体外扩增高纯度的人外周血来源的NK细胞的研究

本研究探讨从人外周血中分选及扩增高纯度NK细胞的优化技术。先用miniMACS及阴性免疫磁珠分选方法,从外周血单个核细胞(PBMNC)得到纯化的NK细胞,随后在干细胞培液基条件下,通过IL-2、IL-12和IL-15等细胞因子的不同组合将培养体系分为IL-2组、IL2+IL12组、IL2+IL15组、IL2+IL15+IL12组和对照组(不加任何细胞因子),分别培养15天,每3天半量换液并补充细胞因子;检测分选及扩增前后(CD3-CD56+)NK细胞含量、扩增倍数及扩增前后各组在不同效靶比下的杀伤率。结果显示经:miniMACS阴性免疫磁珠分选后(CD3-CD56+)NK细胞含量由分选前的11.19±5.25%提高到94.23±3.50%。培养15天后除对照组(CD3-CD56+)NK细胞纯度略下降外,其余4组与扩增前无显著性差异(P>0.05)。在IL-2、IL2+IL12、IL2+IL15、IL2+IL15+IL12培养体系中,NK细胞扩增倍数分别为15.43±1.08,19.87±3.87,50.46±4.31和52.35±6.72,均显著高于对照组6.14±1.0(P<0.01),但IL2+IL15与IL2+IL15+IL12组间未见显著差异(P>0.05)。各组扩增的NK细胞对K562细胞的杀伤率均较扩增前增强,在不同效靶比下IL2+IL15、IL2+IL15+IL12组对K562细胞的杀伤率显著高于其他组,但两组间无显著性差异(P>0.05)。结论:经miniMACS免疫磁珠阴性分选得少量NK细胞后,应用IL2+IL15培养条件是获得高纯度NK细胞的简单有效方法。     

绿色荧光蛋白标记的报告系统优化K562细胞转染条件的研究

本研究旨在提高基因转染人红白血病细胞株K562的转染效率，同时观察绿色荧光蛋白（GFP）作为报告系统用于转染条件优化的可行性。目的基因以GFP为报告系统，通过脂质体转染及电穿孔两种方式转染K562细胞，荧光显微镜下观察并计算转染效率。结果表明：电转染较脂质体转染K562细胞的效率高，电穿孔转染效率在10％左右，而脂质体转染效率小于1％。结论：电转染较脂质体转染K562细胞的效率高，GFP可作为报告系统优化K562细胞转染条件。     

肿瘤靶向声学造影剂的研究现状及发展构想

抗体偶联声学造影剂介导的靶向超声显像是新近发展起来的靶向诊断肿瘤的一种新方法,具有广阔的应用前景.本文综述目前肿瘤靶向声学造影剂的研究现状,并提出构建新型靶向声学造影剂的新设想.     

垂体柄中断综合征五例分析并文献复习

目的 分析垂体柄中断综合征(pituitary stalk interruption syndrome,PSIS)患者的临床特点提高对该类疾病的临床认识.方法 采用回顾性分析的方法,对我院近7年来收治的5例PSIS患者的临床表现、实验室检查和影像学特点进行分析.结果 5例PSIS患者中男性4例,女性1例.临床特征是:(1)生长发育迟缓;(2)出生时臀位分娩率高;(3)身高159～165 cm,下部量大于上部量,指间距小于身长;(4)骨龄落后3～8岁不等;(5)智力基本正常,但学习成绩逐渐下降;(6)有垂体前叶功能减退的临床表现 和实验室检查;(7)垂体后叶功能正常;(8)垂体MRI增强扫描:垂体柄未见,垂体小,后叶异位.PSIS的发病机制不详.垂体前叶激素替代治疗是唯一有效的疗方式,但要把握治疗时机.结论 PSIS发病率低临床特征不同于单纯性垂体侏儒和低促性腺激素性性腺功能减退,临床应提高认识,把握治疗时机.     

伴尿崩症的鞍区颗粒细胞瘤

少年起病、伴尿崩症的颗粒细胞瘤目前国内外尚无文献报道。本文1例患者14岁,男性,以多尿为主要表现,头颅MRI示鞍区实性占位病变,术前垂体功能基本正常,曾考虑淋巴细胞垂体炎和生殖细胞瘤,分别行甲基强的松龙冲击治疗和鞍区放疗均无效果。行经蝶肿瘤切除,病理为颗粒细胞瘤。术后患者病情平稳,因垂体功能低下行替代治疗。     

CpG DNA重组质粒对猪囊尾蚴抗原的免疫佐剂效应研究

用CpG基序寡核苷酸的重组质粒（CpG DNA）与猪囊尾蚴抗原制备疫苗免疫小鼠，检测小鼠抗囊尾蚴总抗体和IgG2a抗体亚类以及体外诱导免疫脾细胞分泌白介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）的含量，观察其免疫佐剂效应。发现CpG DNA重组质粒中无论插入CpG基序多或少都能增强小鼠抗囊尾蚴总抗体和IgG2a抗体亚类含量，都具有免疫佐剂效应，但其免疫强度有差别，其中CpG2的佐剂效应最强；此外，CpG DNA重组质粒能与铝胶、206佐剂配伍发挥免疫增强协同作用。     

女性特发性低促性腺激素性性腺功能减退症——附三例临床分析

特发性低促性腺激素性性腺功能减退症(IHH)是指病因不明的下丘脑或垂体病变引起促性腺激素释放激素(GnRH)或促性腺激素的缺乏,不能刺激靶性腺发育而导致第二性征异常.     

D3多巴胺受体对α肾上腺素能受体介导的促动脉平滑肌细胞增殖作用的影响

目的 观察D3多巴胺受体对肾上腺素α受体介导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.方法 用去甲肾上腺素(NE)刺激SD大鼠的VSMC,观察在D3受体激动剂(PD128907)存在的情况下,NE促增殖作用的变化,其中细胞增殖用3H-TdR掺入量表示.结果 NE通过肾上腺素α受体促进SD大鼠VSMC增殖,该作用呈现浓度依赖性关系.PD128907低浓度(10(-8)、10(-7) mol/L)对VSMC增殖无影响,但高浓度(10(-6)、10(-5) mol/L)却促进VSMC的增殖[PD128907 10(-6) mol/L=(4982±529)计数/min、PD128907 10(-5) mol/L=(5782±483)计数/min与对照=(3798±438)计数/min相比,P＜0.05],此作用可被α受体阻断剂酚妥拉明阻断.低浓度的PD128907(10(-7) mol/L)可通过D3受体减弱NE 10(-6) mol/L引起的VSMC增殖[NE 10(-6) mol/L=(6315±245)计数/min与NE 10(-6) mol/L PD128907 10(-7) mol/L=(4898±286)计数/min相比,P＜0.05.结论 D3受体对NE所致的VSMC增殖具有抑制作用,该作用可能在高血压的发生、发展中发挥作用.     

替罗非班对发病6～12h急性ST段抬高型心肌梗死患者急诊PCI中无再流的作用

目的:探讨血小板Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂替罗非班对发病6～12 h的急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后无再流的影响. 方法:将症状发生至急诊PCI 6～12 h的STEMI患者随机分为替罗非班组(50例)和对照组(50例).记录两组基础临床情况、PCI后无再流、心力衰竭、住院期间及术后180d主要心脏不良事件(MACE),包括死亡再梗死再次靶血管重建的发生率.结果:两组梗死相关动脉(IRA)PCI后TIMI 3级血流发生无显著差异.与对照组相比,替罗非班组PCI前IRA TIMI 3级血流、术后梗死区心肌灌注分级(TMP)3级明显增加,无再流发生率降低(P<0.05).心力衰竭减少27.4%,住院期间MACE发生率相似,但于术后180 d降低10.85%(P<0.05). 结论:急诊PCI联合替罗非班治疗发病6～12 h的STEMI患者,可进一步减少无再流发生,提高心肌灌注,并改善临床预后.     

老年烧伤患者康复期抑郁评分与血清BDNF、MIF、NPY的相关性分析

目的 研究烧伤后康复期老年患者抑郁评分与血清脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factors,BDNF)、巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)、神经肽(neuropeptide Y,NPY)的关系.方法 选取2015年2月至2016年8月我院收治的56例烧伤康复期老年患者为观察组,另选同期56例健康体检老年人为对照组.对比两组血清BDNF、MIF、NPY水平,并分析其与抑郁程度的相关性.结果 观察组血清BDNF水平显著低于对照组,而MIF、NPY水平均显著高于对照组;随着抑郁程度的逐渐加重,患者血清中BDNF水平逐渐降低,而MIF、NPY水平逐渐升高.经由相关性分析,患者抑郁评分与血清BDNF呈显著负相关(R=-0.452,P=0.004),而与MIF、NPY均呈显著正相关(R=0.563,P=0.000;R=0.587,P=0.000).结论 烧伤后康复期老年患者抑郁评分与血清BDNF呈显著负相关,与MIF、NPY呈显著正相关,上述三项血清指标可作为诊断及判断患者抑郁程度的参考指标.