细胞增殖(P＜0.01),荷载抗原后诱导的效应细胞在效靶比为20:1和40:1时,对MC38-CEA的杀伤率为(31.9±3.3)%和(39.1±4.2)%,而其他各组无明显杀伤作用(P＜0.05).结论 联合激动TLR的DC具有更理想的成熟度,能诱导更有效的抗肠癌免疫反应,提示联合激动TLR可能是增强DC肿瘤疫苗疗效的有效途径.     

联合应用坦索罗辛和托特罗定治疗男性顽固性下尿路症状的临床研究

目的:探讨及对比联合应用高选择性α受体阻滞剂(坦索罗辛)和M受体阻滞剂(托特罗定)及单用高选择性α受体阻滞剂治疗男性顽固性下尿路症状的临床疗效及安全性。方法:2009年4月至2009年12月期间收集我院184例顽固性下尿路症状(LUTS)的男性前列腺增生患者,病程4周至2年。所有患者均为应用高选择性α受体阻滞剂(坦索罗辛)0.2 mg,1次/d,治疗1周后LUTS症状无改善。入选病例随机分成2组,其中坦索罗辛组89例继续应用坦索罗辛0.2 mg,1次/d,治疗4周;联合治疗组95例联合应用高选择性α受体阻滞剂(坦索罗辛)和M受体阻滞剂(托特罗定),给予坦索罗辛0.2 mg 1次/d+托特罗定2 mg 2次/d,治疗4周。分组治疗前后分别进行国际前列腺症状储尿期症状评分(储尿期IPSS)、生活质量评分(QOL)和最大尿流率(Qmax)检测,评估治疗后LUTS症状的改善情况。结果:坦索罗辛组储尿期IPSS、QOL总体评分分别由治疗前的(13.23±4.39)、(4.23±1.27)分下降到治疗后的(12.21±4.07)、(3.53±0.9)分,Qmax由治疗前的(12.31±8.39)ml/s上升到治疗后的(14.12±8.62)ml/s,与治疗前相比差异均无显著性(P>0.05)。联合治疗组储尿期IPSS、QOL总体评分分别由治疗前的(14.45±5.31)、(4.45±0.79)分降到治疗后的(6.56±2.03)、(2.34±0.73)分,Qmax由治疗前的(11.41±9.21)ml/s上升到治疗后的(15.52±8.35)ml/s,与联合治疗前相比差异均有显著性(P<0.01)。184例患者均无严重并发症出现。结论:联合应用坦索罗辛和托特罗定能明显缓解男性顽固性下尿路症状,改善患者的生活质量。未见严重不良反应和急性尿潴留发生。     

中医药物外治疗法在男科疾病临床应用研究进展

中医药物外治疗法治疗男科疾病有独特疗效,目前临床应用较为广泛,今后应注重大样本、多中心、随机对照临床研究及机理探讨。     

人肝癌PLC/PRF-5细胞中干细胞样细胞的分离及其特异性miRNAs的筛选

目的:分选及鉴定人肝癌PLC/PRF-5细胞中的肝癌干细胞样细胞,研究其microRNAs(miRNAs)表达谱。方法:以ABCG2为表面标志,免疫磁珠法分选、流式细胞术检测ABCG2+和ABCG2-PLC/PRF-5细胞,观察ABCG2+与ABCG2-PLC/PRF-5细胞的琼脂克隆形成能力和接种NOD/SCID小鼠的成瘤能力。应用miRNA芯片筛选ABCG2+和ABCG2-PLC/PRF-5细胞差异表达的miRNAs,real-time PCR验证部分差异表达的miRNAs。结果:免疫磁珠分选的ABCG2+PLC/PRF-5细胞纯度可达(84.20±4.52)%。ABCG2+PLC/PRF-5细胞比ABCG2-PLC/PRF-5细胞形成更多、更大的克隆集落(47.17±10.50 vs23.33±7.31,P<0.05);NOD/SCID小鼠接种1×104个ABCG2+PLC/PRF-5细胞即可成瘤,而ABCG2-PLC/PRF-5细胞至少需要5×105个才可成瘤;5×105个细胞时,ABCG2+PLC/PRF-5细胞组的肿瘤体积显著大于ABCG2-PLC/PRF-5细胞组[(3.73±1.19)cm3 vs(0.72±0.57)cm3,P<0.01]。ABCG2+PLC/PRF-5细胞和ABCG2-PLC/PRF-5细胞差异表达的miRNAs有20个:上调的13个,下调的7个;real-time PCR验证其中的hsa-miR-30a和hsa-miR-630的差异表达,其结果与miRNA芯片结果基本一致。结论:人肝癌细胞系PLC/PRF-5中ABCG2+细胞具有肿瘤干细胞的特性;ABCG2+和ABCG2-PLC/PRF-5细胞差异表达的miRNAs有20个,它们在肝癌发病中可能起重要的调控作用。