抗磺胺嘧啶单克隆抗体的制备及其ELISA检测试剂盒的建立

目的 :制备抗磺胺嘧啶 (SD)的单克隆抗体 (mAb) ,并研制SD快速检测试剂盒。方法 :以SD BSA的偶联物作为抗原免疫BALB/c小鼠 ,采用杂交瘤技术制备抗SD的mAb。并用抗SDmAb和SD HRP酶标抗原 ,建立一种可检测样品中的游离SD分子的竞争法ELISA。结果 :获得 5株可分泌抗SDmAb的杂交瘤细胞 1A1、1B8、1E4、2C1和 3D9。其中 1A1、1B8和 1E4为IgG1,2C1和 3D9为IgG2。试剂盒的半数抑制率 (I5 0 )为 9.3μg/L ,理论最低检出量达到 0 .6μg/L ,对于不同样品中SD的回收率均高于 60 %。除与SD反应以外 ,该试剂盒对其他磺胺类药物检测的交叉反应均小于 3 %。结论 :成功地制备了抗SD的mAb ,并建立了一种可快速检测各种样品中SD的竞争ELISA试剂盒     

Identification of MEN1 gene mutations in sporadic carcinoid tumors of the lung

Lung carcinoids occur sporadically and rarely in association with multiple endocrine neoplasia type 1 (MEN1). There are no well defined genetic abnormalities known to occur in these tumors. We studied 11 sporadic lung carcinoids for loss of heterozygosity (LOH) at the locus of the MEN1 gene on chromosome 11q13, and for mutations of the MEN1 gene using dideoxy fingerprinting. Additionally, a lung carcinoid from a MEN1 patient was studied. In four of 11 (36%) sporadic tumors, both copies of the MEN1 gene were inactivated. All four tumors showed the presence of a MEN1 gene mutation and loss of the other allele. Observed mutations included a 1 bp insertion, a 1 bp deletion, a 13 bp deletion and a single nucleotide substitution affecting a donor splice site. Each mutation predicts truncation or potentially complete loss of menin. The remaining seven tumors showed neither the presence of a MEN1 gene mutation nor 11q13 LOH. The tumor from the MEN1 patient showed LOH at chromosome 11q13 and a complex germline MEN1 gene mutation. The data implicate the MEN1 gene in the pathogenesis of sporadic lung carcinoids, representing the first defined genetic alteration in these tumors.      

2018—2020年某三甲专科医院工作人员职业暴露调查分析

目的 了解某三甲专科医院血源性病原体职业暴露发生现况,为降低职业暴露风险采取有效防控措施提供参考。方法 利用某三甲专科医院2018—2020年发生的职业暴露相关数据进行回顾性研究,从职业暴露的工作类别、工龄、种类、病原体类别等方面开展统计分析,使用Fisher确切概率法进行组间比较。结果 2018—2020年,该院共发生血源性病原体职业暴露114例,其中锐器伤暴露94例,占比最高（82.5%）;护士发生职业暴露64例,占比最高（56.1%）;工龄≤1年人员发生职业暴露70例,占比最高（61.4%）;职业暴露主要发生在处理丢弃针头等锐器物（35.9%）和检查、治疗及护理操作（22.8%）等环节。卡方检验结果显示,不同职业类别人员发生职业暴露的类型不同,医技人员和护士发生血液/体液暴露比例更高（x²=9.774,P＜0.05）。对所有发生职业暴露的工作人员建立健康随访档案,定期追踪监测,尚未发现人员因职业暴露而感染血源性疾病。结论 通过对低年资医务人员和工勤人员职业防护的精准培训、强化标准预防和标准化操作规程、提供安全用具、完善血源性病原体职业暴露的监测和防护体系等综合性集束化措施,降低职业暴露风险,为采取有效防控提供依据。     

益糖康通过抑制AGE/RAGE信号通路改善骨骼肌细胞凋亡的机制

目的：研究益糖康通过抑制糖基化终末产物(AGE)/糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路纠正骨骼肌细胞过度凋亡进而改善胰岛素抵抗(IR)的作用机制。方法：(1)体外实验,制备益糖康含药血清,将C2C12细胞设置空白组、模型组、益糖康含药血清高、中、低剂量(40、20、10 g·kg^-1)组、RAGE抑制剂组,除空白组外,用棕榈酸诱导C2C12 IR模型细胞,然后分别采取相应的干预方式后检测各组细胞的活性及葡萄糖消耗量水平,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测重要凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p53、胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9]的mRNA及蛋白表达水平。(2)体内实验,将96只符合研究标准的Wistar大鼠设置空白组、对照组、益糖康高、中、低剂量组(40、20、10 g·kg^-1)、吡格列酮(1.35 mg·kg^-1)组,运用高糖高脂糖尿病模型诱导饲料联合...     

慢溃宁方对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路和肠道菌群的影响

目的 探讨慢溃宁方对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的溃疡性结肠炎（UC）小鼠肠道菌群的调控作用,和对NOD样受体（NLR）P3/胱天蛋白酶（Caspase）-1/Gasdermin D（GSDMD）细胞焦亡通路所介导炎症的影响。方法 SPF级C57BL/6小鼠60只,随机分为空白组、模型组、慢溃宁方组（20 g·kg^-1）、美沙拉秦组（0.266 g·kg^-1）,各组15只。小鼠通过自由饮用3%DSS溶液,7 d构建UC模型。造模开始12 h后,治疗组每天灌胃给药,其余组灌胃等体积生理盐水。记录小鼠每日体质量等情况,并评估计算疾病活动指数（DAI）。第8天麻醉后,脱臼颈椎处死小鼠,收集结肠和粪便,记量结肠长度;观察结肠组织苏木素-伊红（HE）染色后的病理学改变;结肠中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）水平用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测;基于16S rRNA测序技术检测各组小鼠粪便中肠道菌群的差异;NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白结肠组织中含量用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测。结果 相较于空白组,模型组小鼠的DAI升高（P<0.01）,结肠长度显著缩短（P<0.01）,结肠黏膜损伤严重,TNFα、IL-1β、IL-18水平均明显升高（P<0.01）,且结肠组织中NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白含量显著升高（P<0.01）,肠道菌群结构改变,门水平上的放线菌门、拟杆菌门与变形菌门丰度减少,厚壁菌门丰度增加;属水平上的乳酸杆菌、普雷沃氏菌和鼠杆菌属丰度减少,拟杆菌属、芽孢杆菌、毛螺旋菌属NK4A136丰度增加。慢溃宁方组、美沙拉秦组相较于模型组,第3天后DAI显著降低（P<0.01）,结肠长度均显著增加（P<0.01）,结肠的炎症浸润及黏膜结构损伤减轻,且结肠TNF-α、IL-1β、IL-18水平均显著下降（P<0.01）,NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白在结肠组织中的含量明显降低（P<0.05,P<0.01）,门水平上的变形菌门和拟杆菌门丰度增加,厚壁菌门丰度减少。结论 慢溃宁方可通过抑制细胞经典焦亡通路,缓解UC小鼠结肠炎症反应,减轻结肠损伤,并对肠道菌群紊乱有改善作用。     

泰州市居民慢性病防治健康素养水平及其影响因素

目的分析泰州市居民慢性病防治健康素养水平及其影响因素。方法在2018年6月—2019年5月间经多阶段分层整群随机抽样选取泰州市2022名常住居民开展慢性病防治健康素养相关问卷调查,分析调查结果。结果2022份问卷回收有效问卷2010份;以“儿童青少年也可能发生抑郁症”正确率89.0%、“超重或肥胖者易患的病”正确率80.3%占据前两名;慢性病防治健康素养水平相关因素包括地区,年龄,文化等,差异有统计学意义(P<0.05),性别方面差异无统计学意义(P>0.05);经Logistic回归分析显示,影响慢性病防治健康素养影响因素主要包括地区、年龄、学历、职业及家庭收入,差异有统计学意义(P<0.05)。结论泰州市居民慢性病防治健康素养在蔬菜水果、儿童抑郁症及肥胖者易患病等方面水平较高,而在骨质疏松相关知识了解程度则较低,影响因素包括地区、年龄、学历、职业及家庭收入。     

失效模式与效应分析法在神经内科ICU医院感染控制中的应用

目的探讨失效模式与效应分析法(failure mode and effects analysis,FMEA)在神经内科ICU医院感染控制中的应用,发现高风险因素,为院感防控提供参考依据。方法根据神经内科ICU临床实际情况,通过FMEA风险评估法对34项医院感染风险事件进行风险评估,按照"二八法则"筛选出风险优先级事件。结果根据每一项风险因素的平均RPN值进行风险排序,按照"二八法则"筛选出风险优先级前6位的事件分别是:本科室医护人员手卫生依从性不到位(平均RPN值=5.6)、导尿管日常维护不到位(平均RPN值=4.17)、多耐患者未有效执行接触隔离措施(平均RPN值=3.80)、物表清洁消毒未有效执行(平均RPN值=3.73)、未严格掌握留置导尿指征(平均RPN值=3.70)、未保持尿液引流系统的密闭性(平均RPN值=3.53)。结论FMEA风险评估法可以发现神经内科ICU医院感染防控中的薄弱环节,为精准化感控措施的制订提供依据。     

GDM患者脂肪组织中HMGB1表达与产后糖代谢异常的关系

目的研究脂肪组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达增加与妊娠期糖尿病(GDM)患者胰岛素抵抗程度及产后糖代谢异常的关系。方法选择2016年10月至2019年3月期间在海安市中医院诊断为GDM并接受剖宫产的126例患者作为GDM组,选择同期在该院接受剖宫产的健康孕妇150例作为对照组,检测剖宫产当天孕妇血清HMGB1、空腹胰岛素(FINS)的含量及脂肪组织中HMBG1、胰岛素受体底物(IRS)-1、IRS-2的表达水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。随访产后1年内糖代谢异常的发生情况并绘制K-M曲线。结果GDM组患者脂肪组织中HMGB1的表达水平、血清HMGB1含量及FINS、HOMA-IR水平明显高于对照组(t值分别为14.496、16.503、19.068、13.446,P<0.05),脂肪组织中IRS-1、IRS-2的表达水平明显低于对照组(t值分别为11.616、10.596,P<0.05);GDM组患者脂肪组织中HMGB-1的表达水平与血清HMGB1、FINS的含量及HOMA-IR的水平呈正相关(r值分别为0.405、0.358、0.405,P<0.05),与脂肪组织中IRS-1、IRS-2的表达水平呈负相关(r值分别为-0.278、0.255,P<0.05);经K-M曲线分析,与GDM组中脂肪组织HMGB1低表达患者比较,HMGB1高表达患者产后1年糖代谢异常累积发生率明显升高(χ^(2)=3.933,P<0.05)。结论GDM患者脂肪组织中HMGB1表达增加与胰岛素抵抗的加重、产后糖代谢异常的发生有关。     

速冻玻璃化储存异体皮的临床应用

目的：分析和总结自1987年以来速冻玻璃化储皮临床应用情况。方法：搜集我科1987年至1999年使用速冻玻璃化储存的异体皮救治烧伤患者临床资料以及我科皮库储存异体皮国内使用情况,总结和分析速冻玻璃化储存异体皮的临床应用效果和异体皮的使用情况。结果：使用速冻玻璃化异体皮的烧伤患者平均烧伤面积为55.4%,其中平均Ⅲ度面积为30.9%,应用异体皮面积为3466～10208cm^2。采用速冻玻璃化保存的皮肤复温后其活力可达到新鲜皮肤的70%左右,该法保存的皮肤质地柔软、转红快、成活率高,存活期长,最长可在患者创面上成活2个月左右。术后异体皮成活率为95%。从1987年至1999年底我科皮库供全国各地18个省和3个自治区的48个市,8个县的108家各级医院冷冻异体皮使用,包括我科自用用,共使用皮肤面积达3604260cm^2。结论：采用速冻玻璃化储存的异体皮覆盖创面,仍是目前最有效、最方便、经济实惠的方法,使用异体皮进行烧伤的救治已经成为国内大多数医院普遍使用的一项救治措施。     

145例胃腺癌P21和P53免疫组化分析

目的：研究同一胃癌中癌基因和抑癌基因蛋白产物的表达。方法;应用免疫组织化学SP方法检测10例正常胃粘膜、10例萎缩性胃炎、10例肠上皮化生的胃壁组织和145例胃癌组织中P21和P53蛋白的表达水平。结果：10例正常胃粘膜、10例萎缩性胃炎、10例肠上皮化生的胃壁组织中未发现P21和P53。145例胃癌组织中P21和 P53的阳性检出率分别为55.2%和51.2%。表达阳性的P53定位于肿瘤核内,P21定位于细胞膜或细胞浆上。P21和P53的阳性表达率与胃癌的分化程度呈正相关。结论;检测P21和P53有助于评估胃癌的预后。