一种海洋来源ETP类化合物GQQ-ZML-2抑制H358细胞增殖作用与机制的研究

摘要：目的 探究化合物GQQ-ZML-2对H358细胞(KRASG12C)的增殖抑制作用并初步研究其作用机制。方法 采用磺酰罗丹明B法（SRB法）测定GQQ-ZML-2对不同KRAS突变的肿瘤细胞的细胞毒;采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;利用荧光探针DCFH-DA检测细胞内总活性氧（ROS）水平;Western Blotting检测相关信号蛋白的表达水平;结果 GQQ-ZML-2选择性抑制H358细胞增殖,以浓度依赖的方式抑制克隆形成并将细胞周期阻滞于G2/M期而诱导细胞凋亡。机制研究表明GQQ-ZML-2引起KRAS G12C依赖的ROS产生,抑制AKT/mTOR和JAK2/STAT3信号通路。结论 GQQ-ZML-2是一种新型的具有选择性抑制H358细胞增殖作用的海洋来源化合物,其作用机制可能与诱导KRASG12C依赖的ROS增加相关。本文研究为开发新型的拮抗具有KRASG12C突变肿瘤的药物提供了实验依据。     

基于多指标成分定量结合化学计量学评价不同产地和不同采收期桔梗质量

目的 采用多指标成分定量结合化学计量学方法对不同产地和不同采收期的桔梗Platycodon grandiflorum进行质量评价。方法 采用热浸法测定其醇溶性浸出物含量,应用超高效液相-电喷雾检测器（UPLC-CAD）法同时测定桔梗皂苷D、桔梗皂苷D₃、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷E、去芹糖桔梗皂苷E 5个活性成分含量,揭示不同采收期桔梗化学成分含量动态积累规律。运用主成分分析法分别对不同生长年限、不同产地桔梗进行综合评价,单因素方差分析比较不同产地桔梗各指标成分含量。结果 以春季4月、秋季9～10月、三年生为桔梗的最佳采收期。主成分分析、方差分析表明不同产地桔梗中指标含量存在显著性差异,同一产地不同批次间也有区别;根据主成分分析对不同产地桔梗进行综合评分,排名靠前的产地为甘肃陇南及河南省地区,陕西商洛、安徽亳州、内蒙古赤峰产地次之,山东淄博和山西太原产地排名较后。结论 以多指标成分定量结合化学计量学建立的评价方法明确了桔梗最佳采收期,评价了不同产地桔梗的质量,为桔梗药材质量控制研究提供依据。     

养阴抗毒胶囊及拆方对阴虚大鼠皮质醇,超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的:探讨养阴抗毒胶囊及拆方对氢化可的松所致阴虚大鼠血清中氧化与抗氧化平衡的影响作用.方法:SD大鼠40只,随机分为对照组、阴虚模型组(YD)、养阴抗毒胶囊组(YC)和拆方抗毒组(大小蓟、槐花).大鼠在中药预处理及造模给药9 d后处死,以大鼠血清中皮质醇(CORT),超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量为指标进行实验观察.结果:与对照组相比,YD组大鼠血清CORT,MDA含量分别为(9.10±1.70)μg/L,(27.16±8.54)Nu/mL,明显升高,SOD含量(520.75±126.87)μmol/L,明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与YD组相比,YC组大鼠血清SOD含量(801.10±41.57)μmol/L,明显升高,(P<0.05),CORT,MDA含量分别为(6.01±2.11)μg/L,(10±1.40)μmol/L,明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);而拆方抗毒组无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05),符合方剂的"整体取性"原理.结论:YC通过改变大鼠血清中SOD活性和降低MDA含量,对阴虚大鼠的抗氧化能力产生一定的影响.     

木犀草素促进囊性纤维化跨膜电导调节因子氯离子通道开放

目的：研究木犀草素对依赖于3，5-环腺苷酸（cAMP）的囊性纤维化跨膜电导调节因子（CFTR）Cl^-通道的激活作用。方法：利用稳定共表达人CFTR与一种对卤族元素敏感的荧光绿蛋白突变体（EYFP-H148Q）的Fischer大鼠甲状腺（FRT）细胞模型，测定木犀草素对CFTR介导的I^-内流速度。结果：木犀草素能够以剂量依赖的方式激活CFTR的I^-转运，其对CFTR Cl^-通道的激活效应具有作用迅速、可逆的特点。木犀草素在发挥激活作用时依赖于腺苷环化酶激动剂Forskolin的存在，其单独与细胞孵育不提高细胞内cAMP的水平。结论：发现了木犀草素能够以剂量依赖方式激活CFTR，并且初步确定了木犀草素通过直接与CFTR结合发挥作用。     

铅对大鼠C6细胞GRP78表达的影响

目的观察不用时间点暴露于不同剂量醋酸铅后大鼠神经胶质瘤C6细胞葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein 78,GRP78)表达量的影响,探讨不同时间不同剂量铅暴露对内质网应激反应的影响。方法Wistar大鼠神经胶质瘤C6细胞培养于含醋酸铅的培养液中,分别于不同时间终止染铅,用Western印迹法检测内质网GRP78表达量。结果(1)0.2μmol/L染铅组:7和30 d GRP78蛋白表达显著增高,其余各个时间点均无显著性变化;(2)1.0μmol/L染铅组:1 d后GRP78蛋白表达量开始显著增高,染铅30 d时已达到染铅前的6.3倍;(3)2.0μmol/L染铅组:0.5 h起GRP78表达量即显著增高,染铅7 d时达到高峰,是染铅前的4.3倍,到30 d时表达量又下降为染铅前的2.6倍。结论铅可以使Wistar大鼠神经胶质瘤细胞内质网上的GRP78蛋白应激性表达增加,内质网上的GRP78是铅的重要蓄积库。     

傅里叶变换红外光谱技术鉴别4种中药材的不同来源

目的:对矮地茶、大黄、黄芩、夏枯草4种中药材不同批次样品的来源进行鉴别。方法:采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术获得4种中药材各个批次样品的红外光谱图和高分辨的二阶导数谱,并对其进行分析。结果:每种不同来源的中药材即产地不同的野生品与栽培品均具有不同的红外光谱特征,其红外吸收峰峰位与相对强度均存在一定差异;并且二阶导数谱更加突出了红外光谱的特征性。结论:本方法快速、简单、特征性强,可以对中药材不同批次样品的来源进行鉴别。     

乌鲁木齐地区线粒体12SrRNA基因突变筛查分析

目的　研究乌鲁木齐地区非综合征性聋患者线粒体12S rRNA基因突变情况。方法　收集乌鲁木齐非综合征性聋患者标本609例,对其进行临床和分子遗传学评估。结果　12S rRNA基因突变分析共发现11个突变位点,已知的A1555G、961DelT、C1494T突变分别占2.96%,1.15%,0.16%。另外A1047G突变相关报道较少,A1585G突变未见相关报道。其他突变均为多态性位点。结论　线粒体12S rRNA突变是引起遗传性聋的重要因素,此次乌鲁木齐地区线粒体12S rRNA A1555G突变在聋病人群中的检出率与前期报道相比有所降低,可能与耳毒性药物使用量降低有关。A1047G与新发现的A1585G突变是否与聋相关,还需进一步研究。对筛查中阳性突变携带者及其母系家庭成员需告知氨基糖苷类抗生素使用风险,使其避免使用,逐步降低药物性聋的发生率。     

南蛇藤总萜对Hepal-6荷瘤小鼠VEGF、CECs的影响

目的 观察南蛇藤总萜对Hepal-6荷瘤小鼠外周血VEGF、CECs的影响.方法 采用常规无菌接种技术制作小鼠肝癌Hepal-6移植性肿瘤模型,观察南蛇藤总萜高、中、低剂量(40 mg/kg、20 mg/kg、10 mg/kg)对Hepal-6荷瘤小鼠外周血VEGF、CECs表达的影响.结果 南蛇藤总萜在20 mg/kg时,外周血VEGF (45.24±21.36) pg/ml、CECs (0.83±0.10)％表达明显降低,与阴性对照组(0.9％生理盐水)比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 南蛇藤总萜可明显降低VEGF、CECs表达,这一作用可能与南蛇藤总萜抑制肝癌血管生成有关.     

针药结合对寒凝血瘀型子宫内膜异位症大鼠的镇痛作用研究

目的:探讨少腹逐瘀汤结合针刺对子宫内膜异位症(EMs)大鼠模型的镇痛作用。方法:采用宫缩素诱发疼痛的方法,以阿司匹林为对照组,观察针药结合对大鼠缩宫素所致疼痛的影响;采用大鼠自体移植法和冰水浴法建立寒凝血瘀型EMs模型,采用宫缩素诱发疼痛的方法,以达那唑为对照组,观察针药结合组对模型大鼠的镇痛作用及对血浆中TXB2和6-Ke To-PGF1α的影响。结果:针药结合组对宫缩素诱发疼痛镇痛作用明显高于单纯中药干预组(P0.05),与阿司匹林组比较无显著差异(P0.05);针药结合组对模型大鼠的镇痛作用显著高于单纯中药干预组和达那唑组(P0.05);针药结合组能够明显降低血浆中TXB2水平,与单纯中药干预组和达那唑组比较差异有显著性(P0.05)。结论:少腹逐瘀汤结合针刺对EMs大鼠模型有明显的镇痛作用,且效果明显优于单纯中药干预,其镇痛作用可能是对TXB2的调节。     

白血病患者造血干细胞移植前单次全身照射的预后分析

Objective To analyze the prognostic factors of patients with leukemia treated with single fraction total body irradiation (SFTBI) followed by hernatopoietic stem cell transplantation (HSCT).Methods From January 2001 to September 2008, 102 patients received HSCT. The differences of the survival rate, relapse rate and incidence of interstitial pneumonia (IP) between groups regarding different genders, ages, pathological types, transplantation methods and TBI parameters were compared and the factors related with the survival rate, relapse rate and incidence of IP were analyzed. Results The followup time ranged from 15 to 1482 days (median, 406 days). The follow-up rate was 95.1%. 86 and 55patients were followed up more than one year and three years. The 1-and 3-year survival rates were 59.0%and 44.0%. In univariate analysis, the 3-year survival rate was signifcantly different between the groups with and without relapse before transplantation (20% vs. 55%, χ2 = 6.33, P = 0. 012), allogeneictranplantation versus autologous tranplantation (39% vs. 68%, χ2 = 8.06, P = 0.005), grade 3 or more acute graft versus host disease (aGVHD) and grade 0 -2 aGVHD (0% vs. 54%, χ2 = 7.52, P = 0.006),with and without relapse after transplantation (19% vs. 58%, χ2 = 10.13, P =0.001), with and without IP (23% vs. 58%, χ2 =8.35, P=0.004). Multivariate analysis showed that grade 3 or more aGVHD was the only statistically significant prognostic factors (χ2 = 12. 74 ,P =0. 000). The l-and 3-year relapse rateswere 30. 0% and 50. 0%. The incidence of relapse was obviously higher in the group with relapse before transplantation than that without (47% vs. 16%, χ2 =7. 32, P=0. 007). Multivariate analysis showed thatrelapse before transplantation was a significant factor predicting relapse after transplantation (χ2 = 9. 39,P =0. 020). The cumulative incidence of IP was 35.0%. The incidence of IP was different between groups with dose homogeneity > 3% and ≤ 3% (27% vs. 4%, χ2 = 5. 21, P = 0. 023), with and without acute parotitis (34% vs. 3%, χ2 = 14. 15, P= 0.000), allogeneic transplantation group and autologous transplantation group (31% vs. 8%, χ2= 7.70, P= 0.006). Multivariate analysis showed that transplantation methods, acute parotitis and dose homogeneity were statistically significant factors in predictingIP (χ2 = 10. 08 , 10. 08 and 7.69 , P = 0. 002 , 0. 002 and 0. 010 , respectively) . Conclusions Patients who develop grade 3 or higher aGVHD have poor prognosis. Dose homogeneity influences the incidence of IP. Patients undergoing allogeneic transplantation are apt to have IP. Acute parotitis is related with IP and might be a predictor.