抗人肝癌单克隆抗体嵌合Fab在巴氏毕赤酵母中的高效分泌表达

目的:通过分步整合,用巴氏毕赤酵母表达抗人肝癌单克隆抗体(mAb)HAb18的嵌合Fab(cFab)片段。方法:将抗人肝癌mAbcFab/HAb18基因的原核表达载体pET32a/cFab中的CL和Fd段基因,分别亚克隆到酵母表达载体pPIC9K和pPICZαA中,构建重组质粒pPIC9K/CL和pPICZαA/Fd并测序鉴定。将重组质粒pPIC9K/CL和pPICZαA/Fd分步整合到酵母菌GS115的染色体上,经G418和Zeocin筛选高拷贝的转化子及鉴定Mut表型后,用含5mL/L甲醇的培养基诱导表达。结果:成功地表达抗人肝癌mAbHAb18的cFab,表达水平为26mg/L。Westernblot鉴定证实,表达产物具有良好的与HAb18结合的活性和特异性。结论:cFab/HAb18在巴氏毕赤酵母获得表达,为对其进一步大规模的生产和临床应用奠定了基础。     

两种剂量开博通试验对原发性醛固酮增多症诊断效率评价

目的 探讨两种剂量开博通试验在原发性醛固酮增多症(原醛症)诊断中的诊断效率.方法 回顾性比较1993年1月至2006年12月解放军总医院内分泌科59例原醛症患者、35例原发性高血压患者25 mg开博通试验和27例原醛症患者、42例原发性高血压患者50 mg开博通试验结果.采用受试者操作特征曲线(ROC)比较两种剂量开博通试验的曲线下面积和灵敏度、特异度.结果 以服用开博通后血浆醛固酮405 pmol/L为切点,25 mg开博通试验的灵敏度为83.1%,特异度为88.6%;以437 pmol/L为切点,50 mg开博通试验的灵敏度为88.9%,特异度为83.3%.两种试验的ROC曲线下面积分别为0.879和0.912,大于完全无诊断价值的机会线下面积0.5(P均<0.01),但两者的ROC曲线下面积比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 两种剂量开博通试验对于原醛症均有较好的诊断效率,两者之间诊断的准确度相似.     

便携式近红外光谱仪用于东阿阿胶鉴定及特征波长筛选研究

目的 采用便携式近红外(near infrared,NIR)光谱仪建立东阿阿胶鉴别分析模型,并优选出特征波段。方法 采用BWS903型NIR光谱仪和microPHAZIR^TMRX型NIR光谱仪2款便携式光谱仪采集了47份阿胶样品的光谱,并采用软独立建模聚类分析(soft independent modeling class analog,SIMCA)和偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)等化学计量学算法,建立了东阿阿胶的判别分析模型。结果 所建立模型能够准确区分东阿阿胶和其他品牌阿胶。在此基础上,采用相关系数法优选出BWS903光谱特征波长为1300～1380 nm和1460～1540 nm;microPHAZIR^TMRX光谱特征波长为1600～1680 nm和2160～2240 nm,上述波段分别代表-NH₂和-CONHR肽键的1级倍频吸收,这些波段可作为东阿阿胶的特征波段,并可据此设计专用型、小型化的NIR光谱仪,用于东阿阿胶的品牌...     

大蒜素对子宫内膜异位症大鼠异位病灶及缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的:研究大蒜素对子宫内膜异位症(EMs)大鼠异位病灶的影响.方法:采用自体内膜移植的方法制备大鼠EMs模型,50只模型大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组(0.5 mg/kg,阳性对照组)和大蒜素低(5 mg/kg)、中(10 mg/kg)、高剂量(20 mg/kg)组,每组10只;另取10只大鼠设为假手术组.各组分别1次...     

腹部推拿联合艾灸治疗脾虚型功能性便秘的临床疗效

目的：分析腹部推拿联合艾灸治疗脾虚型功能性便秘的临床疗效。方法：选取郑州人民医院2021年11月至2023年1月期间收治的78例脾虚型功能性便秘患者,其中艾灸治疗的39例患者纳入对照组,在艾灸治疗基础上联合腹部推拿治疗的39例患者纳入观察组。治疗后,比较两组患者临床疗效与相关临床指标。结果：观察组患者总有效率高于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）;治疗后,观察组患者排便次数、大便性状、盆底松弛程度、阻塞感、排便不尽感积分均低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）;治疗后,观察组患者直肠肛管压差、力排时肛管残余压均低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）;治疗后,观察组患者血清胃动素（MTL）、P物质（SP）水平均高于对照组,生长抑素（SS）水平低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）。结论：腹部推拿联合艾灸治疗脾虚型功能性便秘可进一步改善患者相关临床指标。     

丹蛭降糖胶囊对早期糖尿病肾病患者SDF-1α、CysC及肾脏血管超声影响的临床观察

目的观察丹蛭降糖胶囊对早期糖尿病肾病(DKD)患者基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)、胱抑素C(CysC)及肾脏血管超声的影响。方法将90例早期DKD患者随机分为治疗组与对照组,每组45例。对照组予常规降糖、降压药,治疗组在对照组治疗措施基础上加服丹蛭降糖胶囊。两组疗程均为3个月,观察临床疗效,比较肾脏B超血流动力学指标及相关生化指标,包括空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿微量白蛋白(mAlb)、尿白蛋白/肌酐比值(ACR)、血肌酐(Scr)及SDF-1α、CysC的变化情况。结果 (1)最终完成试验者,对照组44例,治疗组43例。(2)治疗组、对照组临床总有效率分别为86.0%、59.1%;组间临床疗效比较,治疗组明显优于对照组(P0.05)。(3)组间治疗后比较,FPG、2hPG及HbA1c水平差异无统计学意义(P0.05)。(4)组间治疗后比较,mAlb、ACR及Scr水平差异有统计学意义,治疗组明显低于对照组(P0.01)。(5)组间治疗后比较,SDF-1α、CysC水平差异有统计学意义,治疗组对指标的改善明显优于对照组(P0.05)。(6)组间治疗后比较,双肾Vmax水平差异无统计学意义(P0.05),双肾RI水平差异有统计学意义(P0.05)。结论丹蛭降糖胶囊联合常规西药治疗早期糖尿病肾病的疗效满意,其可通过降低血清CysC含量,调节SDF-1α水平,对抗炎症反应,改善肾脏血流灌注,保护患者的肾功能。     

养阴生肌散急性毒性及全身过敏性实验研究

目的：对养阴生肌散进行安全性试验,为临床安全用药提供依据。方法：将养阴生肌散按1∶0.7配成混悬液,0.02 mL/g灌胃,观察小鼠的急性毒性反应;运用养阴生肌散对豚鼠进行致敏和攻击,观察豚鼠有无全身过敏反应发生。结果：养阴生肌散LD50未能测出,按照毒理学评价标准,LD50＞1000 mg/kg,属无毒性物质,本实验剂量增加到12000 mg/kg仍未出现毒性反应,表明养阴生肌散对小鼠安全无毒;对豚鼠全身过敏反应呈弱阳性。结论：养阴生肌散急性毒性及全身过敏性安全指标基本符合规定要求。     

茯苓的脂溶性化学成分研究

目的：对茯苓的脂溶性化学成分进行研究,寻找具有重要生物活性及药用前景的天然产物。方法：将茯苓干燥粉末进行水蒸气回流提取,浓缩,依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。将石油醚及乙酸乙酯萃取物经正相和反相硅胶柱、制备型HPLC等色谱方法进行分离纯化,并根据其理化性质和谱学数据进行结构解析及确定。结果：从茯苓的石油醚及乙酸乙酯萃取物中分离得到5个化合物,分别鉴定为：邻苯二甲酸二（2-乙基-己基）酯（1）、邻苯二甲酸二丁酯（2）、茯苓酸（3）、猪苓酸C（4）和去氢茯苓酸（5）。结论：经查阅文献可知,化合物1,2为首次从该植物中分离得到。     

分光光度法测定展毛地椒提取物中总黄酮含量的适应性研究

目的建立适应展毛地椒提取物中总黄酮含量的分光光度测定方法。方法以芦丁、芹菜素、木犀草素及槲皮素为对照品,比较直接测定法、盐酸-镁粉、亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠及三氯化铝显色法在200~600 nm扫描图谱,分析不同方法对展毛地椒提取物中总黄酮含量测定的适应性。结果直接测定法、盐酸-镁粉显色法中,四种对照品溶液与样品溶液均无共有吸收波长。亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法以芦丁为对照品,检测波长为502 nm。三氯化铝法以芹菜素为对照品,检测波长为340 nm。两种方法方法学考察均符合定量测定要求,可用于测定样品溶液中总黄酮。结论硝酸铝显色法测定总黄酮含量是三氯化铝显色法的4倍左右,含量显著偏高。故选用三氯化铝显色法,其干扰小,专属性好,准确性高,且简便快速,更适用于展毛地椒提物中总黄酮的含量测定。     

高效毛细管电泳法测定栀子中栀子苷的含量

目的:测定中药栀子中栀子苷的含量。方法:采用高效毛细管电泳法,电泳条件为石英毛细管柱(50μm×83cm,实际长度74cm),运行缓冲液为0.05mol.L-1Na2B4O7:0.01mol.L-1Na2HPO4=5∶1(16℃pH=9.2),分离电压为28kV,压力进样30mbar×8s,温度为25℃,检测波长为238nm。结果:栀子苷在0.5～1.75mg.mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为99.64%,RSD为1.23%。结论:高效毛细管电泳法可用于测定栀子中栀子苷的含量。