缓释bFGF-PLGA微球制备及其体外释药性质和生活活性的研究

 目的 制备bFGF-PLGA微球，考察其一般性质、体外释药特性和微球中bFGF生物活性保存情况。方法 应用复乳干燥法制备缓释bFGF-PLGA微球(bFGF-PLGA-Ms)，并考察其一般性质。采用ELISA法建立用于bFGF含量测定的标准方法和回归方程，模拟体内条件研究微球体外释药特性。将bFGF-PLGA-Ms加入成纤维细胞培养液中，MTT法观察细胞增殖情况。结果 微球表面光滑圆整，球体均匀度好，平均粒径为(1.552±0.015)μm，冻干粉剂为白色粉末状，再分散性良好，临界相对湿度为64%，CH₂Cl₂残留量低于限量的1/10，微球包封率和载药量分别为(66.43±1.24)%和［(27.18±0.51)×10^-3］%。微球体外释药规律符合Higuichi方程：Q=25.884 6t_1/2-15.705 1(r=0.997 5)，突释期内释放度仅为19.26%，11 d后其释放度达到72.47%。培养初期，bFGF组A值高于其余两组；培养中后期，PLGA微球组A值高于其余两组，差异均有显著性意义（q检验，P<0.05）。结论 bFGF-PLGA微球及其冻干粉剂制备工艺良好；微球中bFGF生物活性保存良好，体外具有明显缓释作用。     

前列回春对实验性大鼠前列腺组织显微结构和超微结构的影响

目的 :探讨前列回春对实验性大鼠前列腺组织显微结构和超微结构的影响。方法 :采用大鼠去势后注射丙酸睾酮引起前列腺增生法造模 ,灌胃给药 30d后 ,处死大鼠取前列腺组织用光镜和电镜观察 ,并在光镜下测量各实验组前列腺腺体管腔直径和上皮细胞高度。结果 :模型组腺上皮增生呈复层及假复层凸向管腔 ,使管腔缩小 ,管壁增厚 ,电镜下上皮细胞呈高柱状 ,粗面内织网高度扩张 ,其他各组增生不明显 ,各组前列腺腺体管腔直径和上皮细胞高度与模型组比较均有显著性差异或非常显著性差异 (P<0.05,P<0.01)。结论 :前列回春可抑制实验性大鼠前列腺组织上皮细胞增生。     

中国枣属药用植物资源化学研究进展△

我国枣属可供药用的植物主要包括枣、酸枣及滇刺枣。枣属药用植物所含资源化学成分类型较为复杂,主要包括三萜类、黄酮类、生物碱类、核苷类及神经酰胺类等。各类成分在不同植物及同种植物不同组织器官的组成及含量存在差异。不同栽培品种及产地样品的资源化学成分含量差异显著。不同成熟期样品的资源化学成分含量变化具有一定的规律性。     

仙茅水提取物灌胃给予大鼠后入血成分研究

目的:测定并确认仙茅水提取物的入血成分。方法:大鼠灌胃给予仙茅水提取物,以HPLC测定不同血浆样品的色谱图,确认入血成分的色谱峰,以HPLC-MS-MS和NMR确定入血成分的结构。结果:苔黑酚葡萄糖苷和仙茅苷是仙茅水提取物的主要成分,含量分别为4.26%和0.96%。其中,苔黑酚葡萄糖苷以原型吸收入血,而仙茅苷等其他成分在本实验色谱条件下未从血中检测到。仙茅苷原型没有入血的原因可能是其在胃中很快被降解为其他成分。结论:仙茅的入血成分为苔黑酚葡萄糖苷,为仙茅的药效物质基础研究以及进一步的体内代谢研究提供参考。     

不同树龄银杏叶在不同季节中总黄酮和总内酯的含量变化

目的：确定银杏叶最适宜采收季节。方法：采用HPLC法（二级管阵列检测器DAD和蒸发光散射检测器ELSD）分别测定银杏叶中总黄酮和总内酯的含量。结果：不同树龄,不同季节的银杏叶总黄酮、总内酯含量不同,结论：银杏叶的总黄酮、总内酯以二、三年生的为高,总黄酮在5月份,总内酯在9月份含量为高。     

我国水生药用动物资源调查与产业发展策略探讨

在第四次全国中药资源普查药用动物专项调研基础上,针对具有多样性的水体生态环境及种类丰富的水生药用动物资源,结合现代生物学技术与传统调查方法,开展了水生药用动物野生资源和养殖资源调查,为水生药用动物资源普查技术规范的制定和完善提供参考。针对我国水生药用动物养殖过程中存在的种质退化、饲料供应短缺、养殖环境污染等问题及形成原因进行分析,提出以野生资源保护为基础、水生药用动物研究为核心、生态化养殖为方向的产业可持续发展策略。     

半夏泻心汤含药肠吸收液对胃癌微环境中PMN-MDSCs凋亡的影响

目的 观察半夏泻心汤含药肠吸收液对胃癌微环境中多形核髓系来源抑制细胞（PMN-MDSCs）凋亡的影响。方法 制备半夏泻心汤含药肠吸收液,以Transwell小室将胃癌细胞与PMN-MDSCs非接触共培养建立胃癌微环境模型,采用细胞增殖与活性检测-8（CCK-8）法筛选0.63 g·mL^-1复溶液制备而成的0~100%半夏泻心汤含药肠吸收液的最佳干预浓度及时间,分为空白组、模型组、奥沙利铂组（10 mg·L^-1）及半夏泻心汤组（26%、18%、10%含药肠吸收液）,采用CCK-8法检测PMN-MDSCs的增殖,流式细胞术检测PMN-MDSCs的凋亡,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测PMN-MDSCs胃癌微环境凋亡相关蛋白,B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、胱天蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白表达水平。结果 作用24、48 h,与空白组比较,5%、50%、75%、100%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率均有升高（（P<0.05,P<0.01）,作用72 h,除50%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率低于48 h（P<0.01）,其余浓度各自抑制率差异无统计学意义,且48 h半数抑制浓度（IC₅₀）为18.40%,说明18%半夏泻心汤含药肠吸收液在48 h为最佳干预浓度及时间。与空白组比较,模型组PMN-MDSCs的存活率明显升高（P<0.05）,凋亡率明显下降（P<0.05）;与模型组比较,半夏泻心汤组PMN-MDSCs存活率均明显降低（P<0.05）,凋亡率明显升高（P<0.05）,以半夏泻心汤组（26%含药肠吸收液）最为明显（P<0.05）。与空白组比较,模型组PMN-MDSCs促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达明显降低（P<0.05）,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显上升（P<0.05）。与模型组比较,奥沙利铂组、半夏泻心汤组PMN-MDSCs Caspase-3蛋白表达升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达明显降低（P<0.05）,奥沙利铂组、半夏泻心汤组（10%含药肠吸收液）Bax蛋白表达升高（P<0.05）。结论 半夏泻心汤含药肠吸收液能通过调控胃癌微环境PMN-MDSCs凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3及Bcl-2的表达,诱导PMN-MDSCs凋亡。     

金鸡脚中影响糖代谢的新黄烷醇苷研究

综合运用硅胶、大孔吸附树脂、制备HPLC等柱色谱法分离纯化金鸡脚Phymatopteris hastata正丁醇部位的化学成分,从金鸡脚正丁醇提取部位中分离得到1个新化合物,采用NMR和质谱等波谱学方法鉴定新化合物的结构为(-)-表阿夫儿茶精-3,5-二-O-β-D-呋喃芹菜糖苷(1).进一步通过测定化合物对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗和骨骼肌细胞L6myc细胞葡萄糖转运子4(GLUT4)转位作用来探讨其对糖代谢的影响.抗糖尿病活性筛选结果表明,化合物1及其类似化合物-柚皮苷均能剂量依赖性提高胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量,并显著促进骨骼肌细胞L6mycGLUT4的转位作用.结果表明新化合物1和柚皮苷均具有潜在的体外抗糖尿病活性.     

清养透解合剂联合泼尼松片对SLE阴虚证患者Th1/Th2的影响

目的研究清养透解合剂联合泼尼松片对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE阴虚证患者Th1/Th2的影响,探讨其治疗SLE的主要作用环节。方法选择42例2009年8月—2011年3月广州中医药大学第一附属医院内科门诊及住院SLE患者,按随机数字表分为治疗组(22例)和对照组(20例),另选择广州中医药大学第一附属医院职工和学生体检健康者12名作为健康对照组(健康组)。两组均采用口服泼尼松片治疗,剂量根据SLE活动性指数评分及病情调整:重度活动期用40～60mg/d;中度活动期用20～40mg/d,轻度活动期用15～20mg/d;稳定期用小剂量(<15mg/d)治疗;病情稳定1～2周后严格按激素减量法渐次减量。病情复发或合并狼疮肾炎、狼疮脑炎用口服激素难以控制病情时,加用标准环磷酰胺注射液冲击疗法(0.5～1.0g/m2体表面积,每4周1次)静脉滴注。治疗组加用清养透解合剂治疗,每天1剂,分早晚2次服用。对照组加用安慰剂,每天1剂,分早晚2次口服。两组均治疗6个月。健康组不予任何治疗措施。治疗前后取静脉血采用酶联免疫法检测Th1类细胞因子(IFN-γ、IL-12)、Th2类细胞因子(IL-10、IL-4)。结果与健康组比较,治疗组和对照组治疗前血清Th1类细胞因子(IL-12、IFN-γ)、Th2类细胞因子(IL-10、IL-4)升高,Th1/Th2细胞因子比值(IFN-γ/IL-4、IL-12/IL-10)降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与本组治疗前比较,治疗组治疗后血清Th1类细胞因子(IL-12、IFN-γ)降低、Th2类细胞因子(IL-10、IL-4)降低(P<0.05),Th1/Th2细胞因子比值(IFN-γ/IL-4、IL-12/IL-10)升高(P<0.05);与对照组治疗后比较,治疗组IL-4降低,IFN-γ/IL-4升高(P<0.05)。治疗组不良反应例数少于对照组(P<0.01)。结论清养透解合剂联合泼尼松片能改善Th1/Th2细胞群失衡,能减轻激素、免疫抑制剂的毒副作用。     

桃红四物汤各分离部位对体外ADP诱导血小板聚集、凝血酶活性的影响及效应物质基础研究

评价桃红四物汤各分离部位对体外二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集及凝血酶活性的影响,探讨其效应物质基础。采用比浊法测定体外ADP诱导家兔血小板聚集率;采用改进凝血酶时间法测定抑制凝血酶活性;采用UPLC-Q-TOF-MS对各分离部位进行定性分析鉴定。桃红四物汤醇沉沉淀部位、醇沉上清液部位及20%~30%醇洗脱部位对ADP诱导的血小板聚集具有显著的抑制作用;水不溶部位、醇沉上清液部位及40%~70%醇洗脱部位具有显著的抑制凝血酶活性的作用;芳香酸类成分、苷类成分和苯酞类成分是醇沉沉淀部位、醇沉上清液部位及20%~40%醇洗脱部位的主要成分。桃红四物汤抑制ADP诱导家兔血小板聚集及抑制凝血酶活性的主要效应物质基础是芳香酸类成分、苷类成分和苯酞类成分。该实验为进一步探讨活血化瘀方桃红四物汤治疗血瘀证的物质基础及作用机制提供了科学依据。