骨髓内皮祖细胞EPCs两种分离方法及其对比研究

目的:研究免疫磁珠法和贴壁换液法分离骨髓内皮祖细胞的可行性和条件,并比较两种方法优缺点.方法:利用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取内皮祖细胞,体外观察细胞生长及形态变化,通过检测细胞血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)、Ⅷ因子相关抗原抗体表达、摄取乙酰化-低密度脂蛋白(Ac-LDL)情况和超微结构等进行鉴定.同时,流式细胞检测分离所得细胞的纯度、细胞计数测定分离所得细胞的数量及MTT法检测细胞生长增殖状况等,对两种分离方法进行对比研究.结果:用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取的细胞,体外培养后细胞呈铺路石形,透射电镜显示细胞内具有特征性的W-P小体,免疫荧光染色检测细胞相关抗原VEGFR-2, Ⅷ/vWF 呈阳性,同时细胞摄取Ac-LDL,证实为内皮祖细胞.免疫磁珠法与贴壁换液法相比,分离所得内皮祖细胞数量是后者2倍,纯度为76%,明显高于贴壁换液法的29%;同时,两者对细胞增殖生长无明显影响.结论:利用免疫磁珠法和贴壁换液法均可分离得到骨髓内皮祖细胞,它将成为新的组织工程种子细胞.免疫磁珠法分离得到细胞纯度更高、数量更大,但步骤复杂、价格昂贵;贴壁换液法得到细胞纯度和数量偏低,但方法简单、经济、实用性强.     

CpG寡脱氧核苷酸对慢性哮喘小鼠模型气道炎症的预防作用

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-oligodeoxynueleotides,CpG- ODN）能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL／6小鼠随机均分为4组,A组（慢性哮喘组）、B组（CpG-ODN干预组）和C组（GpC-ODN对照组）分别腹腔注射卵蛋白致敏,然后用卵蛋白雾化吸入激发以制作慢性哮喘模型,D组（生理盐水对照组）用生理盐水进行致敏和激发。B组在致敏同时（d1, d14）和激发阶段（每2周1次）分别给予60μg／mLCpG-ODN腹腔注射,共6次。C组将CpG替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶（GpC）作为对照。在末次激发24 h后,取血测嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）数,血清IgE、IgG1和IgG2α;收集支气管肺泡灌洗液（bronehoalveolar lavage fluid,BALF）作细胞分类计数;测定肺组织中白介素-4 （interleukin-4,IL-4）、白介素-13（interleukin-13,IL-13）和γ-干扰素的mRNA（interferon-γ,IFN-γ）表达量;以及肺组织病理学检查。结果A组外周血EOS数[（89±10）×10^4／mL]、血清IgE值[（279±53）ng／mL）、IgG1（A值2．151±0．628）、IgG2α（A值0．772±0．245）、BALF中EPS（6．3±1．3）]×10^5／mL）及百分比[（18．1±3．0）％]较D组明显增高（P〈0．01）;且肺组织中IL-4、IL-13和IFN-γ等细胞因子mRNA表达量[（分别为（5．72±3．89）×10^-2、（9．45±5．91）×10^-2和（3．23±1．69）×10^-2）]也明显高于D组（P〈0．05）。用CpG-ODN干预后（B组）,除IgG2α（A值1．186±0．414）和IFNγmRNA表达量[（18．91±9．85）×10^-2]增高外（P〈0．05）,其余指标均低于A组（P〈0．05）。C组的上述各指标与A组相比差异均无显著性（P〉0．05）。结论CpG- ODN对小剂量OVA反复激发所致的慢性气道炎症有一定的预防作用。     

甲苯二异氰酸盐对人支气管上皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的 探讨甲苯二异氰酸盐(TDI)对正常人支气管上皮细胞(HBE)血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 应用改良的Son氏等方法制备TDI-人血清白蛋白(TDI-HSA).四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的TDI-HSA和HSA对正常人支气管上皮细胞株HBE135-E6E7活力的影响;分别用浓度为10、20、30、40μg/ml的HSA和TDI-HSA处理HBE135-E6E7,以未加任何处理因素的HBE135-E6E7为对照组.用半定量RT-PCR同时扩增各组HBE135-E6E7VEGF和β-actin基因片段,从基因水平上比较各组VEGF的相对表达情况.结果 40μg/ml以下浓度的HSA和TDI-HSA不影响HBE135-E6E7活力;HBE135-E6E7组成性表达VEGF189和VEGF165;与10μg/ml HSA组以及对照组相比,10μg/ml TDI-HSA组HBE135-E6E7 VEGF189和VEGF165的表达增加,但无显著差异(P＞0.05),20、30、40μg/ml的TD1-HSA组与相应浓度的HSA组以及对照组相比,HBE135-E6E7 VEGF189和VEGF165的表达均显著增加(P＜0.05),且随着TDI-HSA浓度的增加,HBE135-E6E7 VEGF189和VEGF165的表达亦随之增加(P＜0.05).结论 TDI显著增加HBE VEGF表达,这可能是TDI诱发哮喘的发病机制之一.     

超声在遵循加速康复外科策略下监测高龄患者胃排空情况及预防反流误吸的临床研究

目的 研究分析采用超声在遵循加速康复外科（ERAS）策略下监测高龄患者胃排空情况及预防反流误吸的临床疗效。方法 选取2020年7月至12月江门市五邑中医院及开平市中医院收治的60例拟择期行上腹部手术的高龄患者作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组（30例）与试验组（30例）,对照组于术前晚22∶00后要求患者一直保持禁饮禁食,试验组于术前2 h给予患者400 ml碳水化合物口服。两组患者进入麻醉准备间后,予超声监测患者胃排空情况和评估反流误吸风险。比较两组的右侧卧位的胃容量、胃窦横截面积、胃容积体重比、反流误吸风险。结果 两组患者的胃容量、胃窦横截面积、胃容积体重比、反流误吸风险比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 高龄患者遵循ERAS策略可利用超声监测胃排空情况及预防反流误吸。     

浅谈丁基胶塞在输液产品中的应用

结合丁基胶塞在输液生产中的应用及与药物相容性的考察,提出丁基胶塞在实际应用中存在的问题。     

肚皮舞操与产褥操对产妇后期体形的影响

目的探讨产后肚皮舞操与产褥操对产妇体形及盆底肌张力恢复的效果。方法对102例志愿参与的顺产产妇,于产后第2天开始进行产褥操锻炼,每1～2天增加1节,共七节,到全部掌握。产后4周末,随机将产妇分为产褥操组和肚皮舞操组。于产后8周末、16周末随访产妇的腰围、臀围、腹部皮褶、体质量指数和盆底肌张力恢复指标。结果两组产妇8周末体形客观状态和盆底肌张力指标比较,差异无统计学意义(P>0.05),而两组产妇16周末体形客观状态和盆底肌张力恢复指标比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论产后后期肚皮舞操比产褥操能更好的恢复产妇的体形和盆底肌张力。     

硫辛酸抗神经细胞老化的蛋白质组学分析

目的研究硫辛酸在神经细胞老化过程中对细胞保护作用的蛋白质分子基础。方法采用无血清培养神经母细胞瘤细胞方法建立实验性神经细胞老化模型。设立硫辛酸（IA）作用组和对照组,运用蛋白质组学技术平台,采用双向电泳结合基质辅助激光电离-飞行时间质谱技术分析,并鉴定表达受到硫辛酸调控的蛋白。结果经蛋白质组学技术分析,发现硫辛酸能阻止19个蛋白在老化过程中表达改变,成功鉴定出其中5个蛋白,其中STMN1、TPM4、SERB和PARK7在老化过程中表达下降,DLDH在老化过程中表达上升。结论硫辛酸抗老化保护神经细胞的作用机制涉及到对STMN1、TPM4、SERB、PARK7和DLDH等蛋白的调控。     

东莨菪碱对氯胺酮依赖者焦虑障碍治疗的临床疗效观察

目的：观察东莨菪碱对氯胺酮依赖者焦虑障碍的治疗效果。方法：对30例氯胺酮依赖者焦虑障碍给予东莨菪碱治疗,采用 HAMA 量表评价出院时,出院1、3月后的治疗效果。结果：治疗后患者焦虑症状消失,情绪明显改善,对氯胺酮的渴求明显减弱或消失。结论：东莨菪碱治疗氯胺酮依赖者焦虑障碍具有一定的疗效。     

青皮总黄酮的提取工艺与测定

目的 研究青皮总黄酮的提取工艺与含量测定的方法.方法 采用正交实验筛选青皮总黄酮的最佳提取工艺,用紫外分光光度法测定总黄酮.结果 青皮总黄酮的最佳提取条件为60℃,pH4.0,加15倍的Ca(OH)2饱和溶液,浸提1 h×3.以橙皮苷为对照测定总黄酮,橙皮苷线性范围为2.640～42.240 μg · ml-1(r=0.9999).该工艺得到的青皮总黄酮含量为6.11%.结论 所建方法快速、简便,可用于青皮药材的质量控制.