两株鼠抗人GL50单克隆抗体的制备及其生物学特性的初步研究

目的　研制鼠抗人GL5 0分子单克隆抗体并对其生物学特性进行初步研究。方法　以天然高表达人GL5 0分子的Daudi细胞为免疫原 ,人GL5 0 L92 9转基因细胞为目的单克隆抗体(McAb)的筛选细胞 ,采用B淋巴细胞杂交瘤技术 ,获得分泌特异性鼠抗人GL5 0分子McAb的杂交瘤细胞株 ;免疫荧光标记和流式细胞术分析McAb识别GL5 0的表达 ;Westernblot检测抗体对特异性细胞膜蛋白的识别 ;台盼蓝 (Trypanblue)染色细胞计数法和MTT法检测McAb对Daudi细胞体外生长的抑制作用 ;3 H TdR法检测抗体对GL5 0 L转基因细胞介导的活化T细胞体外增殖的效应。结果　成功制备 2株分泌特异性抗人GL5 0抗体的杂交瘤细胞株 12B11和 11C4 ;两者皆为IgG2a亚型 ;腹水效价皆在 1∶10 0 0以上 ;12B11、11C4特异性地识别GL5 0分子。 11C4McAb可以明显抑制Daudi细胞在体外的生长 ,并可抑制GL5 0 L转基因细胞介导的活化T淋巴细胞的体外增殖效应。结论　成功获得了 2株特异性鼠抗人GL5 0抗体 ,其中 11C4McAb具有诱导表达GL5 0分子的B淋巴瘤细胞Daudi的体外生长抑制作用 ;在T淋巴细胞体外增殖反应中发挥了重要的调节作用。     

重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂预防治疗恒河猴感染SARS-CoV的试验研究

目的评价重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂对恒河猴感染SARS-CoV的预防治疗作用。方法采用鼻腔喷雾法(剂量为60万单位/鼻孔)研究了重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂对感染SARS-CoV的恒河猴预防治疗效果。结果试验组(5只)和对照组(5只)相同时间检测的咽拭子等标本中,Real-time PCR检测和病毒分离均未检出病毒。攻毒后病毒导致机体产生的中和抗体和IgG抗体的反应也较对照组弱。血液学指标检测结果表明试验组动物攻毒后各项指标较试验前比较没有显著性改变;病理结果显示试验组2只恒河猴肺组织形态基本正常,其余3只猴有肺间质性炎,表现肺间隔增厚、单核样细胞为主的炎细胞浸润,其中1只增厚的肺间隔有局灶相互融合,这3只猴肺部病变与对照组的病变表现相似,且病变累及范围较对照组小;其他各受检脏器均未见明显异常。结论重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂可以有效阻断或减弱SARS-CoV对恒河猴的感染。     

骨髓源间充质干细胞在异基因小鼠免疫器官内的分布及其免疫功能调节作用

目的：探讨骨髓源间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells，BMSC)在异基因小鼠免疫器官内的分布及其免疫调节作用。方法：以CM-Dil荧光染料示踪BMSC的体内分布情况，并辅以PCR检测Y染色体的方法进一步鉴定；体外实验采用MTT法、ELISA和FACS等方法检测BMSC的免疫调节作用。结果：BMSC可进入并较长期(30天)存在于异基因小鼠免疫器官内；在体外，BALB／C小鼠的BMSC对由ConA诱导的BALB／C和C57BL／6(B6)和BXSB小鼠的T细胞增殖均有抑制作用；而对前两种小鼠由12S诱导的B细胞增殖和分泌k方面表现为促进作用，对BXSB小鼠由IPS诱导的B细胞增殖和k分泌有抑制作用。BALB／C小鼠的BMSC对BALB／C和B6小鼠由ConA诱导的IL-4生成细胞的数量无明显影响，却可降低由ConA诱导的两种品系小鼠的IFN-γ生成细胞的数量；但对于BXSB小鼠却不同，BALB／C的BMSC可降低由ConA诱导的BXSB小鼠的IL-4生成细胞的数量，而提高由ConA诱导的IFN-γ生成细胞的数量。结论：异基因BMSC不但可进入受体的免疫器官，且可较长期(30天)存在；另外，BMSC对同基因正常、异基因正常和异基因自身免疫病的个体均有一定程度的免疫调节作用。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂与5-FU合用对肝癌细胞HepG2的影响

目的：探讨MS-275和5-Fu联用对HepG2细胞周期和凋亡的影响，并对其机制进行初步探讨。方法：将细胞分成对照组、MS-275组、5-FU组和联合用药组。流式细胞仪检测各组细胞凋亡和周期变化；Westernblot分析各组Bcl-2、Bax、CyclinD1、P21蛋白表达。结果：MS-275和5-Fu联用能抑制肝癌细胞生长，诱导G0—G1期阻滞，促进细胞凋亡。上述效应具有时间和剂量依赖性。二者联用可以使P21蛋白上调，Bcl-2、CyclinD1蛋白下调，Bax蛋白无明显变化。结论：5-Fu和MS-275联用能提高HepG2细胞凋亡率和周期阻滞，其机制与下调CyclinD1、Bcl-2蛋白的表达、上调P21蛋白表达有关。     

基因表达系列分析及其应用前景

基因表达系列分析(Serial analysis of gene expression，SAGE)是一种研究真核细胞表达基因信息的高通量检测技术，它能对细胞内所有表达基因进行定性与定量分析。近年来此技术广泛应用于获得表达基因谱的研究，并且可以发现新基因信息，还可发现基因的靶向定位以及对其它基因的影响，明确表达基因的功能。本文就SAGE的原理、实验方案、技术发展与演变及其应用前景进行详细介绍。     

中国东部汉族人群原发性胆汁性肝硬化与HLA-DRB1相关性分析

目的：探讨组织相容性抗原Ⅱ类HLA—DRB1等位基因与原发性肝汁性肝硬化（Primary biliary cirrhosis，PBC）患者人群的相关性。方法：采用序列特异性引物PCR（SSP．PCR）对105例确诊PBC患者，400例健康人群进行HLA-DRB1等位基因及相关亚型基因分析。结果：PBC患者组DRB1＊07的频率为37．26％，与正常人组的13．8％相比存在显著性差异（P〈0．05，比数比为2．7），所有阳性患者经亚型分析均为DRB1＊0701；其余DRB1的等位基因频率与正常对照组比较无显著性差异。DRB1＊0701阳性与阴性患者群体的疾病进程、临床指征、实验室指征等无显著性差异。绪论：中国人群PBC患者可能与DRB1＊0701易感性相关，为临床治疗提供了一定线索。     

抗幽门螺杆菌rHpaA鸡蛋黄抗体的研制

目的：采用基因工程技术表达重组幽门螺杆菌黏附素rHpaA，以此蛋白为抗原制备抗rHpaA的高特异性鸡蛋黄抗体。方法：诱导重组质粒pQE30-HpaA在大肠杆菌中大量表达rHpaA蛋白，用rHpaA免疫鸡，以水稀释法联合盐析法提取纯化IgY，采用Bradford法测定含量，SDS—PAGE电泳分析纯度，Western blot鉴定抗原特异性，ELISA测定效价和巴氏消毒后的活性。结果：IgY提纯后含量为24．6mg／ml，纯度约为90％，Western blot显示在相对分子量30000处出现单一条带，ELISA效价为1：12800，巴氏消毒后未见效价损失。结论：成功获得了高浓度、高纯度、高效价、耐巴氏消毒的特异性IgY，为进一步制备预防幽门螺杆菌感染的特异性IgY制剂奠定了基础。     

转录调控蛋白PrfA对两组新近发现的单核细胞增生李斯特菌基因的体外转录作用的研究

目的研究转录调控蛋白PrfA对两组新近发现的单核细胞增生李斯特菌基因的体外转录作用。方法利用本室近年来建立的体外转录系统,对两组基于转录基因组体内研究发现的5个可能的受PrfA不同调节的单核细胞增生李斯特菌基因进行了体外转录活性的研究。结果第一组中的hpt基因的体外转录活性受PrfA正调节,而其它4个基因既不被PrfA正调节也不被负调节。结论除hpt基因外,其它4个基因体外转录结果与体内实验不相一致,说明PrfA在体内可能通过复杂多样的非直接方式、或者还需要一些目前未知的因子来调控这些新近发现的基因的表达。     

晨练老年人的心理健康状况及相关因素分析

目的:了解无锡地区晨练老年人的幸福度和心理健康水平,并分析其相关因素.方法:以161名长期参加晨练的老年人为研究对象,111名一般社区老年人为对照,应用纽芬兰纪念大学幸福度量表(MUNSH)、SCL-90症状自评量表及老年人一般情况调查表进行调查,应用最优尺度回归法进行分析.结果:晨练老年人的幸福度优于对照组(总分36.41±7.34,33.13±6.02,t=4.13,P＜0.001),晨练组SCL-90结果也优于对照组(总分114.72±24.41/121.62±24.05,t=2.42,P＜0.05);影响其幸福度的主要因素为人际关系、对子女的满意度、对离退休的态度和居住条件.结论:老年人适度地参加一些体育锻炼有利于心身健康.     

长寿老人主观幸福感及其相关因素研究

目的:了解长寿老人主观幸福感及其影响因素。方法:采用横断面整群抽样调查方法,对732例都江堰市90岁以上老人进行费城老年中心信心量表(PGCMS)、家庭关怀度指数(APGAR)、中文版简易智能状态检查(MMSE)、日常生活能力量表(ADL)及社会支持量表(SSRS)调查。结果:PGCMS在90-108岁老人中呈负偏态分布,PGCMS总分为1-23分,M(QL-QU)为17(13-19)。各年龄组间PGCMS的差异无统计学意义,PGCMS与SSRS中的主观社会支持、客观社会支持及APGAR、MMSE、ADL中的躯体生活自理分量表的相关有统计学意义。结论:PGCMS在90-108岁老人中呈负偏态分布,分值不随年龄的增加而变化。对90—108岁长寿老人主观幸福感有影响的因子及强度依次为主观社会支持、客观社会支持、认知功能状况、家庭关怀情况及日常生活中躯体生活自理能力。