GDF-5基因重组腺病毒修复人退变髓核细胞的实验研究

【摘要】 目的 探讨腺病毒介导的GDF 5基因对人退变髓核细胞外基质表达的影响,探求一种基因治疗新途径。方法 利用腺病毒载体将GDF 5基因导入退变髓核细胞,设置为空白对照组（Control组）、阴性对照组（GFP组）、实验组（GDF 5组）3组,并分为3、7、14、21天四个观察时间点,分别检测3组髓核细胞sGAG、Hyp的含量,免疫染色、Safranine O染色观察细胞外基质合成情况,Real time PCR检测Aggrecan、Collagen II mRNA表达水平。结果 GDF 5组髓核细胞sGAG/DNA、Hyp/DNA均在14、21天较Control组和GFP组明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）,而Control组与GFP组之间任意观察时间点比较差异均无统计学意义（P＞0.05）;免疫染色、Safranine O染色结果显示GDF 5组髓核细胞的蛋白多糖、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖在14、21天均呈强阳性染色,Control组和GFP组呈弱阳性染色。Real time PCR结果显示GDF 5组Aggrecan、Collagen II mRNA的表达在14、21天较Control组和GFP组明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 腺病毒介导的GDF 5能明显促进人退变髓核细胞Aggrecan、Collagen II mRNA的表达,并增加蛋白多糖、Ⅱ型胶原的合成,对细胞外基质具有明确的修复作用,是一种有效的基因治疗新方法。     

芒针透刺督脉组穴配合隔姜灸治疗脑卒中后睡眠障碍疗效及机制研究

目的:以芒针透刺督脉组穴配合隔姜灸对脑卒中后睡眠障碍患者进行干预治疗,观察患者睡眠改善情况及血清5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)和乙酰胆碱(Ach)水平变化,并分析其机制。方法:将同期收治的76例脑卒中后睡眠障碍患者采用随机数字表法分为观察组与对照组各38例。两组均给予脑卒中后常规西医康复治疗,在此基础上对照组辅以传统针灸治疗,观察组采用芒针透刺督脉组穴配合隔姜灸治疗,均连续治疗8周。治疗前后分别测定两组匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、睡眠状况自评量表(SSRS)、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,据以计算睡眠障碍治疗总有效率;检测两组血清5-HT、NA和Ach水平,并观察有无不良反应。结果:两组治疗后PSQI、SSRS、NIHSS评分均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组治疗后各评分均明显低于对照组(P<0.05);观察组和对照组睡眠障碍治疗总有效率分别为92.11%、76.38%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后血清5-HT、NA、Ach水平均较治疗前明显提高(P<0.05),且观察组治疗后各指标均明显高于对照组(P<0.05);两组在治疗期间均未发生明显不良反应。结论:芒针透刺督脉组穴配合隔姜灸治疗脑卒中后睡眠障碍安全有效,可明显改善患者预后,机制可能与上调神经递质水平有关。     

前瞻性单时相扫描联合“三低”方案在冠心病筛查中的应用价值

【摘要】目的 探讨冠状动脉CT血管成像技术（CCTA）前瞻性单时相扫描联合低管电压、对比剂低流率及低用量方案（简称前瞻性“三低”方案）在冠心病筛查中的应用价值。方法 招募2019年8～10月进行集中检查符合标准的86例自愿者，按照随机原则分为传统性多时相扫描组（传统组，46例）及前瞻性单时相扫描组（前瞻组，40例）。传统组使用碘帕醇370对比剂，前瞻组使用典迈伦400对比剂。以BMI=25 kg/m2为界限，分别采用80kV（BMI＞25 kg/m2，＜28 kg/m2）及70kV（BMI＜25 kg/m2）管电压，四种不同的固定对比剂用量及流速方案。通过CT值及对比噪声比比较客观图像质量；基于Likert分级评分法进行主观图像质量比较，配对分析两组最终诊断结果的人数构成比差异及有效辐射剂量。 结果 两组客观图像质量比较差异无统计学意义（P＞005），前瞻组主观图像质量评分低于传统组，且有1例扫描失败，但整体图像质量能达到诊断要求，两组诊断结果敏感性相似。前瞻组辐射剂量更低，对比剂用量更少，流率更慢（P＜005）。结论 前瞻性“三低”方案存在扫描失败风险，但在保证设备可靠性、受检者心率＜80 bpm及BMI＜28 kg/m2的前提下， 辐射剂量可低至04 mSv左右，使CCTA检查范围可扩大至对高危、无症状冠心病人群的体检。     

腹腔镜治疗胆囊颈部结石临床体会

目的探讨腹腔镜胆囊切除术胆囊颈部结石的处理方法。方法 2002年10月至2008年10月间,我们对286例胆囊颈部结石分别采用腹腔镜胆囊顺行切除、逆行切除和顺逆结合切除术治疗。结果手术均获成功,术后恢复顺利,无严重并发症出现。结论腹腔镜胆囊切除术中对不同情况的胆囊颈部结石采用不同的处理方法,可以有效避免术中胆管损伤等严重并发症。     

左旋氧氟沙星对小鼠结核分枝杆菌生长及细胞免疫的影响

目的探讨左旋氧氟沙星对小鼠结核分枝杆菌生长、特异性细胞免疫和病理改变的影响,探讨左旋氧氟沙星联合其他免疫治疗的可行性。方法 38只C57BL/6小鼠尾静脉注射H37Rv结核菌(1×106CFU/只),然后随机等分为两组,一组不作处理(对照组),另一组进行左旋氧氟沙星灌胃治疗(药物组),300mg/kg,每周灌5d,疗程28d。在治疗开始后不同时间点处死小鼠,计数肺组织结核分枝杆菌菌量、观察肺组织病理变化,测定脾细胞特异性细胞因子的产生情况。结果左旋氧氟沙星能有效抑制小鼠肺组织结核分枝杆菌的生长,与对照组比较,药物组小鼠服药期间细菌量减少100倍,停药后30d仍减少10倍,差别有统计学意义(P0.05)。同时药物治疗能减轻肺组织病理变化的程度。药物组小鼠脾细胞分泌卡介苗(BCG)特异性细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-10和IL-17水平明显高于对照组(P0.05)。结论左旋氧氟沙星能有效抑制小鼠结核分枝杆菌的生长,同时能改善肺组织的病理变化和促进小鼠脾细胞分泌特异性细胞因子。     

白藜芦醇对人胰腺癌PANC-1细胞增殖与侵袭的影响

目的 探讨白藜芦醇对人胰腺癌PANC-1细胞增殖与侵袭能力的影响.方法 实验分为空白对照组,0.1%DMSO组,白藜芦醇组(50、100、200 μmol/L).MTT法检测白藜芦醇对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化;Transwell侵袭小室检测白藜芦醇对细胞侵袭的影响;荧光实时定量PCR和Western blot检测白藜芦醇对细胞Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9表达的影响.数据以-x±s表示,多组比较采用方差分析.结果 (1)空白对照组抑制率为0;0.1%DMSO组细胞抑制率为3.25%±0.42%;白藜芦醇50 μmol/L组细胞抑制率为13.23%±1.68%;白藜芦醇100μmol/L组细胞抑制率为42.25%±3.20%;白藜芦醇200μmol/L组细胞抑制率为56.94%±5.31%.各组比较,差异有统计学意义(F=460.10,P<0.05).(2)空白对照组细胞凋亡率为0.05%±0.03%;0.1%DMSO组细胞为凋亡率为3.39%±1.77%;白藜芦醇50 μmol/L组细胞凋亡率为6.92%±1.85%;白藜芦醇100 μmol/L组细胞凋亡率为19.05%±2.01%;白藜芦醇200 μmol/L组细胞凋亡率为27.17%±6.43%.各组比较,差异有统计学意义(F=38.84,P<0.05).(3)0.1%DMSO组对细胞周期无显著影响.白藜芦醇引起PANC-1细胞G0/G1期和S期阻滞,G2/M期细胞减少.(4)空白对照组平均穿膜细胞数为61±13;0.1%DMSO组为54±13;白藜芦醇50 μmol/L组为48±15;白藜芦醇100 μmol/L组为23±6;白藜芦醇200 μmol/L组为18±7.各组比较,差异有统计学意义(F=69.08,P<0.05).(5)白藜芦醇可使PANC-1细胞Bax表达升高,Bcl-2表达下调.MMP-2、MMP-9的表达明显受到抑制,mRNA和蛋白水平变化一致.结论 白藜芦醇可明显抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖,诱导细胞凋亡并抑制其侵袭能力.     

牙色美容树脂结合根管钉内置固位治疗磨牙顽固性食物嵌塞

目的：评价树脂结合根管钉内置固位治疗顽固性食物嵌塞的疗效。方法：将根管钉作为树脂内置固位装置,连接并封闭导致食物嵌塞的29对（58颗牙）,对患者进行随访观察。结果：27对（54颗牙）术后均不再发生嵌塞食物（93.10%）,2对（4颗）因松动失败（6.90%）。结论：用光敏复合树脂结合根管钉内置固位充填法治疗食物嵌塞具有磨牙少、可一次完成不需复诊、操作简单、美观、舒适耐用、异物感小、经济实惠等优点,同时还起到牙周夹板的作用治疗松动牙。是一种较好的、治疗磨牙食物嵌塞的方法。     

改良胰空肠端端吻合术对胰十二指肠切除术后胰瘘发生的影响

目的探讨改良胰空肠端端吻合术对胰十二指肠切除术后胰瘘发生率的影响。方法回顾分析施行胰十二指肠切除术71例的临床资料,比较不同胰空肠吻合方法的胰瘘发生率。结果胰瘘总发生率为18.3%(13/71);改良胰空肠端端吻合术后无胰瘘发生(0/22);传统胰空肠端端吻合术后胰瘘发生率为27.6%(8/29);胰空肠端侧吻合术后胰瘘发生率为25.0%(5/20)。改良胰空肠吻合术后胰瘘发生率显著低于传统端端吻合(P0.05)和端侧吻合(P0.05),而端端吻合和端侧吻合术后胰瘘发生率无统计学差异(P0.05)。结论改良胰空肠端端吻合术能显著降低胰十二指肠切除术后的胰瘘发生率。     

儿童肱骨远端骺板损伤的诊治

目的探讨儿童肱骨远端骺板损伤的诊断与治疗，减少误诊误治及并发症的发生。方法回顾性分析我院2000年1月～2004年12月收治的66例儿童肱骨远端骺板损伤，诊断根据临床表现结合X线检查，有时行超声检查。按照Salter-Harris分型：I型1例，Ⅱ型33例，Ⅲ型20例，Ⅳ型12例。根据其损伤移位情况分别行闭合复位石膏固定，或切开复位、克氏针加可吸收线缝合内固定、石膏托固定，或切开复位、螺丝钉内固定、石膏托固定治疗。石膏均固定4～6周，术后第1天即开始进行功能锻炼。结果随访6个月-4年，平均2．7年。参照Goldberg等的方法制定疗效评定标准评估：优46例，良14例，可3例，差3例，优良率90．9％。结论骺板生长潜力大，受损后严重影响骨骼发育，导致肢体短缩或关节畸形，早期正确的诊断、准确的复位、合理的制动和固定以及积极的功能锻炼对损伤的愈合和关节功能的恢复具有积极作用。     

军队牙龈炎患者口腔卫生健康教育

目的探讨军队牙龈炎患者的口腔卫生健康教育方法及效果。方法对某部210例牙龈炎患者以挂图讲解方式行口腔卫生健康教育，2个月后比较干预前后牙龈指数（GI）和口腔卫生指数（DI）。结果2个月后患者GI和DI与干预前比较，差异有显著性意义（均P〈0．01）。结论正确的口腔卫生健康教育可改善牙龈炎状况，提高军队官兵口腔健康水平。