索拉非尼联合免疫检查点抑制剂治疗TACE抵抗的中晚期肝癌的疗效及安全性

目的 探讨索拉非尼联合免疫检查点抑制剂（immune checkpoint inhibitors,ICIs）治疗经肝动脉化疗栓塞术（transcatheter arterial chemoembolization,TACE）抵抗的中晚期肝癌的疗效及安全性。方法 回顾性分析2017年1月至2021年3月期间在温州医科大学附属第五医院确诊为TACE抵抗的中晚期肝癌患者的资料,共54例,年龄28～82（56.1±11.8）岁,其中BCLC B期24例,C期30例;Child-Pugh A级34例,B级20例。根据治疗方法不同,分为对照组和联合组,对照组接受单一索拉非尼治疗（n=33）,联合组接受索拉非尼联合ICIs治疗（n=21）;比较两组患者的一般情况、肿瘤反应性、肿瘤无进展生存时间（progression-free survival,PFS）及不良反应的发生情况。结果 联合组（2例CR、11例PR、4例SD和4例PD）的肿瘤反应性明显优于对照组（2例CR、8例PR、10例SD、13例PD）（P=0.041）。联合组的中位PFS明显长于对照组（13.5个月 vs 6.8个月,P=0.010）;多因素分析显示Child-Pugh B级（HR 2.202,95%CI 1.059～4.581,P=0.035）、BCLC C期（HR 4.077,95%CI 1.902～8.742,P<0.001）、AFP≥400 ng/mL（HR 5.728,95%CI 2.227～14.729,P＜0.001）是TACE抵抗肝癌PFS的独立危险因素,索拉非尼联合ICIs（HR 0.180,95%CI 0.082～0.392,P<0.001）是肝癌患者的保护因素。联合组并发皮炎、腹泻的发生率明显多于对照组（P<0.05）。结论 索拉非尼联合ICIs治疗提高TACE抵抗中晚期肝癌的肿瘤反应性,延长患者PFS,是一种有效、安全的治疗方案。     

高频超声引导下胸腔积液置管引流

胸腔积液临床常见,少量积液常无症状,中大量积液可致患者出现呼吸困难、无法平卧等表现,需通过胸腔穿刺置管引流及时加以缓解。胸腔积液穿刺引流不仅可用于临床治疗,还可辅助诊断不明原因胸腔积液。在超声直视下操作置管可提高穿刺成功率[1-2]。本研究观察高频超声在辅助引导置管引流胸腔积液中的效果。     

葡萄球菌蛋白A"ZZ"与EGFP的融合表达及活性测定

目的 将EGFP基因与葡萄球菌蛋白A（SPA）基因的龙结构域重组，尝试以融合标记的方式构建一种新型免疫亲和试剂。方法 利用基因工程技术将EGFP基因重组至pEZZ18质粒，构建原核分泌表达载体pEZZ-EGFP，通过竞争ELISA和荧光光谱测定其在大肠杆菌中表达产物ProZZEGFP的生物学活性。结果 pEZZ-EGFP在E．coli HB101中正确表达，所表达融合蛋白具有与哺乳动物IgG抗体结合的生物学活性和EGFP的荧光活性。结论 ProZZ—EGFP融合蛋白有忽结构域（SPA）和EGFP二者生物学特性，在免疫荧光测定中可作为一种通用亲和试剂。     

梅笠草提取物的抗炎及镇痛作用

[目的 ]探讨梅笠草提取物的抗炎及镇痛作用 .[方法 ]采用巴豆油所致小鼠耳壳肿胀的方法 ,测定耳片的肿胀度 ;用冰醋酸所致小鼠的扭体次数 ,测定小鼠的扭体反应次数 .[结果 ]梅笠草对巴豆油所致小鼠耳壳肿胀有抑制作用 ,与对照组相比有显著性差异 ;同时能减少冰醋酸所致小鼠的扭体次数 ,与对照组相比有显著性差异 .[结论 ]梅笠草提取物具有一定的抗急性炎症和抗镇痛作用     

葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤的作用。方法：20只雄性新西兰大白兔随机分成缺血组（A组,n=10）及葛根素组（B组,n=10),夹闭腹主动脉肾下段20min,建立兔脊髓腰尾段血模型,B组于夹闭前10min静脉注射葛根素30mg.kg^-1,A组则静脉注射生理盐水,测定夹闭前、后及再灌注后血浆中丙二醛（MDA）浓度及超氧化物歧化酶（SOD)活性,再灌注4,8,12,24及48h分别对动物后肢运动功能评分;再灌注48h后,处死动物,制作切片,观察其组织病理变化。结果缺血及再灌注后B组MDA值明显低于A组（P＜0．05）,而OD活性明显高于A组（P＜0．05）;再灌注后4,8,12,24及48h时的神经功能评分B组明显高于A组（P＜0．05）;光镜下,与A组相比,B组脊髓组织损伤显著减轻,形态基本正常的前角细胞较多。结论葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤有显著的保护作用。     

沙利霉素对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨沙利霉素(salinomycin)对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨沙利霉素对信号通路的影响。方法:培养口腔鳞状细胞癌细胞系CAL-27,将1、2、4、8、16、32 μmol/L沙利霉素和1.25、2.5、5、10、20、40、80 μmol/L顺铂与CAL-27细胞共同培养,24 h和48 h后用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测沙利霉素和顺铂对CAL-27细胞增殖的影响;0、2、4、8 μmol/L沙利霉素和0、5、10、20 μmol/L顺铂与CAL-27细胞共培养48 h后,通过流式细胞术检测沙利霉素和顺铂对CAL-27细胞周期的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测CAL-27细胞中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing aspartate-specific proteases-3,Caspase-3)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(cysteine-containing aspartate-specific proteases-9,Caspase-9)、脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)修复酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)和磷酸化蛋白激酶B (phosphorylated protein kinase B,p-Akt)的表达。结果:CCK-8实验表明沙利霉素和顺铂均能显著抑制口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖,且抑制作用呈时间依赖性和药物浓度依赖性,但是相对于临床一线化疗药物顺铂而言,沙利霉素对CAL-27细胞增殖的抑制效果更加显著(P<0.001)。细胞周期检测表明,与加入二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)的对照组相比,8 μmol/L沙利霉素与CAL-27细胞共同培养48 h后,细胞休眠期/DNA合成前期的CAL-27细胞比例明显升高(40.40%±1.99% vs.64.46%±0.90%,P<0.05), DNA合成期和DNA合成后期/有丝分裂期的CAL-27细胞比例出现降低(24.32%±2.30% vs.18.73%±0.61%,P<0.05,35.01%±1.24% vs.16.54%±1.31%,P<0.05);顺铂对CAL-27细胞周期没有特异性改变。蛋白免疫印迹法结果显示,沙利霉素在上调CAL-27细胞中Caspase-3和 Caspase-9蛋白表达(P<0.05)的同时下调PARP、Akt和p-Akt蛋白的表达(P<0.05)。结论:相对于顺铂而言,沙利霉素对CAL-27细胞增殖有更强的抑制作用,并且能将口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞周期阻滞在细胞休眠期/DNA合成前期,同时能够诱导CAL-27细胞发生凋亡,这一机制可能和Akt/p-Akt 信号通路相关。     

阿魏酸钠对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮的影响

目的研究阿魏酸钠(SF)对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮(NO)的影响。方法用NO试剂盒分别测定氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)、VitE以及SF对培养的人脐静脉内皮细胞产生NO的影响。结果OX-LDL对培养的人脐静脉内皮细胞NO有明显的抑制作用,并且随着浓度的增加及作用时间的延长,抑制作用逐渐增强;SF和抗氧化剂VitE可明显减弱OX-LDL对内皮细胞NO产生的抑制作用。结论SF具有与抗氧化剂VitE相似的保护内皮细胞释放NO的作用。     

NAD-Sepharose 6MB亲和胶的制备及在2,5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶纯化中的应用

目的制备NAD亲和胶,用于分离纯化2,5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶。方法将NAD通过丁二酸二酰肼与溴化氰活化的Sepharose6MB胶联结,制得NAD亲和胶。从棒杆菌细胞中提取的2,5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶粗酶液用NAD亲和胶进行亲和层析纯化。结果NAD的结合率为71．67％;亲和层析回收率为77．27％;酶的比活提高了1．1倍。结论以NAD为配基的亲和胶用于纯化以NADPH为辅酶的2,5-DKG还原酶行之有效。     

乳腺癌ER,PR检测技术

目的：探讨ＥＲ、ＰＲ的最佳染色条件。方法：应用免疫组化Ｓ－Ｐ法,对乳腺癌进行ＥＲ和ＰＲ检查。结果：实验组：“１”的阳性率高于对照组“２”。结论：成功地显示ＥＲ和ＰＲ关键在于微波修复抗原及组织的固定时间和一抗的作用时间。     

急性重症胆管炎的救治体会

目的：探讨急性重症胆管炎的有效治疗方法。方法：回顾性分析１５４例急性重症胆管炎（ＡＣＳＴ）的临床资料。结果：单纯胆总管外引流术９２例,死亡１０例（１０．９％）;胆总管外引流附加胆囊造瘘或胆囊切除或肝脓肿引流术共３２例,死亡６例（１８．８％）;胆道内引流术３０例（胆肠吻合２４例,奥狄括约肌切开成形术６例）,死亡８例（２６．７％）。全组治愈１３０例,死亡２４例,总病死率为１５．６％。结论：ＡＣＳＴ诊断明确后及早手术是提高疗效的关键,手术方式的选择以简单、有效为原则,积极防治休克和多器官功能衰竭是改善预后的重要措施。