Explore the Application Law of Disperse Stagnation and Purge Heat with Bitter-Acrid Medicinals in Treating Endogenous Cough

内伤咳嗽以肺失宣肃、肺气上逆为基本病机。“苦辛通降助肺法”即借助药物气味的升降作用以使肺气宣降复常的治法，用于治疗内伤咳嗽可通过苦辛配伍来助肺宣降、调节气机。张之文教授为全国温病学泰斗，提出以“苦辛通降助肺法”治疗内伤咳嗽，临床效果显著。本研究以张老医案为基础，通过数据挖掘来管窥“苦辛通降助肺法”治疗内伤咳嗽的应用规律，为内伤咳嗽的治疗提供新的思路和方法。     

“三焦针法”改善慢性肾脏病患者失眠症的临床观察

[目的]通过"三焦针法"对慢性肾脏病合并不寐患者辨证施治,探讨"三焦针法"治疗慢性肾脏病患者失眠症的临床疗效。[方法]对天津市第一中心医院慢性肾脏病管理中心长期随访的89例慢性肾脏病3、4期未透析患者以匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评价睡眠质量。筛选出失眠症患者为研究对象,并随机选取30例患者实施"三焦针法"针灸治疗,其余患者作为对照组给予综合治疗。针灸治疗总疗程为3个月,继续随访至6个月。全部患者治疗前、3个月疗程结束、6个月随访结束后记录患者一般情况、实验室指标、PSQI评分、中医症状评分、SF-36生活质量评分以及评估的肾小球滤过率(eGFR),评价干预前后上述各项指标的变化。[结果]全部患者中男性占60.7%,平均年龄52.5岁,平均eGFR 48.9 mL/(min·1.73 m~2)。至6个月随访结束,针灸治疗组PSQI评分与基线评分比较下降值明显高于对照组。针灸治疗组各项中医症状评分改善情况优于对照组,失眠缓解率明显高于对照组。两组之间eGFR及SF-36评分变化无明显差异。[结论]"三焦针法"可以显著改善CKD3、4期未透析患者的失眠症,各项中医症状也得到相应改善。     

断藤益母汤对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MEKK2及CIA小鼠关节炎的影响

目的:为了研究断藤益母汤(DTYMD)在类风湿关节炎中对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)上游激酶的调控作用,阐明DTYMD抗炎的分子机制。方法:培养成纤维样滑膜细胞,将细胞分为空白组,模型组,DTYMD高、中、低质量浓度组(1 000,800,600 mg·l~(-1)),甲氨蝶呤(MTX)组(20μmol·l~(-1))组,采用蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)对丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶2(MEKK2)的蛋白和mRNA表达进行分析。将42只雄性DBA/1J小鼠随机分为6组,每组7只,分别为正常组,模型组,MTX组(2 mg·kg~(-1)),DTYMD低、中、高剂量组(6. 25,12. 5,25 mg·kg~(-1))。除正常组外,其他5组均采用二次免疫法构建胶原诱导型关节炎(CIA)模型。给药结束后,取小鼠后肢踝关节行苏木素-伊红(HE)染色并进行关节病理评分。结果:与模型组比较,DTYMD以浓度依赖方式抑制成纤维样滑膜细胞活性(P 0. 01);与空白组比较,模型组细胞增殖率升高(P 0. 01)。与模型组比较,DTYMD高、中质量浓度组降低MEKK2蛋白及mRNA的表达(P 0. 05,P 0. 01)。与模型组比较,DTYMD不同剂量组均降低细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)的表达(P 0. 01);与空白组比较,模型组MMP-1,IL-6,TNF-α表达明显上升(P 0. 05,P 0. 01)。在动物实验中,与模型组比较,DTYMD高、中剂量组可以降低CIA小鼠关节肿胀度(P 0. 05,P 0. 01);与正常组比较,模型组小鼠二次免疫后关节明显肿胀(P 0. 05)。在CIA小鼠踝关节HE染色中,与空白组比较,模型组小鼠病理学评分升高(P 0. 01);与模型组比较,DTYMD高、中剂量小鼠关节病理评分明显下降(P 0. 05,P 0. 01)。结论:DTYMD可能通过下调MEKK2对细胞因子IL-6,TNF-α,MMP-1负性调控,从而缓解类风湿关节炎的炎症反应。     

针刺治疗坐骨神经痛临床疗效的系统评价

目的:对针刺治疗坐骨神经痛的临床随机对照试验进行疗效评价,为针刺治疗坐骨神经痛的临床决策提供思路与参考。方法:通过计算机检索Pubmed、CNKI、万方、CBM、中国科技论文在线和Cochrane Library等数据库,共检索到相关文献878篇。运用Clear NPT评价方法对其进行系统评价,纳入其中19篇符合条件的的随机对照试验。结果:从最终纳入的19篇(2521例患者)文献中分析得出:目前国内外针刺治疗坐骨神经痛具有一定的临床疗效,但因整体文献质量较差而无法确切证实。结论:今后仍需更多的大样本、多中心、高质量的随机对照试验来进一步验证针刺治疗本痛症的的临床疗效。     

姜黄素聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物纳米粒的制备及其质量评价

目的制备姜黄素(Cur)聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物(mPEG-PLA)纳米粒(Cur-mPEG-PLA-NPs),并考察其理化性质、体外释药特性及抗肿瘤活性。方法采用乳化溶剂挥发法制备Cur-mPEG-PLA-NPs,通过正交设计优化处方工艺。利用透射电子显微镜观察纳米粒形态;激光粒度仪考察其粒径和Zeta电位;超速离心法测定其包封率及载药量;透析法考察其体外释药特性;四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察其对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用。结果根据优化处方工艺制备的Cur-mPEG-PLA-NPs外观呈圆形或类圆形,平均粒径为(129.24±1.45)nm,包封率和载药量分别为(82.15±1.07)%和(4.03±0.11)%;体外释药符合Weibull方程;与原料药Cur比较,Cur-mPEG-PLA-NPs对SMMC-7721细胞具有更强的抑制作用(P<0.05)。结论乳化溶剂挥发法可成功制备Cur-mPEG-PLA-NPs,为Cur新剂型的研究开发提供了实验基础。     

附子多糖后处理对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞锰超氧化物歧化酶表达的影响

目的:观察附子多糖后处理对缺氧复氧心肌细胞的保护,并以锰超氧化物歧化酶(MnSOD)表达为着眼点,探讨其作用机制。方法:建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组、缺氧后适应组、附子多糖(0.1mg/ml、1mg/ml、10mg/ml)后处理组。缺氧/复氧组给予心肌细胞缺氧3h后复氧6h;缺氧后适应组在细胞缺氧3h后,复氧前即给予3个循环的5min,复氧/5min缺氧,随后复氧6h;附子多糖后处理组在缺氧3h后,将心肌细胞换入含附子多糖浓度分别为10mg/ml、1mg/ml、0.1mg/ml的培养液中常规培养6h。流式细胞仪测定心肌细胞线粒体凋亡率和线粒体膜电位,荧光定量PCR测定Bcl-2mRNA和MnSODmRNA的表达量,黄嘌呤氧化酶法检测细胞内MnSOD的活性。结果:与缺氧/复氧组相比较,予10mg/ml浓度的附子多糖后处理可以有效保护线粒体膜电位的稳定,促进Bcl-2mRNA的表达,抑制心肌细胞凋亡的发生。附子多糖可有效促进MnSOD基因表达和增加MnSOD的活性,并呈一定的浓度依赖性。结论:附子多糖后处理对缺氧/复氧后心肌细胞具有保护作用,其机制可能与附子多糖促进锰超氧化物歧化酶的表达合成,保护线粒体,抑制细胞凋亡有关。     

知柏地黄丸对抑那通诱导特发性性早熟小鼠模型的干预作用

目的观察知柏地黄丸对抑那通诱导的特发性中枢性性早熟（ICPP）模型小鼠的影响。方法选用18日龄BALB／c雌性小鼠,随机分为5组：正常对照组,ICPP模型组,知柏地黄丸高、低剂量组（剂量分别为101．4g·kg^-1·d^-1、50．7g·kg^-1·d^-1）。甲地孕酮对照组（剂量为3．9mg·kg^-1·d^-1）;除正常对照组外,其他各组均给予促性腺激素释放激素拟似物抑那通,首次剂量为1573．5雌／kg,第2次、第3次剂量均为1180μg／kg,隔日1次,复制模型;检测各组小鼠阴道开口数,体重,血清雌二醇（E2）和黄体生成素（LH）水平,子宫、卵巢重量,计算子宫指数和卵巢指数,子宫和阴道脱落细胞涂片,卵巢组织病理学变化等。结果知柏地黄丸高剂量组于造模第3_4天对抑那通所致阴道开口提前有抑制作用（P〈0．05,P〈0．01）,知柏地黄丸低剂量组于造模第2-5天对抑那通所致阴道开口提前有抑制作用（均P〈0．05,P〈0．01）,甲地孕酮对照组于造模第3天对抑那通所致阴道开口提前有抑制作用（P〈0．05）;知柏地黄丸高剂量组可降低抑那通所致子宫重量增加（P〈0．05）,知柏地黄丸低剂量组及甲地孕酮对照组均可降低抑那通所致子宫、卵巢重量增加及子宫指数和卵巢指数的升高（P〈0．01）;高、低剂量的知柏地黄丸及甲地孕酮均有抑制抑那通降低E2水平的作用（P〈0．05,P〈0．01）,各给药组对抑那通升高LH水平、诱导阴道角化细胞的出现及排卵后出现的子宫内膜分泌期改变无明显影响。结论知柏地黄丸对抑那通刺激诱导的ICPP模型具有一定的对抗作用,其机制可能是通过抑制HPGA的靶腺（性腺）而起作用。     

HIV-1 Tat蛋白结合Tar的抗艾滋病药物筛选模型的建立研究

目的建立HIV-1Tat蛋白结合Tar的抗HIV-1药物筛选模型用于抗HIV药物筛选。方法构建表达HIV-1Tat蛋白的真核表达质粒（pCDNA3，1（＋）-Tat）和HIV-1 LTR-luc荧光素酶报告基因，采用脂质体转染法共转染HeLa细胞，荧光仪检测Tat蛋白促进荧光素酶在HeLa细胞内的表达情况，建立HIV-1Tat蛋白结合Tar的细胞模型，用于抗HIV-1的药物筛选。以DRB（5，6-二氯-1-β-呋核亚硝脲-苯并咪唑）为阳性对照，进行模型的建立及条件的优化。结果通过反复试验表明，目的基因和报告基因的配比、转染时培养液中小牛血清的含量、细胞浓度、转染前细胞状态以及药物作用时间的长短等对模型的稳定性和敏感性有影响。结论应用优化的细胞模型对文冠果、紫苏等浸提物进行筛选及结果的分析。     

夏枯草中苦味物质的初步分析

利用GC-MS和氨基酸分析仪分别分析夏枯草中的挥发油成分和氨基酸含量及种类,通过对各个组分质谱图对照分析, 鉴定出酯、脂肪酸、芳香烃、酮和多种醇类物质,其中β-紫罗酮具有柏木、覆盆子等香型香气;橙花叔醇具有弱的甜清柔美的橙花气息;橙花醇甜而清鲜;橙花叔醇干甜而少清,微带木香;十六醛具有有花和蜡的弱香气;α-甜橙醛具有浓郁、新鲜的甜橙香味。这几类芳香物质可在一定程度上影响夏枯草凉茶或者汤剂中的口感。在所检测的氨基酸中, 所含的天然氨基酸所占比例较大,味感有苦味、微苦、酸（鲜）、甜味、微甜、酸（弱鲜）等。对夏枯草味感影响最大的可能为苦味和微苦型氨基酸。     

辽东丁香枝化学成分的研究

  目的：研究辽东丁香树枝的化学成分。  方法：系统溶剂法对辽东丁香枝进行提取,并采用柱色谱、薄层色谱等分离手段对其进行分离纯化。水蒸气蒸馏法提取挥发油化学成分,利用GC-MS分析。  结果：鉴定出6种化合物,分别是:对苯二甲酸二甲酯(化合物1)、3-羟基-乌苏烷-12-烯(化合物2)、熊果酸(化合物3)、4-(2-羟乙基)-苯酚(化合物4)、D-甘露醇(化合物5)、丁香苷(化合物6);挥发油化学成分69种,占挥发油总量的99.86%,含量大的成分为2-甲基-5-(1-甲基乙基)-1-环戊烯醇(14.16%)。  结论：化合物3、5、6为首次从辽东丁香中分离得到,化合物1、2、4为首次从丁香属植物中分离得到。化合物2和6含量较大,为将来富集这两个化合物提供依据。挥发油中除了烷烃类外,其他类化合物部分成分含有萜类特征,其中烯烃类和氧化物类化合物中倍半萜成分所占比例最大。