HPLC法测定阿奇霉素的血药浓度

目的 :建立阿奇霉素血药浓度的测定方法。方法 :采用HPLC紫外检测法 ,岛津CLC CN分析柱 ,流动相为 0 1mol·L-1磷酸二氢钠 甲醇 乙腈 ( 85∶7∶8,,V/V/V) ,pH 3 0～ 3 5 ,流速 1mL·min-1,柱温 4 0℃ ,检测波长 2 10nm ,灵敏度 0 0 0 3AUFS ,提取液为氯仿 正己烷 ( 3∶2 ,V/V) ,以峰面积外标法定量。结果 :阿奇霉素血药浓度线性范围 5 0～ 5 0 0 0 μg·L-1,平均回收率( 10 0 9± 2 7) % ,日内RSD 1 2 %～ 4 3% ,日间RSD 2 8%～ 6 8%。结论 :本法简便 ,分析速度快 ,灵敏度较高 ,重复性好 ,基本能适用于临床血药浓度测定及药动学研究。     

诱发型一氧化氮合酶在人类鼻黏膜上皮细胞中的表达

目的　探讨人类鼻黏膜上皮细胞应答炎性刺激因子白细胞介素 1 β(interleukin 1 β ,IL 1 β)和肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor α ,TNF α) ,合成诱发型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesynthase ,iNOS)的能力及其机制 ,以及类固醇药物对上皮细胞的影响。方法　将人类鼻黏膜上皮细胞(包括鼻息肉上皮细胞 ,下鼻甲上皮细胞 )进行无血清原代细胞培养 ,分别加入各种不同浓度的炎性刺激因子 (IL 1 β和TNF α)以及地塞米松 ,采用原位杂交的方法检测不同条件下iNOSmRNA的水平。结果　①不论用IL 1 β或是TNF α刺激 ,iNOSmRNA水平均随浓度的增加 ,时间的延长而增加 ,尤以鼻息肉上皮细胞明显。但当浓度到一定水平后 ,iNOSmRNA水平不再继续升高 ;②用IL 1 β +TNF α共同刺激 ,iNOSmRNA水平要高于单纯用其中的一种 (P <0 .0 1 ) ,同样鼻息肉上皮细胞iNOSmRNA水平要高于下鼻甲上皮细胞 ;③加入地塞米松后 ,被炎性因子诱发的iNOSmRNA升高的水平下降。当地塞米松浓度为 4 0ng/ml以上时 ,iNOSmRNA水平不再继续下降。 结论　①IL 1 β和TNF α上调人类鼻黏膜上皮细胞合成的iNOSmRNA水平 ,鼻息肉上皮细胞更为活跃。它的机制可能是通过核因子 κB途径 ;②地塞米松降低这种上调作用 ,它的机制可能是通过阻断核     

不明原因习惯性流产患者蜕膜自然杀伤细胞活性及表型的研究

目的 :探讨原因不明习惯性流产 (UHA)患者蜕膜自然杀伤 (NK)细胞的数量、表型特征及杀伤活性 ,探讨其在UHA发病中的作用。方法 :选取确定妊娠并难免流产的UHA 32例 ,选取 2 0例正常妊娠行人工流产者作为对照组 ,用流式细胞仪检测两组蜕膜组织中NK细胞数量及表型 ,用改进的乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞杀伤活性。结果 :正常早孕蜕膜中CD5 6+CD3- NK细胞占蜕膜单个核细胞的 60 .73± 13.2 4 % ,为蜕膜组织的优势细胞群 ,UHA患者蜕膜中CD5 6+CD3- NK细胞总量与正常妊娠蜕膜组织中相同 ,而其CD5 6+CD16- 亚群却明显低于正常妊娠组 (P <0 .0 5 ) ,CD5 6+CD16+亚群含量及CD5 6+CD16+/CD5 6+CD16- 比值均异常增高 (P均 <0 .0 5 )。UHA组蜕膜组织中NK细胞杀伤活性及其异常增高率均高于正常妊娠组 ,差异均有显著性 (P均 <0 .0 5 )。结论 :NK细胞是孕早期蜕膜组织中的优势细胞群 ,其亚群失衡及功能异常可导致自然流产     

慢性肾衰继发性甲旁亢iPTH水平变化的临床意义及罗钙全疗效观察

目的探讨慢性肾功能衰竭(CRF)并发继发性甲状旁腺机能亢进(SHPT)血中全段甲状旁腺激素(iPTH)水平变化的临床意义及小剂量罗钙全对慢性肾衰继发甲旁亢早期的疗效观察。方法分别采用免疫放射法、苦味酸法、偶氮胂Ⅲ法、直接紫外法测定60例健康体检者和94例CRF患者血iPTH、Cr、Ca、P含量;取iPTH含量87.5～295ng/L的SHPT病人随机分为观察组和治疗组各23例,治疗组每天口服罗钙全0.25ug。结果血iPTH水平随肾功能损害的加重而逐渐升高,与Cr成正相关,P亦逐渐升高,Ca则逐渐降低;治疗组服药3个月后,血iPTH显著降低(P<0.05),Ca明显升高(P<0.05),P无显著性差异(P>0.05),观察组血iPTH显著升高(P<0.05)。结论iPTH可作为早期诊断CRF继发性甲旁亢的敏感指标且其水平与肾功能损害程度一致;口服小剂量罗钙全治疗早期SHPT的疗效与iPTH水平有关。     

Quantitative Detection of Interleukin 8 Gene Expression in Lung Cancer by Real-time Polymerase Chain Reaction

Objective To develop a method for absolute quantification of interleukin 8 (IL—8) mRNA by using real-time polymerase chain reaction (PCR). Methods The IL —8 mRNA and protein expression in 2 human lung cancer cell lines, H460 and A549, were evaluated by real-time PCR and ELISA. The IL-8 mRNA expression in 9 cases of normal lung tissue and 44 cases of non-small cell lung cancer (NSCLC) were examined. Results The IL—8 mRNA copy number in a given sample can be measured by real-time PCR. The gene expression of IL—8 is correlated with its protein secretion. The normalized value of IL—8 expression was 4.87±1.69 (copies/ 10⁴ GAPDH copies) in normal lung tissue and 17.04 ±23.96 in NSCLC, respectively. The difference between these two groups is statistically significant (P=0.002). Using 9.74 and 19.48 as cut-off points for positive expression and overexpression of IL—8, 52.3%(23/44cases) of NSCLC were found to express an increased level of IL-8, among which 29.5% (13/ 44cases) were defined as positive expression and 22.7%(10/44cases) as overexpression. Statistical analysis indicated that IL—8 overexpression was significantly increased in female cancers, squamous carcinoma, and in late stages of disease (P<0.05). Conclusion The IL—8 gene expression can be determined by a real-time PCR technique. IL -8 overexpression is correlated with gender, histopathology and stages of the disease.     

喉癌人乳头瘤病毒感染和p53蛋白表达的研究

对４４例喉鳞癌和１６例声带息肉患者采用原位核酸杂交技术探测其人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６Ｂ，１１，１６，１８型ＤＮＡ同源序列及ＬＳＡＢ免疫组化法探测其Ｐ５３蛋白的表达，结果：（１）喉癌与ＨＰＶ１６／１８杂交阳性率为４３．２％（１９／４４），声带息肉为１２．５％（２／１６）（Ｐ〈０．０５）（２）喉癌ｐ５３蛋白阳性率为５６．８％（２５／４４），声带息肉全部为阴性；（３）喉癌ＨＰＶ１６／１８杂交及ｐ５３蛋白     

应用声反射鼻测量计对鼻腔最小横截面积及其位置的测定

为了确定不同年龄组鼻腔最小横截面积及其距前鼻孔的距离，应用声反射鼻测量计对１３５５名健康儿童，少年及成人（３￣８６岁）进行检测，并对儿童、少年的ＭＣＡ、ＤＣＡ值与年龄相关性进行初步探讨。     

喉癌、下咽癌颈廓清组织中转移淋巴结的分布研究

对54侧经临床检查或／和CT扫描确诊为有淋巴结转移而行预廓清的标本进行病理学观察，发现：喉癌、下咽癌淋巴结转移有一定规律可循，即LevelⅡ、Ⅲ有较高的转移率，LevelⅣ、Ⅵ的发生率较低，而LevelⅠ、LevelⅤ很少发生转移。提示：喉癌、下咽癌病人的颈廓清的施术应在颈LevelⅡ～Ⅳ廓清的同时行同侧甲状腺侧叶的切除以将颈中器官周围淋巴结清扫彻底。对LevelⅠ，LevelⅤ的清扫应在临床触诊、CT检查的证实下或术中发现转移时方可进行．以减少颈廓清手术范围、手术时间和术后并发症的发生。     

新生儿败血症单个核细胞产生肿瘤坏死因子α的能力及意义

探讨新生儿败血症患儿单个核细胞产生肿瘤坏死因子α（TNFα）的能力及意义。方法用ELISA法检测TNFα，用内毒素（LPS）体外诱导单个核细胞产生TNFα检测单个核细胞产生TNFα的能力。结果新生儿败血症患儿病程＜4d者血浆中可测到TNFα，而＞4d者及健康对照者未能测到。单个核细胞产生TNFα的能力，病程＜4d者与＞4d者无差异，二者均低于健康对照。存活儿及死亡儿出院或临终前血浆TNFα均测不到，而单个核细胞产生TNFα的能力，死亡者低于存活者及健康对照，后二者无差异。结论TNFα可能仅在败血症早期起作用。起病后败血症患儿继续产生TNFα的能力将降低，且单个核细胞产生TNFα的能力与病情变化一致。对判断新生儿败血症患儿的预后有重要价值。