Induction of apoptosis and inhibition of proliferation in Hep-2 by antisense survivin RNA in vitro

Objective.. To study induction of apoptosis and inhibition of proliferation in Hep-2 by antisense survivin RNA. Methods： Antisense survivin RNA expression vector was constructed and then was transfected to human laryngeal carcinoma cell line Hep-2 by lipofectamine. HpEGFP/survivin cells （transfected with the combinant of antisense survivin RNA） were obstained by using G418. The levels of survivin protein before and after transfection were determined by Western-blot. Proliferation activity was measured by MTT assay. The experiment of colony formation in soft agar was carried out for assessing ability of proliferation of Hep-2 cell. Apoptosis was assessed by flow cytometry and acrdine orange（AO）. Results： After antisense survivin RNA plasmids were transfected, the level of survivin protein was inhibited in Hep-2. Compared with control, proliferation of HpEGFP/survivin cells were suppressed significantly. The experiment of colony formation in soft agar showed the ability of colony formation decreased in HpEGFP/survivin cells compared to control （P〈0.05）. Apoptosis rate increased about 1.81-folds compared with control. Conclusion.. The antisense survivin RNA can partly inhibit the level of surviivin protein expression in Hep-2 and can induce apoptosis and inhibit the proliferation of Hep-2 by down-regulating the expression of endogenous survivin in vitro.     

体外着床模型中人孵化后早胚细胞角蛋白和肌动蛋白的表达

目的:建立理想的体外胚胎着床模型,并检测模型中人孵化后早胚细胞角蛋白、肌动蛋白和hCG。方法:孵化后早胚与人子宫内膜蜕膜化的基质细胞共培养,观察胚泡在基质细胞层上的定位、黏附、铺展和侵入过程;用免疫荧光染色技术,测定共培养系统中的细胞角蛋白和肌动蛋白;用免疫荧光分析技术,测定培养液中的hCG水平。结果:胚泡和基质细胞共培养5h起,胚泡开黏附在基质细胞层上,最终侵入蜕膜化的基质细胞间。共培养48h后,细胞角蛋白仅仅在滋养层细胞中表达;肌动蛋白在人蜕膜化的基质细胞和滋养层细胞中均有表达。囊胚与子宫内膜基质细胞共培养的培养液中的hCG水平明显高于囊胚单独培养的(P<0.01)。结论:成功建立了一个能反映人胚泡黏附、铺展及侵入到人子宫基质细胞的体外着床模型,细胞角蛋白、肌动蛋白和hCG在着床早胚细胞中起相应变化。     

成年男性血清生殖激素水平与精液量以及精子密度的关系

目的:探索普通成年男性血清生殖激素水平与精液量以及精子密度的关系。方法:资料来源于对5个研究现场(河北省石家庄市、山西省太原市、贵州省贵阳市、浙江省杭州市及山东省青岛市)的普通成年男性的横断面调查。同时收集研究对象的血样和精液样本,分析黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)以及雌二醇(E2)与精液量、精子密度之间的关系。结果:共招收研究对象978名,通过相关分析及方差分析表明,高水平T对象的精子密度较低;高水平E2对象精液量较少。Logistic回归分析发现,高水平T发生低精子密度的危险性大,低水平的LH发生低精子密度的危险性小。结论:普通成年男性血清中生殖激素水平与精液数量指标有关,但表现出的某些关联性用已知的下丘脑-垂体-睾丸轴调节机制尚无法完全解释。     

新生儿缺氧缺血性脑病影像学诊断的比较研究

在围产新生儿医学所有问题中,新生儿脑损伤的治愈率和其生存后的生活质量,仍然是儿科医师的一个重要的研究课题。早期诊断和及时适宜地治疗脑损伤是改善预后的关键。为此,我们对住院的新生儿窒息病人常规进行头颅B超检查,并做CT对照,以求在边远基层地区获得最佳诊疗手段,及时施治有效的医疗措施,减轻脑损伤程度,提高新生儿存活率,降低神经系统后遗症的发生率。1对象与方法1.1对象1996年10月～2001年6月住院的新生儿窒息病人80例。入院日龄最小5m in,最大3d,平均(0.45熏2.04)h;80例中男47例,女33例;重度窒息56例,轻度窒息24例;早产儿2例,足…     

地塞米松对急性淋巴细胞白血病患儿核转录因子-κB表达的影响及意义

目的探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白的表达及意义,观察地塞米松(DEX)对其活性的影响,为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段的依据。方法1.应用SP免疫组化法,检测20例ALL患儿和20例正常对照儿童NF-κB p65蛋白表达。2.用SP免疫组化法检测DEX对ALL细胞NF-κB p65蛋白活性影响。结果1.ALL患儿20例的NF-κB p65蛋白阳性表达率为85.50%(17/20),表达定位于ALL细胞胞核及胞浆中,明显高于正常对照组10.0%(2/20),两者比较有显著性差异(χ2=22.56 P<0.01)。2.临床治疗剂量的DEX 5.0 mg/L作用于ALL细胞24 h,能显著抑制NF-κB p65蛋白表达,其阳性表达率为(25.0±3.0)%,与未处理的ALL细胞比较,有显著性差异(t=55.00 P<0.01)。结论1.NF-κB p65蛋白表达于儿童ALL细胞中。2.抑制NF-κB的活性可能是DEX作用于儿童ALL细胞的机制之一,抑制NF-κB信号传导途径可能在儿童ALL治疗中有重大价值。     

子宫腺肌病UAE治疗后妊娠及分娩的研究

目的:了解子宫腺肌病子宫动脉栓塞治疗(UAE)后患者的妊娠情况及结局,探讨该治疗方法对生育功能的影响。方法:对我院所完成的252例因子宫腺肌病行UAE的病例进行追踪观察,了解治疗后妊娠情况及结局。结果:①252例患者中有13例共16次妊娠,均为自然受孕。受孕时间为术后3~43个月,平均为13个月。②没有生育要求的208例患者中,有4例(4次)意外受孕:2例(2次)药物流产,2例(2次)行人工流产术。其中1例行人工流产术的患者取其绒毛组织作染色体检查正常。③有生育要求的44例患者中有9例12次妊娠(妊娠2次者1例,妊娠3次者1例),受孕率为27.3%(12/44)。其中足月顺产分娩3例,足月要求剖宫产和术中切除子宫1例,因胎膜早破早产要求行剖宫产1例,此5例均未发生产后出血,新生儿常规体格检查均未发现异常。自然流产4例(4次),均为孕4个月内胚胎停止发育。目前正在妊娠中患者1例,该患者行血液唐氏综合征筛查风险值为1/780,B超符合孕周,发育良好。结论:子宫腺肌病UAE治疗后可以正常受孕和分娩,但可能存在流产和早产的高危因素。     

LMP2基因多态性及夫妻共享率与重度子痫前期的相关性研究

目的 测定重度子痫前期（severe pre-eclampsia，S-PE）患者和正常孕妇多功能蛋白酶（large muhifunctional protease，LMP2）基因多态性及夫妻共享率，探讨该基因与S-PE发病的相关性。方法 选择102例S-PE患者及其配偶为研究对象，随机选择200例正常孕妇及其配偶作为对照。所选孕妇均为单胎初孕，孕35～40周。各取2ml外周静脉血抽提DNA，应用PCR—RFLP方法进行LMP2基因分型。结果 LMP2R／H在S-PE患者中的分布频率显著高于正常孕妇组（53．9％和35．5％，P〈0．01），LMP2R／R在S-PE患者中的分布频率显著低于正常孕妇组（41．2％和58．5％，P〈0．01）。LMP2R／H在S-PE组的夫妻共享率与正常孕妇组的相比显著增高（24．5％和10．5％，P〈0．01）。结论 LMP2R／H很可能为S-PE发病的易感基因；而LMP2R／R可能是S-PE的保护基因。     

室间隔缺损介入治疗的并发症防治

目的探讨小儿室间隔缺损(VSD)经导管介入治疗的并发症原因及其防治。方法选择VSD患儿362例。男152例,女210例;年龄2-14(9.3±5.8)岁;体质量11.0-65.0(20.5±11.8)kg。并动脉导管未闭(PDA)16例,并房间隔缺损(ASD)8例,并肺动脉瓣狭窄(PS)2例,常规行介入手术治疗。结果患儿术前均经胸超声检测VSD为2.7-13.0 mm,平均6.5 mm;术中心室造影测量VSD为2.5-14.0 mm,平均6.2 mm;345/362例(96.2%)封堵成功。所选封堵器为4.0-16.0 mm,平均8.6mm。发生心脏并发症33例,血管并发症13例,其他并发症4例,包括Ⅲ度房室传导阻滞5例,Ⅱ度房室传导阻滞3例,交界区性心律4例,室性期前收缩5例,完全性左束支传导阻滞6例,完全性右束支传导阻滞4例,主动脉瓣关闭不全、残余分流各3例,基底核区脑梗死1例,股动脉假性动脉瘤、股动静脉瘘各5例,股动脉血栓3例,溶血、血尿1例,交换导丝断裂、猪尾导管断裂各1例。结论经导管介入治疗小儿VSD操作简单、成功率高、相对安全、近期临床疗效好,但应进一步加强心律失常、血栓等并发症的防治。     

胆红素脑病仔鼠血清S-100蛋白水平及其脑组织蛋白表达的动态变化

目的探讨胆红素脑病血清S-100蛋白(S-100)水平的变化及其意义。方法7日龄Wistar大鼠腹腔注射胆红素200 mg/kg,制备胆红素脑病动物模型。应用酶联免疫法动态观察胆红素脑病仔鼠血清S-100水平及免疫组织化学的方法动态观察胆红素脑病仔鼠不同时间点脑组织S-100蛋白水平。结果与对照组比较,造模后12 h仔鼠血清S-100水平升高(P<0.001),24 h达峰值,至72 h仍高于对照组,96 h降至正常组水平;造模后仔鼠不同时间点脑组织S-100蛋白的表达阳性面积的变化随时间变化逐渐增加。结论S-100可反映胆红素脑病仔鼠神经胶质的损伤程度,是判定胆红素脑病的可靠指标。     

儿童无菌性脑膜炎83例临床分析

无菌性脑膜炎又称浆液性脑膜炎、淋巴细胞性脑膜炎或病毒性脑膜炎,是多种病毒性神经系统感染的常见表现。主要特征是脑膜刺激症状和脑脊液细胞增多。现收集我院2003年9月~2003年11月间收治入院的83例无菌性脑膜炎患儿资料,分析无菌性脑膜炎的临床表现特点。1临床资料1·1研究对