下颌骨节段性缺损修复组织工程中珊瑚支架残留率的研究

目的探讨骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cell,BMSC)复合珊瑚修复犬下颌骨节段性缺损支架的残留率。方法体外扩增、成骨诱导培养犬BMSC,分别将第二代细胞复合珊瑚后植入犬自体右侧3cm的下颌骨节段性缺损,术后12周(n=6),32周(n=6)取材后分别通过Micro-CT检测和大体、组织学图像分析骨修复、支架残留率和生物力学修复强度。结果 Micro-CT检测和组织学图像分析均表明,BMSC-珊瑚组组织工程骨12周时支架残留率显著高于32周(P0.05),而新骨随材料降解逐步成熟;生物力学显示术后32周力学强度显著高于12周(P0.05)。结论自体成骨诱导BMSC复合珊瑚形成的组织工程骨可良好修复犬下颌骨节段性缺损,随时间延长材料逐步降解,组织工程下颌骨进一步成熟。     

甲壳胺抗肿瘤的实验研究

目的研究甲壳胺对S180荷瘤小鼠的抗瘤作用。方法取S180荷瘤小鼠40只随机分为实验组和对照组,实验组进行不同剂量(50、100、200mg/(kg·d))甲壳胺灌胃处理,对照组仅灌胃生理盐水,连续10d。灌胃结束时检测两组小白鼠的体重变化,观察甲壳胺对腹水瘤小鼠腹水生成的影响,解剖腹腔观察腹水瘤生长情况,HE染色观察瘤细胞。结果实验组小白鼠体重大于对照组小鼠体重,腹水量减少,解剖结果显示,实验组腹水瘤块小于对照组,三种剂量的抑瘤率分别是17.4%、38.8%和41.6%。通过对细胞状态的比较,实验组的瘤细胞数目减少,瘤细胞的体积小,变形、死亡细胞增多,核分裂较少见。结论甲壳胺在体内具有抗S180腹水瘤形成的作用。     

电子基因芯片DNA等温扩增技术检测大肠埃希菌O157:H7方法建立

<正>Nanogene公司研制的电子基因芯片利用电子场、热循环或化学技术等吸引带负电的DNA、RNA或其他生物分子和探针结合到芯片特定位点上进行杂交检测[1]。Nanogene电子芯片具有精确性和严谨性,对生物分子的电子吸引力大     

SLP-2基因在喉鳞状细胞癌和乳腺浸润性癌组织中的表达及其与预后的关系

目的 探讨两种恶性上皮性肿瘤组织--喉鳞状细胞癌(简称喉癌)和乳腺浸润性癌(简称乳腺癌)中stomatin like protein-2(SLP-2)基因在mRNA和蛋白水平的表达,及其与肿瘤的临床病理参数和预后的相关性.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测了46对喉癌及喉正常上皮组织中SLP-2基因的表达,Western blot方法检测了其中10对标本的SLP-2蛋白表达,同时采用免疫组织化学方法分别检测了104例喉癌组织芯片和263例乳腺癌组织芯片中SLP-2蛋白的表达水平,分析SLP-2蛋白的表达与临床病理变量之间的关系.结果 RT-PCR结果显示SLP-2基因在46例喉癌中的38例肿瘤组织中的表达升高(83%,38/46),喉正常上皮组织中表达阴性.Western blot结果显示,有7例喉癌组织中SLP-2蛋白表达显著高于对应的喉正常上皮组织.喉癌组织芯片的免疫组织化学染色结果显示,与全部20例喉正常上皮组织的阴性表达(0/20)相比,SLP-2蛋白染色在104例喉癌组织中有36例出现了过表达(34.6%,36/104;P=0.000).与喉正常上皮表达相比,喉癌组织中SLP-2基因在mRNA和蛋白水平的表达均明显升高.SLP-2蛋白过表达与喉癌患者的临床分期较晚(P<0.01)和淋巴结发生转移(P=0.003)密切相关.乳腺癌组织芯片免疫组织化学染色结果显示,与在正常乳腺组织中的阴性表达(0/10)相比,SLP-2蛋白在乳腺癌组织中呈现过表达(52.5%,138/263),差异有统计学意义(P:0.000),且该蛋白的过表达与乳腺肿物的大小(P=0.020)、淋巴结转移(P<0.01)、临床分期Ⅲ期(P<0.01)以及发生远处转移(P=0.002)密切相关.此外,还与HER2/neu蛋白的表达存在显著相关性(P:0.037),生存分析表明,SLP-2蛋白过表达乳腺癌患者总生存率显著降低.多因素分析显示淋巴结状态、HER2/neu蛋白表达和SLP-2蛋白表达可能作为独立的预后因子.结论 SLP-2蛋白的过表达可能与喉癌和乳腺癌的侵袭、转移过程密切相关,并可能作为独立的预后指标提示乳腺癌患者预后不良.     

miR-196a-2基因多态性与慢性丙型肝炎抗病毒治疗疗效的关系

目的 探讨miR-196a-2 SNP位点rs11614913与慢性丙型肝炎患者对长效干扰素联合利巴韦林治疗疗效的相关性.方法 选择接受聚乙二醇干扰素α-2a（Peg-IFN-α-2a）或α-2b（PegIFN-α-2b）联合利巴韦林（RBV）抗病毒治疗的慢性丙型肝炎患者共139例,其中持续病毒学应答（SVR）组82例,无病毒学应答（NVR）或复发组57例,采集静脉血并进行DNA提取,采用聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性（PCR-RFLP）方法 对miR-196a-2进行SNP分型,组间差异进行分析比较.结果 位于miR-196a-2 rs11614913位点的CT基因型与TT基因型两组间比较差异具有统计学意义[P=0.006,A值=3.5（1.402-8.737）],CC基因型与TT基因型在两组间比较差异有统计学意义[P值=0.011,A值=4.000（1.330-12.031）].T等位基因与C等位基因频率在两组间比较差异有统计学意义[P=0.008,A值=1.926（1.185-3.131）].结论 位于miR-196a-2基因区rs11614913位点的多态性与慢性丙型肝炎患者抗病毒疗效具有相关性,T等位基因或TT基因型与SVR相关,而C等位基因或CC基因型与NVR或复发相关.     

重组腺病毒介导的BCL-Xl基因过表达治疗急性肝衰竭大鼠的研究

目的 明确肝细胞凋亡与急性大鼠肝衰竭模型肝组织损伤程度的关系;明确BCL-Xl过表达对急性肝衰竭大鼠肝脏的治疗保护作用.方法 将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、处理组三组.正常对照组及模型组给予门静脉注射生理盐水,处理组予门静脉注射重组BCL-Xl腺病毒.预处理7 d后模型组及处理组予D-氨基半乳糖+脂多糖建立肝衰竭模型,观察各组大鼠的BCL-Xl蛋白的表达、ALT、AST水平、肝细胞凋亡率及死亡率.结果 BCL-Xl基因在处理组的表达高于在模型组中的表达;建立大鼠肝衰竭后6 h,处理组的血清ALT、AsT水平低于模型组(P<0.05).处理组的肝细胞凋亡率低于模型组(P<0.05).处理组的大鼠死亡率低于模型组(P<0.05).结论 在急性肝衰竭大鼠中,肝细胞的凋亡率与大鼠的死亡率呈正相关;BCL-Xl在肝组织中的过表达能减少急性肝衰竭模型大鼠的肝细胞凋亡率,降低急性肝衰竭大鼠的死亡率.     

冠心病心绞痛三种血瘀证的血浆代谢组学研究

目的研究冠心病心绞痛血瘀证（气滞血瘀证、心血瘀阻证、气虚血瘀证）患者的血浆代谢组学变化。方法对18例健康人、18例冠心病心绞痛血瘀证患者（6例气滞血瘀证、6例心血瘀阻证、6例气虚血瘀证）的血浆样本进行氢核磁共振（1HNMR）检测。通过偏最小二乘判别分析（PLS-DA）方法研究各组之间的血浆代谢产物谱差异。结果各组血浆HNMR谱的PLS-DA结果显示,与健康人相比,心绞痛血瘀证患者血浆柠檬酸、1琥珀酸、葡萄糖、乙酰糖蛋白、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、3-羟基丁酸、谷氨酸、脯氨酸、亮氨酸含量较高,高密度脂蛋白、不饱和脂肪酸、苏氨酸、组氨酸含量较低。气虚血瘀证组与其他两个血瘀证组差别较大,而气滞血瘀证与心血瘀阻证差别不明显。与其他血瘀证相比,气虚血瘀证组血浆柠檬酸、3-羟基丁酸、丙酮、氧化三甲胺含量较高,葡萄糖、N-乙酰糖蛋白、酪氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、亮氨酸含量较低。结论血浆HNMR代谢谱1差异能明显区分健康人与心绞痛血瘀证患者;不能区分心绞痛气滞血瘀证与心血瘀阻证;能在一定程度上区分气虚血瘀证与其他血瘀证。代谢组学方法对于研究冠心病心绞痛中医证候具有重要价值。     

缺血预处理对大鼠肝大部切除后肝再生基因表达谱的影响

目的应用基因芯片研究大鼠肝缺血预处理后残存肝组织再生过程中基因表达谱的动态变化。方法Sprague—dawley（SD）大鼠肝在缺血再灌注前行缺血预处理（10min缺血后10min再灌注）,再灌注期间行70％肝叶切除建立余肝再生模型．用affmetrix RAT GeneArray 1．0ST基因表达谱芯片筛选大鼠再生肝组织中差异表达基因进行功能分析及归类。结果再生肝组织有差异表达基因1103条,涉及代谢相关基因、细胞周期调控基因、炎症反应相关基因、凋亡相关基因、信号传导相关基因、细胞因子相关基因、生长因子基因等,差异表达基因显著性的表达趋势有7种。结论缺血预处理后肝再生的过程是多基因调控的动态变化过程,用基因芯片有助于研究肝再生的机制,为促进肝再生提供治疗的潜在靶点。     

鳃-耳综合征一家系临床表型及遗传学特征分析

目的探讨一个鳃-耳综合征家系的表型特征,进行候选致病基因的突变筛查。方法经知情同意,对调查对象进行全身检查以及听力学和颞骨CT评估,获得血样标本;整理分析家系资料并绘制系谱图;用基因组DNA提取试剂盒提取外周血DNA,进行鳃-耳-肾综合征相关基因EYA1、SIX1和SIX5全编码外显子的序列分析。结果该家系共4代31人,7人具有鳃-耳-肾综合征相关症状,系谱分析符合常染色体显性遗传特征。6名患者主诉听力下降,为最常见临床表现,其它症状有耳前瘘管2人次、鳃裂瘘3人次和耳廓畸形4人次,均无肾脏畸形表现。2名患者纯音听力图示双耳混合性聋,颞骨CT检查见中耳和内耳发育异常,候选致病基因筛查均检测到EYA1 c.922C>T突变。结论该家系表型特征符合鳃-耳综合征诊断,但家系内患病个体间临床表现具有异质性。EYA1 c.922C>T突变是本家系致病的主要分子基础。     

乳腺癌中RRIG1 mRNA的表达及意义

目的探讨维甲酸受体诱导基因1(retinoic receptor-induced gene 1,RRIG1)在人乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理参数的关系。方法以GAPDH为内对照采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法(real time quantitative reverse transcrip-tion polymerase chain reaction,RQ RT-PCR)检测76例新鲜乳腺浸润性导管癌组织5、例导管原位癌组织和20例乳腺良性增生组织中RRIG1 mRNA的表达水平,并分析其与患者临床病理参数的关系。结果乳腺导管原位癌、浸润性导管癌组织中RRIG1 mRNA相对表达水平(3.5±2.1、6.7±4.1)明显低于良性增生组织(10.2±6.5),差异具有统计学意义(P=0.004,P=0.036);乳腺浸润性导管癌中淋巴结转移组RRIG1 mRNA相对表达水平(5.2±3.1)明显低于无淋巴结转移组(7.48±4.5),两组之间差异具有统计学意义(P=0.023)。结论 RRIG1可能作为一种新的抑癌基因参与乳腺癌的发生、浸润和转移,对乳腺癌早期诊断和预后评估具有重要的参考价值。