依立雄胺对激素非依赖型人前列腺癌细胞的体外抑制作用

目的 :观察依立雄胺在体外对激素非依赖型人前列腺癌细胞 (PC3)正常生长及Bcl 2蛋白表达的作用。方法 :用 5 ,15和 4 5 μmol·L- 1的依立雄胺作用PC3细胞 3d或 7d后 ,相差显微镜进行细胞形态学观察 ;苔盼蓝染色活细胞计数 ,绘制 7d的生长曲线 ;应用流式细胞仪分析依立雄胺对PC3细胞凋亡的影响 ;应用免疫组化比较经依立雄胺作用后PC3细胞Bcl 2的表达强度。结果 :依立雄胺在5 ,15和 4 5 μmol·L- 1作用PC3细胞 3d后 ,可使其有明显的皱缩脱壁 ,部分细胞膜破裂 ,并抑制PC3细胞的生长 ,抑制率依次为 19% ,2 6 %和 6 0 % ;流式细胞仪分析显示上述浓度的依立雄胺不诱导细胞凋亡 ,但可抑制细胞于DNA合成 (S)期 ,其百分率分别为 18% ,16 %和 11% ,而对照组为 33% ;免疫组化分析表明依立雄胺也不能降低PC3细胞中Bcl 2的表达。结论 :5 ,15和 4 5 μmol·L- 1的依立雄胺在体外可抑制PC3细胞的生长 ,机制可能为抑制细胞DNA的合成。     

17-AAG对MCF-7细胞增殖的抑制作用及对STAT3和VEGF表达的影响

 目的观察17-AAG对人乳腺癌MCF-7细胞株STAT3、VEGFmRNA及蛋白表达水平的影响。方法体外培养MCF-7细胞,分别给予不同剂量及不同作用时间的17-AAG,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）检测细胞增殖能力;RT-PCR和Westernblot法检测各组细胞STAT3和VEGFmRNA及蛋白的表达水平。结果0.165～10.000mg/L17-AAG作用24h、48h对MCF-7细胞有显著的抑制作用,且有明显的时间、剂量依赖性;1.0、2.0、3.0、5.0mg/L17-AAG作用48h后,各组细胞STAT3和VEGFmRNA及蛋白表达水平均下调,且具有浓度依赖性。结论17-AAG对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有明显的抑制作用,并能抑制STAT3和VEGFmRNA及蛋白的表达,且具有剂量依赖性。     

胰腺神经内分泌肿瘤的定位诊断进展

胰腺神经内分泌肿瘤（pancreatic neuroendocrine tumours,PNETs）为起源于神经内分泌细胞与 肽能神经元的罕见肿瘤类型。大多数PNETs无特异性临床症状,早期难以发现,误诊率高,且有恶性倾向, 早期诊断是提升PNETs患者生存率的关键。本文结合新近的文献与指南,概述胰腺内分泌肿瘤的定位诊 断方法和进展,为临床诊断提供思路。     

一个简捷的甾体5α-还原酶抑制剂体外筛选模型

通过模拟睾丸酮经甾体5α-还原酶催化,从NADPH(辅酶)中获得H~ 还原成双氢睾丸酮(DHT)这一反应,参照文献资料以酶动力学原理,分别测定反应底物NADPH和产物[~3H]-DHT含量变化的初始速率以代表酶活性,建立了“分光光度计法”和“同位素法”体外筛药模型,通过这两种模型对比,以非那甾胺为阳性对照药物,对爱普列特进行了体外模型验证研究。两种筛选模型结果一致,确定非那甾胺和爱普列特的抑制常数:用测定OD_(340)nm值的“分光光度计法”求得爱普列特抑制常数Ki=24.9±1.3nmol/L,半数抑制浓度IC_(50)=39.0 nmol/L;非那甾胺Ki=15.3±2.3 nmol/L,IC_(50)=58.6 nmol/L。用测定[~3H」-DHT dpm值的“同位素法”求得爱普列特Ki=67.4±13.2 nmol/L,IC_(50)=49.6nmol/L;非那甾胺Ki=25.0±1.9 nmol/L,IC_(50)=5.1nmol/L。该结果与国外文献中报道的爱普列特Ki=5～23 nmol/L,非那甾胺Ki=23.6 nmol/L相接近。     

人附睾蛋白4过表达对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭能力及肿瘤形成的影响

目的 探讨人附睾蛋白4（HE4）过表达对子宫内膜癌（EC）细胞增殖、侵袭能力及肿瘤形成的影响。 方法 构建HE4过表达质粒载体（pcDNA 3.1/Myc-His-HE4）和HE4特异性小干扰RNA（siRNA）表达质粒载体（siRNA-HE4）,分别转染HEC-1B（HE4过表达组）和Ark2（HE4低表达组）两个EC细胞系;以空载体pcDNA 3.1/Myc-His转染的HEC-1B细胞为HE4过表达组的阴性对照,以非特异性序列siRNA转染的Ark2细胞为HE4低表达组的阴性对照;不进行转染处理、正常培养的EC细胞系为正常对照组。转染后,采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测HE4 mRNA表达水平,MTT比色法测定细胞增殖活性,体外迁移和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。构建移植性肿瘤小鼠模型,比较各组动物的形成瘤体积。 结果 与正常对照组和阴性对照组的HEC-1B细胞比,转染pcDNA 3.1/Myc-His-HE4后HEC-1B细胞中HE4 mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）,细胞增殖活性、穿膜细胞数明显升高（P＜0.05）;与正常对照组和阴性对照组的Ark2细胞比,转染siRNA-HE4后Ark2细胞中HE4 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）,细胞增殖活性、穿膜细胞数明显降低（P＜0.05）;而阴性对照组与正常对照组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）;HE4过表达组的移植性肿瘤体积和重量明显大于其对照组（P＜0.05）,而HE4低表达组的移植性肿瘤体积和重量明显小于其对照组（P＜0.05）。 结论 HE4过表达可导致EC细胞的增殖、迁移及侵袭能力增强,促进肿瘤形成;下调HE4基因表达可明显抑制EC细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制肿瘤生长。     

连翘酯苷对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖与分泌功能的影响

目的分析连翘酯苷(FS)对小鼠脾脏T和B淋巴细胞增殖、分泌NO和TNF-α的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。方法无菌操作分离小鼠脾脏,制备脾脏细胞并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刺激剂刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)以及不同浓度40、80、160 μg/mL的FS共培养不同时间,采用MTT法检测T和B淋巴细胞的吸光度变化,ELISA和Griess法分别检测细胞分泌TNF-α和NO的水平。结果低浓度和中浓度FS对ConA诱导T淋巴细胞24 h和48 h后细胞增殖和存活率明显提高,诱导时间延长至72 h后FS明显抑制细胞转化;低浓度FS对LPS诱导脾脏B淋巴细胞24 h后细胞增殖和生存率显著提高;FS促进小鼠脾脏T和B淋巴细胞分泌NO;FS促进B淋巴细胞分泌TNF-α,中浓度FS促进T淋巴细胞分泌TNF-α而高浓度反而抑制其分泌。此外,FS对环磷酰胺(CY)处理小鼠的脾脏淋巴细胞体外增殖有明显影响,对细胞NO分泌影响不显著。结论结果提示FS可能通过影响小淋巴细胞增殖和细胞因子分泌而调节免疫细胞功能。     

上海市居民就医流向分析及政策建议

目的了解上海市居民就医流向并提出政策建议。方法采用随机分层抽样,选取上海市中心地区、城乡结合区和郊区各2个区,每个区在门诊部选取400名居民（医院和社区卫生服务中心各200人）,在住院部选取200名居民（包括住院患者、该时间段内曾经在门诊就诊的陪同人员和未就医的陪同人员）,共对3 600人进行问卷调查。问卷内容包括患者的基本资料、就诊时首选医院的级别以及选择该院就诊的原因。结果回收有效问卷3 244份（90.1%）。门诊患者中,56.3%首选社区医院,34.0%首选三级医院;住院患者中38.3%首选社区医院,42.9%首选三级医院。门诊患者首选该院的原因：44.8%为就近方便,31.2%为医疗水平高,10.3%为服务态度好,5.2%为费用低;住院患者首选该院的原因：49.9%为医疗水平高,27.2%为就近方便,7.6%为服务态度好。结论应尽快构建改善上海市居民就医状况和提高就医满意度的新型特色医疗卫生服务模式,完善医疗服务网络,建立两级医疗服务网络架构——区域医疗服务中心和基层医疗卫生机构。     

胃窦黏膜粗糙不平不同表现对慢性萎缩性胃炎的诊断价值

目的 探讨胃窦黏膜粗糙不平不同表现对慢性萎缩性胃炎(CAG)的诊断价值.方法 选择胃镜下胃窦黏膜粗糙不平不同表现的患者118例,分均匀粗糙和非均匀粗糙两组.均匀粗糙分砂纸状、鳞片状及粗结节状3型,非均匀粗糙分细小、中等、粗大结节状3级.每组分有灰白凹陷和无灰白凹陷两型.比较粗糙不同表现处、灰白凹陷处的病理性质.结果 非均匀粗糙对粗糙不平黏膜萎缩性炎症的灵敏度是96.8％,特异度是85.7％,和均匀粗糙比较差异有显著性.非均匀粗糙程度与病理萎缩程度有相关性.胃窦黏膜均匀粗糙灰白凹陷处与非均匀粗糙及其灰白凹陷处比较差别无显著性.结论 胃窦黏膜粗糙不平的均匀性可作为慢性胃炎萎缩性和非萎缩性的判断依据;黏膜粗糙伴灰白凹陷者不论占比多少,胃镜诊断应以白区为准;胃镜下黏膜粗糙程度分级有临床意义.     

犬前列腺体积与重量的关系及腹壁超声测量法的应用

为了解犬前列腺体积与重量的相关性及超声测量法在犬前列腺体积探测中的实用性，对麻醉Beagle犬及杂种犬先进行超声探测前列腺体积，然后处死，剥离出前列腺，称重后采用排水法测量前列腺实际体积。结果表明，超声测量法的结果能反映2种犬前列腺的实际大小(r1=0．920，r2=0．992)，且犬前列腺体积与重量有着密切的相关性(r3=0．990，r4=0．992)。因此，利用超声测量法可方便地获取犬前列腺体积，并且根据犬前列腺密度的相对恒定性，可对犬前列腺重量及前列腺体积进行相互转换。     

MGMT表达与替莫唑胺治疗多形性胶质母细胞瘤耐药的关系

多形性胶质母细胞瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,而且在胶质瘤中恶性程度最高.替莫唑胺为治疗多形性胶质母细胞瘤的新型烷化剂类口服化疗药物,研究表明替莫唑胺的耐药机制与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)的表达相关.了解多形性胶质母细胞瘤应用替莫唑胺治疗的耐药性与MGMT表达的相关性对临床治疗很有帮助.