大尺度组织连续切片三维重建及喉部应用

三维重建技术的发展使我们研究人类组织器官的微观空间结构更加直观,然而由于缺乏理想的连续组织切片技术,特别是全喉这样的大尺度组织,其高分辨率组织空间结构的构建困难重重。本文综述了基于大尺度组织连续切片三维重建的方法及进展,为喉等大组织超精细空间结构研究的开展提供帮助。     

112例T3期喉癌扩大喉部分切除和喉全切除术的疗效分析

目的:探讨T3期扩大喉部分切除和喉全切除术的疗效.方法:于1984年1月至1996年5月对112例T3期喉癌的临床资料进行回顾性分析,其中行扩大喉部分切除术48例(单纯手术29例,手术加放疗19例);喉全切除术64例(单纯手术39例,手术加放疗法25例).结果:喉部分切除术组和喉全切除术组3年和5年生存率分别为77.1%、66.7%和97.7%、71.1%;各组单纯手术和手术加放疗的3年和5年生存率比较,喉部分切除组分别为75.7%、65.0%和78.9%、69.2%;喉全切除组分别为81.2%、71.4%和76.0%、70.6%,各组3年和5年生存率均无显著性差异(P＞0.05).结论:T3期喉癌只要掌握好喉部分切除术的适应证,其疗效与喉全切除术接近;术后放疗不能减少局部和颈部癌复发的危险.     

Experimental Investigation on Mechanical Properties of Geocell Strips at Low Temperature

Geocell is widely used in the treatment of poor roadbed, which can restrain soil laterally and improve the stability of soil. In cold area engineering, a change in temperature can influence the mechanical properties of geocell of different materials. To study the mechanical response of geocell at low temperatures, three types of geocell strips commonly used in engineering, namely the polyethylene (HDPE), polypropylene (PP), and polyester (PET), were studied via the uniaxial tensile test at the ambient temperatures of −5 °C, −20 °C, and −35 °C, respectively. Meanwhile, the tensile strength, fracture mode, and temperature sensitivity of geocell specimens were compared. It is concluded that: (1) at low temperatures, the tensile strengths of HDPE and PET geocell strips are significantly improved, while that of the PP geocell strip is less sensitive to the temperature. (2) The PP geocell is subject to a brittle failure at all ambient temperatures. The PET geocell strip experiences a hard-ductile failure at normal temperatures of −5 °C and −20 °C. While in the tensile test at −35 °C, it is prone to brittle failure and hard-ductile failure. The HDPE geocell strip suffers from ductile failure at all ambient temperatures. (3) At low temperatures, overall, the tensile properties of the PET geocell strip is better than those of the PP and HDPE geocell strips.     

武汉市中心城区气传真菌与呼吸道变应性疾病的相关性研究

目的:探讨武汉市中心城区气传真菌的属种及季节性飘散规律与呼吸道变应性疾病的关系。方法:2007-01-2008-12期间采用曝片法进行2年的气传真菌调查,并对同期接诊的1 674例呼吸道变应性疾病患者进行变应原皮肤试验,分析其发病规律。结果:武汉市中心城区空气中全年均有真菌飘散。2007年收集真菌孢子26 734个,其他(菌丝及不知名真菌)686个,合计27 420个;2008年收集真菌孢子26 531个,其他730个,合计27 261个。收集的真菌孢子鉴定种类有17种,优势气传真菌为交链孢菌、黑粉菌、小窦氏菌、锈菌,其中交链孢菌最多。气传真菌飘散的高峰期主要集中在4～6月和9～10月。2007年呼吸道变应性疾病患者真菌皮肤试验阳性率为10.48%,2008年为10.07%;呼吸道真菌变应性疾病发病高峰在4～6月和9～10月,与气传真菌的季节分布情况一致。结论:呼吸道变应性疾病的发生与气传致敏真菌的传播密切相关。     

睫状神经营养因子对面神经损伤的修复作用

目的：探讨局部应用睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对成年大鼠面神经损伤的修复作用。方法：将雄性ＳＤ大鼠颞骨内面神经垂直段横断后端端吻合,ＣＮＴＦ组以ＣＮＴＦ明胶海绵覆盖损伤处;对照组以生理盐水（ＳＡＬ）的明胶海绵覆盖损伤处。术后ＣＮＴＦ组每周２次耳后皮不注射ＣＮＴＦ５μｇ,对照组同法注射等量ＳＡＬ。术后２,４和１２周各组进行电生理学、组织病理学观察及开矿学定量分析。结果：术后２周,两组电刺面神经均未能     

蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子表达对喉癌细胞株Hep-2增殖的影响及相关机制研究

目的:研究蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)表达对喉癌细胞株Hep-2增殖的影响及相关分子机制。方法:以特异性si RNA和阴性对照序列转染喉癌Hep-2细胞,实验分为CIP2A si RNA组与Control si RNA组。平板克隆形成实验检测CIP2A在喉癌细胞增殖中的作用;MTT法检测CIP2A对细胞生长曲线及顺铂敏感性影响;流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡率的改变。real-time PCR检测CIP2A m RNA表达水平,Western blot检测CIP2A及生长相关蛋白c-myc、AKT、p-AKT、cyclin D1的蛋白表达水平。结果:沉默CIP2A后,CIP2A在基因及蛋白水平的表达量明显降低,Hep-2细胞生长减缓,克隆的形成被抑制,Control si RNA组为339.00±34.00,CIP2A si RNA组为126.00±33.00,差异有统计学意义(t=-7.796,P=0.010);沉默CIP2A可增加喉癌细胞对顺铂的敏感性,Control si RNA组IC50为(6.67±0.54)μg/ml,CIP2A si RNA组为(3.53±0.32)μg/ml,差异有统计学意义(t=8.598,P=0.001);细胞周期阻滞于G1期,Control si RNA组G1期细胞比例为66.860±1.972,CIP2A si RNA组为74.613±3.357,差异有统计学意义(t=3.449,P=0.026);S期细胞比例减少,Control si RNA组为23.713±1.564,CIP2A si RNA组为17.747±1.255,差异有统计学意义(t=-5.153,P=0.007);沉默CIP2A没有引起细胞凋亡率的变化(P=0.216)。Western blot结果显示,沉默CIP2A表达可下调Cyclin D1(t=-4.531,P=0.011)、c-myc(t=-4.522,P=0.011)、pAKT(t=-4.574,P=0.010)的表达,但对总AKT蛋白的表达没有影响(t=0.051,P=0.962)。结论:沉默CIP2A基因可抑制喉癌Hep-2细胞生长,增加喉癌细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与下调c-myc、p-AKT、cyclin D1的表达有关。     

HGF/c-Met轴介导EPCs治疗大鼠HPAH的初步实验研究

目的：探讨肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）/c-Met轴介导内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）移植入低氧性肺动脉高压（hypoxic pulmonary artery hypertension,HPAH）大鼠对大鼠的肺动脉压力和肺血管重构的影响。方法：构建HPAH模型大鼠;大鼠骨髓原代EPCs提取、培养和鉴定;构建c-Met腺病毒并转染EPCs;将大鼠分为c-Met-EPCs细胞组、EPCs细胞组、肺动脉高压组和正常组,每组10只。前2组大鼠通过尾静脉分别输注c-Met-EPCs细胞和EPCs细胞,后2组大鼠输注生理盐水;饲养一周后检测平均肺动脉压力（mean pulmonary arterial pressure,mPAP）和右心室肥大指数（right ventricle hypertrophy index,RVHI）;透射电镜检测肺动脉超微结构改变,肺组织病理切片观察肺小动脉改变;ELISA法测定血清内皮素-1（endothelin-1,ET-1）含量,Griess法测定血清一氧化氮（nitric oxide,NO）含量。结果：c-Met-EPCs细胞组、EPCs细胞组、肺动脉高压组和正常组4组大鼠的mPAP值分别为（23.17±3.07）、（30.85±3.15）、（33.55±5.47）、（20.30±1.99） mmHg;RVHI值分别为（32.48±2.38）%、（37.54±4.42）%、（38.53±2.81）%、（26.05±3.05）%;血清ET-1值分别为（69.45±6.32）、（95.76±7.31）、（99.14±8.39）、（62.35±6.06） ng/L;血清NO值分别为（99.63±11.40）、（56.07±3.32）、（48.83±6.56）、（125.50±12.26） μmol/L。EPCs细胞组、肺动脉高压组大鼠的mPAP、RVHI和血清ET-1含量明显高于正常组（P<0.05）;c-Met-EPCs细胞组较EPCs细胞组、肺动脉高压组明显降低（P<0.05）。EPCs细胞组、肺动脉高压组大鼠的血清NO含量明显低于正常组（P<0.05）;c-Met-EPCs细胞组较EPCs细胞组、肺动脉高压组明显升高（P<0.05）。透射电镜显示EPCs细胞组、肺动脉高压组肺动脉中膜平滑肌细胞线粒体和内质网肿胀、内皮细胞中断不连续,而c-Met-EPCs细胞肺动脉中膜平滑肌细胞线粒体和内质网肿胀不显著。肺组织病理切片显示EPCs细胞组、肺动脉高压组肺血管重构明显,而c-Met-EPCs细胞组肺血管重构减轻。结论：HGF/c-Met轴介导内皮祖细胞移植入低氧性肺动脉高压大鼠后可明显降低肺动脉压力和和改善肺血管重构,其机制可能与抑制ET-1释放和促进NO产生有关。     

兔眼慢性高眼压模型视网膜损害相关基因的克隆及筛选

目的　构建慢性高眼压条件下兔眼视网膜组织差异表达基因的消减cDNA文库并鉴定、克隆及筛选与慢性高眼压视网膜损害相关的基因表达片段。方法　于兔眼前房注射1%甲基纤维素每周1次,连续5周,制作慢性高眼压模型。提取实验组和对照组兔眼视网膜组织总RNA及纯化mRNA。采用原位杂交技术,进行视网膜组织差异表达基因抑制性消减文库的构建及初步的基因筛选。对一个上调的cDNA片段用地高辛标记,采用原位杂交的方法在实验组和对照组的视网膜中进行相关基因片段的细胞定位。结果　成功构建慢性高眼压条件下兔眼视网膜损害相关基因的抑制性消减cDNA文库,经基因片段测序及同源性检索,得到有效基因序列16个,经NCBI BLAST信息途径分析,发现高度同源序列(同源性>98% )2个。其中一个编号F9基因片段与Ras家族基因相似,原位杂交结果确定其大量表达于实验组视网膜神经节细胞及内核层细胞中,而对照组视网膜组织未表达。结论　慢性高眼压条件下视网膜组织基因表达失调,F9片段在慢性高眼压视网膜损害过程中表达明显增高。建立慢性高眼压条件下视网膜损害相关基因的抑制性消减cDNA文库,可为今后青光眼视神经损害机制及视神经保护的研究奠定基础。     

脑源性神经营养因子在形觉剥夺弱视大鼠视皮层的表达

目的:研究视觉发育期脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)在正常和剥夺弱视大鼠模型视皮层表达变化规律。方法:SD大鼠眼睑缝合行视觉剥夺,取大脑视皮层行尼氏染色进行形态学分析,用免疫组织化学SABC技术染色和计算机图形分析BDNF在P14,P21,P45,P120,MD鼠同侧视皮层17区的表达。结果:与正常组比较MD弱视大鼠视皮层神经元数目略减少,细胞突起数目未见明显减少,但神经元体积不一致,神经元体积变小、细胞核着色加深。BDNF在正常视皮层表达变化同视觉发育期一致,P14~P21表达渐强,P21表达高峰,P45表达降低,P120呈低表达,P14与P21组间差异有非常显著统计学意义(P<0.01),P14与P45组间差异无显著统计学意义(P>0.05),P45与P120组间差异有显著统计学意义(P<0.05);BDNF在MD弱视组视皮层呈持续低表达,与正常组比较具有非常显著的差异性(P<0.01)。结论:BDNF在视皮层的表达变化同视觉发育期相一致,其参与视觉发育关键期突触塑形,为弱视形成的分子学基础之一。     

自体脂肪移植在眼科应用

自体脂肪移植在临床应用已有100多年的历史。脂肪移植后组织学变化,脂肪存活机制以及脂肪移植体成活情况已有很多研究报道。在眼科临床主要应用真皮脂肪移植和颗粒脂肪移植,主要用于矫治各种眼球摘除术后眼窝塌陷、眼睑凹陷畸形、眼部皱纹等。本文就脂肪移植后基础研究以及眼科临床应用加以综述。