逆转录病毒转染法建立耐药性大鼠CRBH-7919细胞系

目的:建立高效、稳定的大鼠CRBH-7919多药耐药细胞系.方法:利用逆转录病毒转染法将带有mdr1 cDNA全序列的逆转录病毒载体pHaMDR转入到大鼠CRBH-7919细胞中,MTT法检测细胞系在不同化疗药物作用下的存活率;免疫组化检测细胞的P-糖蛋白(P-GP)表达,RT-PCR检测细胞内mdr1 mRNA的表达量,PCR检测mdr1基因转移到细胞内的基因片段.结果:转基因的细胞系对阿霉素、丝裂霉素的耐药性分别提高 9和7.9倍,免疫组化见转基因细胞系P-GP表达增加,RT-PCR示细胞内mdr1 mRNA的表达量增加,PCR表明转基因细胞内扩增出mdr1片段.结论:利用逆转录病毒转染法成功建立了大鼠CRBH-7919多药耐药细胞系,该细胞系具有耐药强度高、耐药性稳定等特点.     

枳实消痞丸配合西药对幽门螺杆菌感染小鼠胃黏膜上皮细胞Fas蛋白表达的影响

目的:观察枳实消痞丸配合西药对幽门螺杆菌(Hp)感染小鼠胃黏膜上皮细胞Fas蛋白表达的影响,探讨中西药合用提高幽门螺杆菌感染相关性胃炎疗效的作用机制.方法:采用5％ NaHCO3溶液及幽门螺杆菌国际标准菌株SS1灌喂BALB/c小鼠,建立Hp感染动物模型.对造模动物分别投以中药、西药和中西药联用,分别采用HE染色、TUNEL法和免疫组化(sABC法)观察胃黏膜损伤程度(LI)、细胞凋亡指数(AI)和Fas蛋白表达的变化.结果:3个治疗组均能抑制胃黏膜上皮细胞Fas蛋白的过高表达,模型组表达为(28.30 ±2.36)％,抑制程度中西药合用组＞西药组＞中药组[Fas表达依次为(15.50±2.39)％,(22.0±1.90)％,(25.90±2.34)％];3个治疗组对胃黏膜损伤有不同程度的改善,中西药合用组强于单用中药组、西药组[LI依次为(1.10±0.18),(1.80±0.25),(1.30±0.26)分];3个治疗组能对抗Hp所引起的细胞凋亡增加,模型组、中药组、西药组、中西药合用组AI依次为(16.60±1.74)％,(11.60±1.11)％,(8.70±0.88)％,(5.10±0.67)％,合用组抑制作用最强.结论:对细胞凋亡和胃黏膜上皮细胞Fas蛋白表达的抑制可能是枳实消痞丸合用西药三联提高幽门螺杆菌感染相关性胃炎疗效的机制之一.     

虫草复方对博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用及其机制

目的 探讨虫草复方对博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用及其机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,复方虫草高、低剂量（150、75 mg/kg）组和醋酸泼尼松（3.33 mg/kg）组,每组18只。除对照外其余各组大鼠采用气管内一次性滴注盐酸博莱霉素造模,对照组大鼠气管内一次性滴注等体积生理盐水。造模后第2天开始给药,对照组和模型组分别ig给予等体积生理盐水。各组动物于7、14、28 d随机处死6只,分别观察大鼠肺指数、肺组织羟脯氨酸（Hyp）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）活性及血清中MDA的量和SOD的活性。同时取固定部位肺组织进行病理组织学检查,并应用免疫组织化学法检测转化生长因子-β1（TGF-β1）、I型胶原、III型胶原在肺组织中的表达;观察各组大鼠动脉血气的变化。结果 虫草复方能明显降低肺纤维化大鼠肺指数和肺组织Hyp的量,并可提高血清和肺组织中SOD活性,降低血清和肺组织中MDA和肺组织TGF-β1、I型胶原、III型胶原的表达;虫草复方可使肺纤维化大鼠动脉二氧化碳分压[p(CO₂)]降低和血氧分压[p(O₂)]提高;虫草复方明显改善实验性大鼠肺纤维化程度。结论 虫草复方对大鼠肺纤维化具有一定的干预作用,其机制可能与抗脂质过氧化、抑制TGF-β1表达、减少肺泡间质胶原沉积及改善肺呼吸功能有关。     

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS的佛耳草多成分定量分析

目的 建立一种快速稳定的液质联用方法同时分析佛耳草中17种化学成分的含量,为完善佛耳草质量标准提供实验依据。方法 采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）对15批不同产地佛耳草中的17种成分进行定量分析,使用ACQUITY UPLC^? BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,以甲醇（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相梯度洗脱（0~1.0 min,8%A;1.0~4.0 min,8%~26%A;4.0~9.0 min,26%A;9.0~14.0 min,26%~34%A;14.0~14.5 min,34%~45%A;14.5~15.0 min,45%~60%A;15.0~18.0 min,60%~90%A;18.0~19.0 min,90%A;19.0~19.01 min,90%~8%A;19.01~20.0 min,8%A）,流速0.3 mL·min^-1,柱温40 ℃,进样量2 μL;运用电喷雾离子源,正、负离子模式全扫描,扫描范围m/z 100~1 000。结果 所建立的测定方法经方法学验证良好,能够用于17种成分的同时定量。15批佛耳草样品中奎宁酸、没食子酸、原儿茶酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、异槲皮苷、1,5-O-二咖啡酰奎宁酸、大波斯菊苷、紫云英苷、异绿原酸C、木犀草素、芹菜素、高车前素的质量范围依次为39.60~179.12、0.17~0.84、2.41~8.38、4.33~31.50、13.63~180.38、2.43~14.75、1.16~19.68、0.49~5.63、55.77~445.16、0.23~10.26、62.04~530.10、1.11~18.01、11.36~90.61、12.22~65.98、7.22~69.84、3.37~45.65、0.30~2.59 μg·g^-1,其中有机酸类成分在佛耳草中含量比黄酮类成分更高,以1,5-O-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、奎宁酸、绿原酸含量较高,同时,贵州产地佛耳草样品中黄酮类成分含量高于江苏产地样品,江苏产地佛耳草样品中有机酸类成分含量则高于贵州产地样品。结论 建立的检测方法可用于佛耳草中17种成分含量的快速、准确测定,明确了佛耳草主要成分的含量范围,可为佛耳草质量控制标志物的选择提供参考。     

2011年苏州工业园区娄葑镇居民健康素养状况调查

目的 了解苏州工业园区娄葑镇居民健康素养状况,为制定健康教育计划及干预策略提供依据.方法 采用整群随机抽样方法,抽取苏州工业园区娄葑镇7个社区卫生服务站为健康素养监测点,对15～69岁常住居民817人进行健康素养的问卷调查.结果 娄葑镇居民具备健康素养的比例是18.7％,具备基本知识和理念、健康生活方式与行为、基本技能3方面健康素养的比例分别是32.5％、15.9％、44.7％.文化程度高者高于文化程度低者.结论 娄葑镇居民的健康素养水平在不同年龄、文化程度人群中存在差异,娄葑镇居民健康素养综合掌握率偏低,应对不同人群有针对性地制定健康素养干预策略及健康教育措施.     

直肠癌患者围手术期护理与对策

目的对直肠癌患者围手术期的生理及心理护理,提高生活质量。方法我院2008年2月-2012年2月共收住108例直肠癌患者围手术期护理与对策。结果本组患者住院时间为15-58d,出院时精神状况良好。结论患者及家属均感到满意。     

甘草总黄酮微海绵的制备及体外释放度评价

目的:优选甘草总黄酮微海绵的制备工艺并考察其体外释放度。方法:利用类乳剂溶媒扩散法制备甘草总黄酮微海绵,以微海绵得率、包封率及分散系数为指标,通过星点设计-效应面法考察聚乙烯醇用量、药物与乙基纤维素的比例、搅拌速度对甘草总黄酮微海绵制备工艺的影响。利用紫外分光光度法测定甘草总黄酮微海绵的包封率,检测波长335 nm;建立HPLC同时测定甘草总黄酮中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A和光甘草定的含量,检测波长300 nm,流动相乙腈-甲醇-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱;利用透析法比较甘草总黄酮及甘草总黄酮微海绵中6个成分的体外释放度。结果:甘草总黄酮微海绵的最佳制备工艺为聚乙烯醇用量2.69%,药物-乙基纤维素(6∶1),搅拌速度1 100 r·min~(-1),搅拌时间4 h。8 h内甘草总黄酮中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A和光甘草定的累积释放度分别为87.47%,86.83%,76.98%,78.48%,86.58%和56.58%,24 h内甘草总黄酮微海绵中这6个成分的累积释放度分别为91.45%,89.74%,77.57%,82.64%,87.74%和67.74%。结论:利用类乳剂溶媒扩散法制备的甘草总黄酮微海绵粒径大小均匀、工艺稳定且操作简便。甘草总黄酮微海绵具有明显的缓释作用。     

利用二次谐波成像技术监测成兔耳皮肤创伤愈合和瘢痕形成过程

目的探讨基于二次谐波信号的光学成像技术监测兔耳创伤愈合及瘢痕形成过程。方法选用新西兰大耳白兔6只,在兔耳腹侧面中部建立8 mm的圆形皮肤创伤模型,定期取材,用二次谐波成像技术观察兔耳皮肤创伤愈合的动态变化过程。结果在兔耳创伤愈合过程中,兔耳腹侧创面产生增生性瘢痕,其新生胶原在二次谐波成像仪下产生二次谐波信号,于创伤早期出现纤细的胶原,随着创伤愈合的进展,胶原含量逐渐增多至瘢痕形成高峰期,后随着胶原组织的重塑,胶原部分降解,胶原含量略减少且逐渐与表皮平行排列。结论二次谐波成像技术可以定量表征创伤愈合不同阶段的形态特征,有望用于在体监测活体生物组织创伤愈合及瘢痕形成过程,这将在临床医学应用中具有重大的研究意义和广阔的应用前景。     

正常马尾神经的磁共振扩散张量成像研究

目的探讨磁共振扩散张量成像(DTI)显示马尾神经(CE)和腰骶脊神经根(LSNR),测量CE和LSNR的各向异性分数(FA)、平均扩散系数(DCavg)。方法对9例正常青年志愿者,行腰2椎体中上部至骶1椎体下缘T2WI和DTI轴面扫描,层厚3mm,无间隔。重建CE和LSNR,并在腰2至骶1诸椎间孔水平测量CE和LSNR的FA、DCavg。结果从腰2至骶1水平,CE显示良好;可分辨从CE分出的LSNR 60束(83%)。CE的FA和DCavg分别为0.359±0.068;(3.711±0.595)×10-9 mm2/s。LSNR的FA和DCavg分别为0.322±0.040;(3.753±0.647)×10-9 mm2/s。经t检验,CE和LSNR的FA相比较,P<0.001;CE和LSNR的DCavg相比较,P>0.05。结论 DTI可无创伤性显示CE和LSNR,通过测量CE和LSNR的FA、DCavg,能在水分子变化水平认识CE和LSNR。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌致下呼吸道医院感染的治疗效果分析

目的了解抗菌药物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)引起的下呼吸道医院感染的治疗效果,并比较万古霉素与替考拉宁的疗效差异。方法对64例MRSA所致医院获得性下呼吸道感染病例进行回顾性分析,并采用病例对照研究方法比较34例万古霉素治疗患者和30例替考拉宁治疗患者的疗效。结果使用万古霉素和替考拉宁治疗的共计64例患者有效率为70.3%,万古霉素组的疗程、有效率和MRSA清除率分别为11.1 d、65.6%和61.8%,替考拉宁组分别为12.1 d、76.7%和70.0%,两组比较均无统计学差异。结论万古霉素、和替考拉宁胺都可用于治疗MRSA引起的下呼吸道医院感染且治疗效果无差异。