人骨髓间质干细胞向造血细胞分化潜能的实验研究

目的:在体研究人骨髓间质干细胞(hBMMSCs)向造血细胞分化的潜能。方法:将hBMMSCs经尾静脉注射给环磷酰胺处理的严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠,利用流式激活细胞分析系统(FACS)检测hBMMSCs输注后存活35d的SCID小鼠外周血、骨髓和脾脏中人源性造血细胞的表型和水平。结果:hBMMSCs输注组外周血(PB)、骨髓(BM)和脾脏(spleen)中可检测到人CD45⁺/H-2D^d-、CD34⁺/H-2D^d-细胞,而对照组PB、BM和脾脏均未检测到上述表型的人造血细胞。结论:hBMMSCs具有向造血细胞分化的潜能。     

Egr-1基因剔除减少炎性相关因子在实验性胰腺炎中的表达

目的：探讨Egr-1基因剔除对实验性胰腺炎小鼠胰腺组织中炎性相关因子表达的影响。 〖HTH〗方法：利用Egr-1基因剔除小鼠，采用大剂量雨蛙素诱导的实验性胰腺炎模型，观察Egr-1基因剔除后，胰腺组织水肿、MPO水平、血清淀粉酶水平、肺组织MPO水平的改变。并利用定量PCR的方法，检测胰腺组织中炎症相关因子组织因子（TF）、纤维蛋白溶酶原激活因子抑制因子（PAI-1）、单核细胞趋化吸引蛋白1（MCP-1）、Gro-1、IL-6和细胞间黏附分子-1（ICAM-1） mRNA的表达。 〖HTH〗结果：Egr-1基因剔除小鼠胰腺组织水肿明显轻于野生型，但组织MPO水平与血清淀粉酶与野生型组间相比无明显差异；肺组织MPO水平明显低于野生型。定量PCR检测结果表明， Egr-1基因剔除组，胰腺组织中TF、PAI-1，以及MCP-1、ICAM-1和IL-6　mRNA的表达，明显少于野生型组。 〖HTH〗结论：Egr-1基因剔除可明显减轻急性胰腺炎的严重程度，其作用可能通过减少胰腺组织中TF、PAI-1，以及MCP-1、ICAM-1和IL-6的表达而实现。     

Pneumocystis activates human alveolar macrophage NF-kappaB signaling through mannose receptors

Alveolar macrophages (AM) represent important effector cells in the innate immune response to the AIDS-related pathogen Pneumocystis, but the early AM host defense signaling events are poorly defined. Using AM from healthy individuals, we showed in the present study that Pneumocystis organisms stimulate AM NF-kappaB p50 and p65 nuclear translocation in a time-dependent and multiplicity-of-infection-dependent manner as determined by electrophoretic mobility shift assay and immunofluorescence microscopy and that NF-kappaB nuclear translocation is associated with I-kappaB phosphorylation. Importantly, competitive inhibition of mannose receptor and targeted short interfering RNA-mediated gene suppression of mannose receptor mRNA and protein is associated with complete elimination of NF-kappaB nuclear translocation in response to Pneumocystis. Furthermore, human immunodeficiency virus (HIV) infection of AM (as a model human disease state of reduced AM mannose receptor expression and function) inhibits Pneumocystis-mediated NF-kappaB nuclear translocation and is associated with reduced I-kappaB phosphorylation and reduced interleukin-8 (IL-8) release. In contrast, NF-kappaB nuclear translocation and IL-8 release in response to lipopolysaccharide are intact in AM from both healthy and HIV-infected individuals, indicating that the observed impairment is not a global disturbance of the NF-kappaB pathway. Thus, in addition to phagocytic and endocytic effector functions, the present study identifies mannose receptors as pattern recognition receptors capable of NF-kappaB activation in response to infectious non-self challenge. AM mannose receptor-mediated NF-kappaB activation may represent an important mechanism of the host cell response to Pneumocystis, and altered NF-kappaB activation in the context of HIV infection may impair a critical innate immune signaling response and may contribute to pathogenesis of opportunistic lung infections.     

炎症因子对肾小球系膜细胞分泌IL—8的影响

目的：观察炎症因子ＩＬ－１及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对人肾小球系膜细胞（ＨＭＣ）分泌ＩＬ－８的影响。方法：体外细胞培养技术及ＥＬＩＳＡ夹心法。结果：ＩＬ－１、ＴＮＦ均可诱导ＨＭＣ分泌ＩＬ－８，并呈剂量依赖性。结论：在一些炎症因子刺激下，ＨＭＣ可能通过分泌趋化因子ＩＬ－８参与肾脏炎症反应的启动和维持     

重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂预防治疗恒河猴感染SARS-CoV的试验研究

目的评价重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂对恒河猴感染SARS-CoV的预防治疗作用。方法采用鼻腔喷雾法(剂量为60万单位/鼻孔)研究了重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂对感染SARS-CoV的恒河猴预防治疗效果。结果试验组(5只)和对照组(5只)相同时间检测的咽拭子等标本中,Real-time PCR检测和病毒分离均未检出病毒。攻毒后病毒导致机体产生的中和抗体和IgG抗体的反应也较对照组弱。血液学指标检测结果表明试验组动物攻毒后各项指标较试验前比较没有显著性改变;病理结果显示试验组2只恒河猴肺组织形态基本正常,其余3只猴有肺间质性炎,表现肺间隔增厚、单核样细胞为主的炎细胞浸润,其中1只增厚的肺间隔有局灶相互融合,这3只猴肺部病变与对照组的病变表现相似,且病变累及范围较对照组小;其他各受检脏器均未见明显异常。结论重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂可以有效阻断或减弱SARS-CoV对恒河猴的感染。     

严重会阴部挫裂伤治疗方案探讨

目的探讨会阴部严重挫裂伤治疗的合理方案，提高治疗质量。方法通过回顾我院收治的18例会阴部严重挫裂伤病例的治疗过程，总结与分析了这类损伤不宜Ⅰ期修复的原因和结肠造瘘术在治疗中的作用。结果本组18例会阴部严重挫裂伤，均在早期清创缝合修复，后因感染，同时并发不同程度、不同范围的皮肤坏死而造成缺损和伤口裂开。均需再次清创、皮瓣转移和植皮予以修复。在此过程中，采用结肠造瘘术来控制创面感染和预防创面继发感染，收到了良好效果。结论严重会阴部挫裂伤创面的早期治疗，特别是污染重、挫伤重、损伤范围大的，均不宜Ⅰ期修复。早期行结肠造瘘术对预防和控制会阴部创面感染能起到重要的作用。     

起搏负荷超声与常规多普勒超声心动图对冠心病检出率的比较

目的　通过食道心房起搏负荷试验 ,使用彩色多普勒超声心动图对左心室室壁运动状态及左心室舒缩功能改变进行评价 ,以提高冠心病诊断的检出率 ;方法　使用心脏程序刺激仪经食道起搏导管调整心率达次极量 ;同时使用彩色多普勒超声心动仪进行左心室室壁运动记分并记录二尖瓣口及主动脉瓣环部血流频谱 ;结果　经食道心房起搏增加心脏负荷 ,应用左心室每搏量 (SV)、主动脉瓣环部流速积分 (VTIAO)、等容舒张时间 (IVRT)、二尖瓣口流速积分(VTIMV) )、快速充盈分数 (RFI)及室壁运动记分指数 (WMSI)作为指标在冠心病诊断中可提高检出率 ,以WMSI结合其它两项左心室舒缩功能阳性指标 ,其冠心病诊断的检出率为 95 % ,假阳性率为 3% ;结论　经食道心房起搏彩色多普勒负荷超声心动图 (TPDE)在冠心病诊断中有较高的应用价值 ,因其简便、实用和安全 ,宜在临床广泛推广使用     

再生柞蚕丝素蛋白对人骨髓间充质干细胞体外扩增的支持作用

大量的研究表明家蚕丝素蛋白具有良好的生物相容性。而对于柞蚕丝素蛋白在医用生物领域的研究报道在国内外尚较少。本研究选择再生柞蚕丝素蛋白为研究对象，观察了人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）在再生柞蚕丝素膜上的粘附、生长及表面抗原的变化。结果在1h观察再生柞蚕丝素对hBMSCs的粘附力几乎与胶原相同，明显优于家蚕丝素和聚苯乙烯培养板。MTT法检测结果显示在第4d hBMSCs在再生柞蚕丝素膜上的增殖明显高于其他各组。电镜观察结果显示hBMSCs在再生柞蚕丝素膜上能够很好的粘附、生长，细胞间能相互连接形成片状结构。流式细胞仪检测再生柞蚕丝素蛋白对hBMSCs表面抗原的表达亦无明显影响。本研究结果显示再生柞蚕丝素蛋白体外支持hBMSCs的粘附、生长，具有良好的细胞相容性。     

流式细胞术检测细胞毒方法的建立

目的：建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法：用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞，再用碘化丙碇(PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为100：1—6．25：1，共孵育时间为1-6小时，流式细胞仪收集1000个靶细胞并测定被杀细胞的百分率。结果：CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料，18小时后也能很好地区分效靶细胞；靶细胞的自然死亡率低于5％；杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为50：1—25：1，共孵育时间为2—4小时。结论：CFSE／PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点：避免放射性试剂的应用，敏感性增强，单细胞水平的分析。     

Analysis of functional epitopes on the dengue 2 envelope (E) protein using monoclonal IgM antibodies

Summary Forty-two hybridomas secreting IgM antibody against dengue virus were derived from spleen cells of dengue 2 infected mice. Antibody from 27 of these recognised the E protein of this virus. Of the 22 antibodies which neutralised dengue 2, only two cross-reacted with other flaviviruses. These 22 antibodies recognised three discrete domains on dengue virions. Competitive binding studies with IgG monoclonal antibodies suggested that two of the three domains were recognised by both IgG and IgM antibodies and that there were two additional domains which may be recognised exclusively by either IgG or IgM antibodies. IgM antibodies reacting with domains recognised by IgG antibodies that enhanced infection of susceptible cells by dengue 2, had no enhancing properties. None of the IgM antibodies activated the serum complement system after reacting with dengue 2 virions.