冷冻切片常遇到的问题及解决对策

目的 提高制作冷冻切片质量，确保实验结果科学性。方法 通过对切片机工作室温度设置选择，防卷板的调整应用及切片常遇到的问题分析，阐述提高制作高质量冷冻切片的方法。结果 通过对冷冻切片机有关参数的设定，提高了切片质量。结论 冷冻切片常遇到的问题，通过及时调整切片机相应设置，可以便捷解决。     

远端蒂腓肠神经营养血管皮瓣与肌皮瓣的临床应用与改进

目的:报道应用远端蒂腓肠神经营养血管皮瓣,肌皮瓣修复小腿下段及足踝部软组织缺损的可行性安全性和临床效果。方法:对42例以远端蒂腓肠神经营养血管(肌)皮瓣修复小腿下段及足踝部不同原因所致软组织缺损病例进行总结分析。本组男36例,女6例;年龄最大75岁、最小6岁;皮瓣最大面积17.0cm×15.0cm,最小6.0cm×5.0cm,其中12例皮瓣面积在10.0cm×10.0cm以上;6例设计为肌皮瓣(腓肠肌外侧头),肌瓣最大为10.0cm×7.0cm×2.0cm,最小为6.0cm×5.0cm×1.0cm。结果:所有病例术后皆出现不同程度的皮瓣肿胀,暗道较明道者明显。2例大皮瓣经行小隐静脉远端结扎仍出现肿胀、色暗,皮瓣近侧1/3坏死。皮瓣边缘坏死3例,换药治愈。部分坏死需行植皮者3例。36例术后伤口I期愈合,骨外露软件组织缺损覆盖修复满意,6例II期愈合,其中糖尿病,地中海贫血各一例。结论:(1)远端蒂腓肠神经营养血管皮瓣转位修复小腿下1/3及足踝部缺损创面,极有临床实用价值;(2)设计切取腓肠神经营养血管肌皮瓣修复小腿及足踝填充感染创腔是可行的;(3)但对其皮瓣及所携带的肌瓣究竟切取多大面积是安全的、肌瓣的血运机理以及远端蒂筋膜皮瓣中小隐静脉干是否结扎,何处结扎等问题仍有待进一步研究。     

Molecular and biochemical mechanisms ofPasteurella haemolyticaleukotoxin-induced cell death

Pasteurella haemolyticaleukotoxin (LKT) is a member of the RTX family of pore-forming toxins that kill bovine immune cells. Several studies have suggested that RTX toxins kill target cells by the induction of apoptosis. In the present study, BL3 bovine leukaemia cells were exposed to LKT and assessed by molecular and flow cytometric techniques that measure different aspects of apoptotic cell death. The intoxicated cells demonstrated morphological, light scatter and Hoechst 33258 staining characteristics consistent with cells undergoing apoptosis. The cells also exhibited internucleosomal DNA fragmentation and poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) cleavage, both indicators of apoptosis. LKT-treated cells bound annexin-V-FITC indicating that phosphatidylserine groups were translocated from the inner to the outer leaflet of the cell membrane. The effect of LKT on cells was dose dependent and inhibitable by incubation with anti-LKT monoclonal antibody. Finally, an early step for induction of apoptosis appears to be the binding of LKT to a β2 integrin since pre-incubating cells with anti-β2 integrin antibodies inhibited LKT-induced apoptosis. This study provides new insights into understanding the pathogenesis of bovine pasteurellosis and could lead to the development of both preventative and therapeutic strategies for disease management.     

多发性骨髓瘤患者血清IL-6活性与急性相蛋白浓度的相关性研究

运用敏感的B_9细胞增殖试验检测了81例多发性骨髓瘤(MM)患者血清IL-6活性,同时分析了标本的几种急性相蛋白含量,结果表明,68％MM患者血清中IL-6活性大于5μ/ml(正常对照为5μ/ml以下),几种急性相蛋白中C-反应性蛋白(CRP)在MM时升高(P<0.01),平均达正常对照组的17倍以上,MM患者补体C_4与正常对照组无差异(p>0.05),C_3、白蛋白及转铁蛋白在MM时分别比正常下降24.42％、38.83％和32.80％,且与疾病分期有关,在血清IL-6大于5μ/ml的55例中,IL-6活性与CRP、C_3、白蛋白的相关系数分别为0.46,-0.34和-0.29,IL-6与转铁蛋白浓度相关不明显。本文结果提示:CRP、C_3及白蛋白等含量的变化可作为反映MM病情的简易而敏感的指标。     

1 MHz腔内射频加热辐射器在体模和犬颈段食管中的热场分布

目的 在肌肉等效体模及Beagle犬颈段食管中测定ZRL—Ⅱ型食管腔内加热辐射器的温度分布，探讨其热场分布能否满足食管癌加热治疗的临床需要。方法 ①在肌肉等效体模中测定ZRL—Ⅱ型食管腔内射频加热辐射器的温度分布，②Beagle犬用氯胺酮麻醉、固定。将腔内加热辐射器插入食管腔内，加热45min后分层解剖犬的颈部，同时测量食管外壁、气管、食管周围软组织中的温度。结果 ①在肌肉等效体模中距离导管囊表面1cm的环形体内的温度在43．2℃～43．6℃之间；在距离导管囊表面2cm的环形体内的温度在42．6℃～43．3℃之间，在距离导管囊表面3cm的环形体内的温度在42．6℃～42．8℃之间。②测得Beagle犬颈段食管腔内和外壁的温度为43．5℃，气管内为38．0℃，主动脉旁38．0℃，距食管外壁1cm处的软组织温度为40-3℃，距食管外壁2cm处的软组织温度为39．0℃，而颈部皮下的温度是37．5℃。结论 ①ZRL-Ⅱ型射频食管腔内加热辐射器的热场分布满足临床食管腔内加热的需要，②体模测定与活体动物测定，热场分布存在一定差异，需进一步研究。     

骨组织工程种子细胞的研究进展

随着骨组织工程研究的进展 ,选择什么细胞作为其种子细胞成为近年来研究的热点。目前 ,骨组织工程应用中种子细胞有五种来源 :骨、骨膜、骨髓、骨外组织和早期胚胎。本文介绍了五种来源种子细胞的研究状况 ,并对种子细胞各自存在的问题及应用前景进行了分析。     

Fluorescence in situ hybridization analysis of HER-2/neu in brushings of normal oral mucosa

Oncogene alterations have been clearly demonstrated to be related to the carcinogenesis and progression of oral squamous cell carcinoma (OSCC). However, the analysis of these alterations for screening and early diagnostic purposes generally requires invasive techniques for surgical removal of pathological epithelium. The aim of the present study was to assess the feasibility of fluorescence in situ hybridization (FISH) analysis of HER-2/neu amplification in oral mucosa brushings and to compare the HER-2/neu status with the history and smoking and drinking habits of healthy subjects. Cells obtained by centrifugation of oral brushings from 21 subjects (overall no. of cells: 5125) were suspended in physiological saline and fixed onto two slides for cytological evaluation and FISH analysis (dual-target, dual-color fluorescence assay) of the HER-2/neu gene and CEP17 centromere. A mean of 89.8% of the cells showed two HER-2/neu signals and a mean of 94% had two CEP17 signals at fluorescent microscopy. Finally, a mean of 96% of cells with HER-2/neu / CEP17 had a ratio equal to 1. No association between smoking and drinking habits, age and the HER-2/neu and CEP17 characteristics evaluated by FISH was found.     

TLR2和TLR4在原发性肝癌中的表达

目的：本研究通过检测原发性肝癌Toll样受体2（TLR2）和Toll样受体4（TLR4）的表达，分析其与临床病理生理因素的关系，探讨TLR2，TLR4在原发性肝癌疾病过程中的可能作用。方法：采用免疫组化法和实时荧光定量PCR分别在蛋白水平及mRNA水平检测原发性肝癌组织和配对癌旁组织TLR2、TLR4的表达。结果：原发性肝癌组织在蛋白水平和mRNA水平TLR2和TLR4的表达均明显低于癌旁组织（P<0.01）。但免疫组化结果显示不论是肝癌组织还是癌旁组织，TLR2和TLR4的表达均明显高于正常肝组织（P<0.01，P<0.05），有门静脉分支癌栓的患者癌组织TLR4的表达强度低于无门静脉分支癌栓的患者（P<0.05）。结论：肝癌组织TLR2和TLR4的表达与癌旁组织相比受到相对抑制，但高于正常肝组织，TLR2和TLR4信号途径可能参与了原发性肝癌的病理过程。     

全身性红斑狼疮、银屑病和胰岛素依赖性糖尿病病人补体成份BfSS亚型的检测

用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦方法对62例全身性红斑狼疮(SLE)、61例寻常型银屑病(PV)及17例胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)病人补体第二途径成份B因子SS型的亚型分布及基因频率进行了检测。结果表明,SLB病人BfSS亚基因频率分别为,S_A0.516,S_B0.484;PV为:S_A0.492,S_B0.508,IDDM为:S_A0.676,S_B0.324。与正常人(S_A0.414,S_B0.586)比较,三种疾病的S_A亚基因频率均有不同程度的增高,并伴有S_B亚基因频率的降低。统计结果表明,IDDM与正常人的差异显著(P<0.01),SLE次之(P<0.05),PV不著(P>0.1)。此外,这三种疾病病人BfS_A-S_A亚型的表型频率(分别为30.6%、31.1%和41.1%)都显著高于正常19.3%),统计学表明差异均显著(P<0.05)。     

大鼠膈神经传出和传入神经成分在脊髓内的分布

采用HRP追踪法,对成年大鼠膈神经运动纤维的起源和初级传入神经元胞体的位置及在其中枢突脊髓的投射进行了观察。结果表明,膈神经运动纤维在脊髓标记(膈核)主要分布在注射侧C_3-C_5脊髓节段的前角。隔神经感觉纤维初级传入标记的神经元见于注射侧C_3-C_6后根节,其中C_4标记的细胞数最多。