人CTLA4Ig和EGFP双基因共表达逆转录病毒载体构建及鉴定

目的 构建并鉴定人CTLA4Ig和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）双基因共表达逆转录病毒载体。方法 利用基因重组技术将IRES序列与CTLA4Ig和EGFP基因构建到逆转录病毒载体中，脂质体法将重组质粒pCTLA4Ig-IRES2-EGFP转染PA317细胞，在G418选择压力下，通过流式细胞检测筛选得到高效共表达CTLA4Ig和EGFP并能产生高滴度重组逆转录病毒的PA317细胞克隆，MTT法测定CTLA4Ig生物学活性。结果 成功构建出含IRES序列的CTLA4Ig和EGFP双基因共表达逆转录病毒载体，生物学活性测定表明CTLA4Ig生物学活性没有受到影响。结论 IRES序列调控CTLA4Ig与EGFP双基因在细胞中同时独立表达。     

男性糖尿病足患者与男性2型糖尿病患者脂蛋白a差异研究

目的探讨糖尿病足与2型糖尿病这两个不同阶段中脂蛋白a(Lpa)的差异以及脂蛋白a(Lpa)在糖尿病足病程发展中的作用。方法回顾性分析解放军总参总医院骨内科糖尿病足患者(糖尿病足组)和2型糖尿病患者(2型糖尿病组)各30例,患者均符合WHO(1999年)糖尿病诊断标准。糖尿病足诊断符合国际糖尿病足工作/IDF顾问组发布的诊断标准。比较两组一般情况及生化指标,包括年龄、病程、身高、体重、空腹血糖、糖化血红蛋白、甘油三脂、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A、载脂蛋白B、载脂蛋白E、游离脂肪酸、脂蛋白a。结果糖尿病足组与2型糖尿病组患者年龄、病程、身高、体重比较差异无统计学意义。生化指标结果显示,糖尿病足组脂蛋白a(Lpa)高于2型糖尿病组,差异具有统计学意义(P<0.05)。游离脂肪酸低于2型糖尿病组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组间空腹血糖、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B、载脂蛋白A、载脂蛋白E差异均无统计学意义(P>0.05)。结论糖尿病足患者脂蛋白a水平高于2型糖尿病患者,提示脂蛋白a在动脉粥样硬化或微血管病变的发生中起着相当重要的作用。对于糖尿病足患者的治疗应重视对其脂代谢的治疗。     

正常与退变髓核细胞II型胶原蛋白和番红染色的研究

目的对正常与退变椎间盘髓核细胞（Nucleus pulposus of intervertebraldiSC）II型胶原蛋白免疫荧光染色及番红“O”染色进行比较。方法对正常与退变椎间盘髓核细胞进行番红“O”染色及细胞内II型胶原蛋白行免疫荧光染色。结果（1）免疫荧光染色：退变椎间盘髓核细胞轻度染色,呈类圆形,染色模糊,细胞内仅有极少量荧光颗粒;（2）番红“O”染色：退变盘髓核细胞形态不规则,细胞核染色较淡,形态不规则,细胞突起及胞浆染色不均匀,部分细胞组织结构分解,完整性消失,细胞稀疏,排列混乱,有的可见少量细胞坏死区。结论正常与退变椎间盘髓核细胞比较,在退变的椎间盘中髓核细胞数量减少、部分凋亡,髓核细胞内的Ⅱ型胶原蛋白含量明显减少。     

CAI课件在《家畜寄生虫学》教学中的应用

通过多种途径收集素材,制备适合动物医学专业学生使用的《家畜寄生虫学》CAI课件,使原来枯燥的讲解课程变成生动的展示课程。该课件帮助同学们日后对寄生虫病诊断以及寄生虫分类奠定了良好基础。     

黄芪甲甙对实验性肺纤维化大鼠瘦素表达的影响

目的 研究黄芪甲武对肺纤维化大鼠的治疗作用及对肺组织中瘦素表达的影响.方法 36只SD大鼠,随机分为对照组、模型组和黄芪甲甙干预组.模型组和干预组气管内注射博来霉素( BLM,5 mg/kg)诱导肺纤维化,对照组在相同条件下给予生理盐水.第二天起干预组大鼠每天经胃管灌服0.1 g/L黄芪甲甙2mL,其余两组相同条件下给予生理盐水.治疗的第7天和第28天,处死动物取出肺组织,进行病理学观察;用免疫组化和RT-PCR观察各组鼠肺组织瘦素蛋白及mRNA表达的水平.结果 病理学观察显示:与模型组比较,干预组肺泡炎和纤维化程度均减轻;与模型组比较,干预组瘦素蛋白及mRNA表达显著降低.结论 黄芪甲甙可能通过抑制瘦素的过度表达,对实验性大鼠肺纤维化具有良好的治疗作用.     

贲门癌癌旁组织肠上皮化生检测

目的:探讨贲门癌(GCA)癌旁肠上皮化生(IM)的组织学和组织化学特征及其与病变的关系.方法:采用爱显蓝-雪夫试剂染色和高铁二胺-爱显蓝染色2种方法分析408例河南GCA高发区GCA癌旁组织IM的分布特征.结果:GCA癌旁IM的检出率为32%(130/408),Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型IM所占比例分别为65%、16%和19%,Ⅰ型多于其他2型(x2=86.146,P＜0.05).IM伴不典型增生的比例(88%)高于伴慢性浅表性胃炎(13%)和慢性萎缩性胃炎(30%)(P＜0.05).结论:GCA癌旁IM的发生率随癌前病变的加重逐渐升高,提示其可能是一种重要的GCA癌前病变.     

孙桂芝教授治疗大肠癌经验

孙桂芝教授40余年来从事恶性肿瘤临床治疗及研究,通过总结治疗大肠癌的经验,指出其主要病因为湿热下注、酒色无度、外感邪毒,其治疗总体应予以健脾益肾、扶正固本来推动大肠传导司职,局部应予解毒化湿、散结祛瘀、消积导滞以利大肠功能恢复。孙师认为大肠腺瘤这一癌前病变在大肠癌的发生、发展中尤为重要,应未病先防,才能有效预防大肠癌的发生。她遵古而不泥古,将中医药理论与现代科学研究方法有机地结合起来,疗效显著,深为广大患者所信赖。     

人CD154基因真核表达载体的构建及在Eca109细胞中的表达

目的：构建人CD154基因真核表达质粒pcDNA3．1-CD154,初步观察转染该质粒后Eca109细胞的细胞生物学特性。方法：人外周血单个核细胞体外经PHA激活后提取总RNA,用RT—PCR技术扩增人CD154cDNA全长并构建真核表达质粒pcDNA3.1—CD154,用Lipofectamine^TM 2000介导pcDNA3．1-cDl54质粒转染食管癌Eca109细胞株,RT—PCR检测转染细胞中CD154 mRNA的表达,观察细胞生长特征。结果：用T7／SP6通用引物测序证实重组质粒中插入片段为正向插入的人CD154基因。pcDNA3．1-CD154转染Eca109细胞后细胞异型性明显改善,生长速率减慢。结论：pcDNA3．1-CD154构建成功;转染该质粒的Eca109细胞生物学特性发生改变。     

乌司它丁对油酸致急性肺损伤大鼠肺组织血红素氧化酶-1的影响

目的:探讨乌司他丁对油酸致急性肺损伤大鼠肺组织血红素氧化酶-1表达的影响.方法 30只成年SD大鼠,随机分为3组(n＝10).正常组(A组)经大鼠尾静脉注射0.2mL/kg生理盐水;急性肺损伤组(B组)、乌司他丁组(C组)经大鼠尾静脉注射油酸0.2mL/kg制成急性肺损伤模型,随后立即给予A组、B组腹腔注射生理盐水10mL/kg,C组100ku/kg的乌司他丁腹腔注射.测取动物4h时间点呼吸频率和左心室动脉血氧分压,并于4h后取右下肺组织行HE染色和HO-1免疫组织化学检查,观察光镜下病理改变以及血红素氧化酶-1的表达.结果: 乌司他丁能显著改善油酸所致急性肺损伤所致的呼吸窘迫;肺组织血红素氧化酶-1在对照组仅有少量表达,急性肺损伤组表达增多,乌司他丁干预组表达明显增强.结论:乌司他丁可通过增加肺组织中血红素氧化酶-1的表达而发挥保护作用.     

前列腺素E1治疗糖尿病肾病Ⅲ期临床疗效观察

目的观察前列腺素E1（PGEl）治疗糖尿病肾病Ⅲ期（DN—111）的临床疗效。方法35例糖尿病。肾病（DN）患者予PGEl治疗2周,并观察24h尿蛋白、24h尿微量白蛋白、空腹血糖、餐后2h血糖、血肌酐、血压的变化及不良反应等。结果PC-E1治疗2周后,24h尿蛋白、24h尿微量白蛋白较前均明显下降（P〈0．01）,其余检测指标虽较前降低,但差异无统计学意义（P〉0．05）。患者治疗后无肝功能异常改变,治疗期间无皮疹、血管炎等不良反应发生。结论PGEl可减轻DN．111患者尿蛋白的排泄,延缓DN的发展和恶化。