基于多重串联式PCR基因碟片研发利什曼原虫检测技术

目的 本研究基于多重串联式 PCR基因碟片（MT - PCR）技术,建立我国口岸重点关注的杜氏利什曼原虫(Leishmaniasis donovani)、婴儿利什曼原虫(Leishmaniasis infantum)、热带利什曼原虫(Leishmaniasis tropica)和硕大利什曼原虫(Leishmaniasis giganteum)高通量检测方法。方法 根据利什曼原虫基因组学结果,对比分析不同利什曼原虫,针对ITS - 1、ITS - 2、P0、RACK基因设计引物,同时设计品系特异性引物,使用巢式荧光定量 PCR 检测各个基因。结果 4个基因组的扩增产物都可以形成明显的特异熔解峰,4个基因组的扩增曲线差异明显。ITS - 1、P0、ITS - 2、RACK的检测限均可达到103 copies /μl,批内和批间重复变异系数都小于5%。针对4种利什曼原虫检测的灵敏度均为100%,特异性为99.42%,准确性为99.55%。结论 MT - PCR能够用于利什曼原虫高通量检测工作,有益于丰富传染病检测途径,提高口岸输入性传染病检测效率。     

基于GSK-3β/CREB信号通路探讨加味肾气丸减轻糖尿病小鼠肾间质纤维化的作用机制

目的 观察加味肾气丸对糖尿病肾病小鼠肾功能及纤维化的影响,并基于糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）/环磷腺苷效应原件（CREB）信号通路探讨其可能的作用机制。方法 雄性db/db小鼠50只,db/m小鼠10只。50只db/db小鼠按体质量随机分为模型组、厄贝沙坦组、加味肾气丸低、中、高剂量组。db/m小鼠10只为正常组。加味肾气丸低、中、高剂量组中药颗粒剂混悬液灌胃,厄贝沙坦组给予厄贝沙坦混悬液灌胃,正常组及模型组予等体积蒸馏水灌胃,连续干预12周。分别记录治疗前后小鼠的血糖和尿白蛋白肌酐比（UACR）及小鼠肾脏中GSK-3β、CREB、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、钙黏蛋白E（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、纤维粘连蛋白（FN）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、Ⅳ型胶原蛋白（Col Ⅳ）蛋白的表达水平,并观测小鼠肾脏的病理损伤程度。结果 与正常组比较,模型组小鼠血糖、UACR水平及肾脏中GSK-3β、TGF-β₁、E-cadherin、Vimentin、FN、PAI-1、Col Ⅳ蛋白的表达水平明显升高（P<0.05）,CREB蛋白表达水平明显下降（P<0.05）,小鼠肾脏病理损伤严重;与模型组比较,肾气丸低、中、高剂量组和厄贝沙坦组小鼠血糖、UACR水平及肾脏中GSK-3β、TGF-β₁、E-cadherin、Vimentin、FN、PAI-1、Col Ⅳ蛋白的表达水平均有不同程度下降（P<0.05）,CREB蛋白表达水平升高（P<0.05）,小鼠肾脏病理损伤有不同程度的减轻。结论 肾气丸可有效降低血糖、改善肾功能和纤维化,其作用机制与其抑制GSK-3β/CREB信号通路有关。     

胎儿脑灰质异位合并FLNA基因突变病例报告

报告1例产前超声联合胎儿颅脑磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）诊断胎儿脑灰质异位合并细丝蛋白A（filamin A,FLNA）基因突变的病例。患者超声检测结果显示侧脑室外壁凹凸不平,颅后窝池宽,透明隔间腔略窄,小脑延髓池轻度增宽。MRI诊断结果为胎儿脑灰质异位合并大枕大池。羊水穿刺获得脱落细胞,采用全外显子测序和基因拷贝数变异（copy number variations,CNV）分析,显示与脑灰质异位疾病相关的FLNA基因外显子出现缺失,其为可能导致脑灰质异位的致病基因。因此,超声结合胎儿颅脑MRI能有效提高脑灰质异位的诊断率,其中染色体检查可筛查出部分致病原因,并对下次妊娠提供帮助。该病例可丰富临床医生对胎儿大脑灰质异位的产前超声检查、合并畸形、临床表现等的认识。     

肝硬化腹水患者的临床护理效果

目的探析优质护理应用于肝硬化腹水患者的临床效果。方法选取本院于2018年2月-2019年12月收治的50例肝硬化腹水患者,采用随机数表法分为对照组与观察组,对照组实施常规护理,观察组在此基础上实施优质护理,各25例。对比分析两组患者的肝脏储备功能(Child-Pugh)分级水平、生存质量评分。结果观察组Child-Pugh评分低于对照组;躯体疼痛、生活幸福感、角色功能、生理状态四项指标评分水平高于对照组,差异均具统计学意义(P<0.05)。结论为肝硬化腹水患者开展优质护理有助于改善肝功能,提高生存质量,促进机体康复,延长生存时间。     

耐碳青霉烯革兰阴性杆菌耐药性及耐药基因blaKPC的分子特征

目的 探讨耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌的临床耐药性及耐药基因blaKPC的分子特征。方法 分析2017年1月-2018年12月某院临床检出的耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌。通过WHONET 5.6软件对药物敏感试验数据进行统计分析,采用PCR检测碳青霉烯耐药基因blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48,对PCR阳性产物进行DNA测序,分析耐药基因的分子结构特点。结果 共收集510株耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌,其中耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）420株,耐碳青霉烯非肠杆菌科细菌90株。菌株主要来自重症监护病房（ICU）、神经外科和呼吸科,分别占60.8%、11.8%、5.3%;标本来自痰、脓性分泌物、静脉血、无菌中段尿,分别占66.9%、8.8%、8.2%、6.5%。耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌对常用抗菌药物具有较高的耐药性。PCR结果显示,420株CRE中blaKPC、blaNDM、blaIMP的阳性率分别为54.3%（228/420）、1.2%（5/420）、1.4%（6/420）,未检测出blaVIM和blaOXA-48基因,其中肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、大肠埃希菌分别占携带blaKPC CRE的83.8%、11.8%、2.6%;其他少见菌种中也检出blaKPC基因。非肠杆菌科细菌中仅有2株鲍曼不动杆菌检测出blaKPC。DNA测序结果显示,174株携带blaKPC的菌株中173株检测为blaKPC-2、1株检测为blaKPC-1。结论 该地区耐碳青霉烯类革兰阴性菌以CRE为主,其中以携带blaKPC-2的肺炎克雷伯菌占绝对优势,其他菌株中也均有发现。提示临床需重点加强耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的监测及预防,防控blaKPC的传播流行。     

肝包虫病合并HBV感染患者Th17、CD4+细胞表面PD-1/PD-L1的表达水平及意义

目的探讨肝包虫合并乙型肝炎病毒(HBV)感染患者辅助性T细胞17(Th17)、CD4⁺细胞表面程序性死亡分子-1/程序性死亡分子1配体(PD-1/PD-L1)的表达水平及其临床意义。方法选取2014年9月一2019年9月新疆医科大学第一附属医院收治的肝包虫病患者作为研究对象﹐其中100例肝包虫病合并HBV感染患者为合并HBV感染组,肝包虫病无HBV感染患者88例为非HBV感染组﹐采用流式细胞仪检测外周血Th17,CD4⁺细胞表面PD-1,PD-L1表达水平。结果合并HBV感染组患者乙型肝炎家族史,B~C Child分级占比均高于非HBV感染组(P<0.05);肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)]水平以及Th17 PD-1、Th17 PD-L1,CD,PD-1,CD4⁺PD-L1表达水平均高于非HBV感染组(P<0.05);Child分级A级肝包虫病患者的Th17 PD-1,Th17 PD-L1,CD4⁺PD-1,CD4⁺PD-L1表达水平均低于Child分级B~C级患者(P<0.05)。结论HBV感染会影响肝包虫病患者的肝功能及外周血Th17,CD4⁺细胞表面PD-1,PD-L1表达水平,肝功能严重程度可能与外周血Th17,CD4⁺细胞PD-1,PD-L1表达存在关系。     

APP转基因小鼠脑内单胺类递质的变化

用HPLC－ECD法对APP695,751V717Ⅰ转基因模型小鼠大脑皮层神经递质进行检测,结果显示APP751转基因鼠大脑皮层中的5－HIAA一与对照组比较有显著性差异。APP695转基因鼠大脑上以层中DA和5－HT平均含量分别比对照鼠升高38.9％和45.8%。提示Aβ的形成可能影响了多巴胺系统和5－羟色胺系统。     

锌对糖尿病大鼠血脂及脂质过氧化作用的影响

目的：观察锌对四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠脂质代谢及抗氧化系统的影响。方法：健康雄性Wistar大鼠32只,随机分成3组：正常对照组、糖尿病对照组、补锌组。补偿组每日以10mg/kgbw的Zn灌胃,60d以后,取血测血糖、胰岛素、血氧化指标等。结果：补锌组大鼠血糖较实验前明显降低;TC、TG水平明显低于阳性对照组;红细胞SOD、全血GSH－Px活力明显提高,MDA含量明显下降。结论：锌可以有效地缓解糖尿病大鼠的高血糖症状、纠正其血脂代谢紊乱、提高其抗氧化能力。     

Bio—Normalizer（BN）对体外鼠胚大脑神经细胞缺氧损伤保护作用的研究

目的：为研究Bio-Normalizer(BN)对大脑神经细胞缺氧损伤的保护作用,并探讨其机制。方法：本研究采用无血清体外细胞培养方法,培养鼠胚大脑神经细胞,将神经细胞造成缺氧损伤,在无血清培养液中加入不同剂量的BN,观察BN对缺氧损伤的保护作用。将细胞分为4组,Ⅰ组为缺氧BN浓度为0mg/ml组;Ⅱ组为缺氧BN浓度为0．1mg/ml组,Ⅲ组为缺氧BN浓度为0．5mg/ml组;Ⅳ组为非缺氧BN浓度为0mg/ml组。在倒置显微镜下观察细胞生长发育的情况,于细胞培养后的第4天收集细胞,测定生化指标,同时进时光镜和电镜病理检查。结果：缺氧0．1mgBN/ml组的神经细胞MTT及NSE活性均高于缺氧0mgBN/ml组,并有显著差别（P＜0．05）;形态学观察结果也显示缺氧0．1mgBN/ml组和0.5mgBN/ml组的神经细胞缺氧损伤后恢复明显好于缺氧0mgBN/ml组。结论：BN对大脑神经细胞缺氧损伤恢复具有明显的促进作用。     

前列腺素E1治疗糖尿病合并下肢闭塞性动脉硬化的疗效观察

目的：观察前列腺素E1（PGE1）对47例糖尿病合并下肢闭塞性动脉硬化的疗效。方法：选择47例糖尿病合并下肢闭塞性动脉硬化（ASO）的住院病人,在控制血糖的同时予PGE1 100ug,加入生理盐水500ml,缓慢静脉滴注,14d为一疗程,观察治疗前后患者的自觉症状,下肢血管多普勒及血流流变学的变化,结果：PGE1具有扩张血管,改善下肢血流,通微循环的作用,从而改善下肢缺血症状,并促进溃疡愈合,结论：PGE1对糖尿病合并下肢闭塞性动脉硬化具有较好疗效。