Study on chondrogenic differentiation of canine mesenchymal stem cells induced by Type 2 recombinant adeno-associated viral mediated transfer of hTGF-β1

Objective To investigate the potential application of human transforming growth factor-beta-1 (hTGF-β1) gene mediated by type 2 recombinant adeno-associated virus (rAAV2) vector inducing chondrogenic differentiation of canine mesenchymal stem cells (MSCs) in vitro. Methods Canine MSCs from bone marrow were isolated and cultured in vitro by density gradient centrifngation and adherence screening methods. The morphology of MSCs was observed by inverted phase contrast microscope and Giemsa stain. Flow eytometry was used to detect surface antigens of MSCs, The third generation of MSCs were transfected by rAAV2-hTGF-β1 with or without MOI of 1 ×105 v.g./cell or 5×105 v.g./cell. The expression of hTGF-β1 was detected by Western blot after 10 days, and TGF-β1 synthesis was determined by ELISA at 3, 6 and 9 day, respectively. After 2 weeks of culturing, mRNA expressions of type Ⅱ collagen and aggrecan were determined by RT-PCR and the collagen Ⅱ protein was detected by immunocytochemistry. Results The MSCs appeared to be morphologically spindle-shaped and showed active capability of proliferation both in primary and passage generations. Flow cytometry analysis indicated that MSCs were universally positive for CD29, CD44 and CD105, but negative for CD34 and CD45. TGF-β1 expression can be observed by Western blot after 10 days in two transfection groups, MOI of 5 × 105 group and MOI of 1× 105 group. With the extension of time, the contents of hTGF-β1 increased in the two groups detected by ELISA, while there was a significant difference between them two (P < 0.01). After 2 weeks of transfection of MSCs by rAAV2-hTGF-β1, the expression of collagen Ⅱ and Aggreacan mRNAs were positive. It also showed positive of collagen Ⅱ detected by immunocytochemistry. Conclusion Canine MSCs show chondrogenesis differentiation after induction by Type 2 rAAV mediated transfer of TGF-β1 gene. The process is a potential application for cartilage tissue engineering.     

上海地区胆囊结石病的流行病学调查

目的: 研究上海地区居民胆囊结石病（以下简称胆石病）的患病情况及其相关的危险因素。方法: 2010年8月至2011年7月期间,对上海三个区部分20~79岁自然人群15 256人进行横断面调查。其中男8 617人,女6 639人。使用问卷调查、体格检查和实验室生化分析等方法收集参加者相关临床数据。胆囊疾病采用空腹B超检查确诊。采用t检验和Logistic逐步回归分析与胆石病相关的危险因素。结果: ①胆石病总体患病率为7.02%,女性（8.10%）略高于男性（6.19%）（P<0.05）。不论性别,胆石病的患病率随年龄递增（P<0.05）。②胆囊总体切除率为2.48%,女性（3.42%）是男性（1.75%）的约2倍（P<0.05）,也随年龄递增（P<0.05）。③Logistic逐步回归分析显示,女性、高龄、脂肪肝、胆石病家族史、高血压、体质量指数增加为胆石病相关的危险因素。结论: 本研究调查显示,当前上海地区人群总体胆石病患病率为7.02%,胆囊切除率为2.48%。性别、年龄、脂肪肝、胆石病家族史、高血压和体质量指数与胆石病发生密切相关。     

不同年龄健康人群正常枕颈角度的影像学测量及临床意义

目的:通过颈椎X线片测量不同年龄人群正常枕颈角度变化。方法:选取150例不同年龄组健康体检者,男女各75例,年龄20～70(44.83±13.88)岁;共分为5个不同年龄组(20～29岁;30～39岁;40～49岁;50～59岁;60～70岁),每个年龄组30例,每组男女各15例。拍摄150例不同年龄组健康体检者包括头颅在内的颈椎中立位侧位X线片,测量McGregor线(硬腭后上缘与枕骨鳞部外板最低点连线)与C_2椎体下缘切线所成的夹角(occipitocervical angle,OCA)及C_2椎体后缘连线与硬腭平行线相交所成的角(Takami's occipitocervical angle,TOCA),获得正常人群OCA及TOCA角影像学参数。将所得数据分别按男女组及不同年龄组进行统计学处理,分析OCA及TOCA角之间的相关性。结果:75例不同年龄人群男性OCA角组平均为(14.71±3.09)°,75例不同年龄人群女性OCA角平均为(14.22±4.27)°;75例不同年龄人群男性TOCA角组平均为(90.50±4.63)°,女性组TOCA角平均为(90.57±6.67)°;不同性别组间OCA及TOCA差异无统计学意义(P0.05)。将本组150例样本按照5个不同年龄组进行单因素方差分析结果显示各年龄组间OCA及TOCA差异无统计学意义(P0.05)。相关性研究发现OCA与TOCA角呈正相关(r=0.454,P0.01)。结论 :该研究提供了西南地区不同年龄组人群的枕颈角度影像学数据,为枕颈融合术确定理想的固定角度提供参考。     

从肌耻骨孔区域的膜解剖平面来改进3D塑形补片

经腹腔镜腹膜前间隙腹股沟疝修补术因其创伤小、恢复快、术后麻木疼痛少,已成为当前主流术式。然而资料统计显示腹腔镜疝修补术没有使并发症和复发得到彻底消除。通过分析腹膜前间隙肌耻骨孔区域的膜解剖平面结构,得出当前3D塑形补片可能存在的缺陷,并尝试提出改进补片设计的方案。     

人体瘦组织对骨密度的影响

目的探讨人体瘦组织对骨密度的影响。方法将160例进行DXA(Dual-energy x-ray absorptiometry双能X线骨密度吸收仪)骨密度和身体成分分析的患者作为研究对象,根据瘦组织指数将女性和男性患者平分为高瘦组织指数组和低瘦组织指数组,比较二组的股骨颈、全髋和腰椎骨密度。结果 54例高瘦组织指数组女性瘦组织指数为16.9942±1.2634 kg/m~2,54例低瘦组织指数组女性瘦组织指数为14.2981±0.7956 kg/m~2;26例高瘦组织指数组男性瘦组织指数为19.5200±1.0863 kg/m~2,26例低瘦组织指数组男性瘦组织指数为16.0654±1.4077 kg/m~2。男女高瘦组织指数组的股骨颈、全髋和腰椎骨密度均显著高于低瘦组织指数组(P0.05)。结论高瘦组织指数女性和男性患者均具有较高的股骨颈、全髋和腰椎骨密度。     

运动调控骨代谢的关键膜上受体—G蛋白偶联受体48

G蛋白偶联受体48(GPR48)作为一富含亮氨酸重复序列的膜上七次跨膜受体,其LRR结构域与R-spondin1或Norrin结合形成复合体后可作用于下游关键因子可调控骨质疏松、阿尔茨海默病、高血压等疾病发生。骨作为重要的生理学和生物力学组织,由成骨细胞(OB)和破骨细胞(OC)分别主导的骨形成和骨吸收之间的拮抗及协同调控骨组织代谢平衡。骨细胞是力学刺激敏感细胞,调节应力加载后的骨适应性反应,而运动训练对骨产生的力学刺激可翻译成结构级联性生化反应(Wnt、c AMP/PKA/Atf4、OPG/RANKL/RANK等途径稳态表达),调控骨形成和/或骨吸收。并且,GPR48通过R-spondin1可直接调控以上信号途径的激活状态。那么,GPR48能否通过下游级联信号途径从而在运动影响骨代谢中起分子介导作用呢?探究GPR48在运动影响骨代谢中的作用及其分子介导机制,希望能进一步完善运动影响骨代谢的分子机制信号网络并为骨疾病诊治提供新靶点和非药物干预方式。     

椎体骨折评估在绝经后女性骨质疏松诊断中的应用价值

目的研究利用双能X线骨密度仪扫描的脊柱影像进行椎体骨折评估在绝经后女性骨质疏松诊断中的应用价值。方法回顾499名年龄≥50岁的绝经后女性行骨密度检测同时行椎体侧位扫描,分析骨密度及椎体骨折评估(vertebral fracture assessment,VFA)的检测结果,收集研究对象的一般资料。结果对499名绝经后女性进行VFA检测结果分析:(1)椎体骨折诊断率提高了41.1%,骨质疏松诊断率提高了6.3%,严重骨质疏松诊断率提高了29.1%(P0.05);(2)当骨密度达到骨质疏松阈值时,椎体骨折率明显升高,较骨密度未达到骨质疏松阈值的椎体骨折发生率提高了29.2%(P0.05);(3)年龄增加、绝经年限延长的女性椎体骨折、骨质疏松、严重骨质疏松的患病率显著增加,骨量显著减少(P0.05);此外,体质量指数(body mass index,BMI)降低的绝经后女性骨量显著减少,骨质疏松的患病率显著增加(P0.05)。结论骨密度检测联合椎体骨折评估可以显著提高椎体骨折、骨质疏松、严重骨质疏松的诊断率;骨密度越低,年龄越大,绝经年限越长,椎体骨折的风险就越高;随年龄增长、绝经年限增加、BMI降低,骨密度减少,骨质疏松患病率增加。     

应用MRCP术前评估活体肝移植供者胆管系统

目的 评价应用MRCP术前评估活体肝移植供者胆管系统的临床意义.方法 60例活体肝移植供者(男50例,女10例,年龄19～60岁,平均32.3岁),于右半肝切取术前行MRCP检查,术中经胆囊管行胆道造影.回顾性分析这些活体肝移植供者术前MRCP和术中胆道造影结果,二者进行比较,对比术中胆道造影结果评价MRCP在活体肝移植供者胆管分型方面的准确性.结果 根据术前MRCP结果,所有60例活体肝移植供者均可以判断出肝内胆管分型情况,1型胆管40例,2型胆管12例,3型胆管5例,其他3例.术中胆道造影显示1型胆管39例,MRCP正确诊断38例,准确率为97.4%;术中胆道造影显示2型胆管12例,MRCP正确诊断出11例,准确率为91%;术中胆道造影显示其他胆管类型为9例,MRCP正确诊断出8例,准确率为89%;MPCP总体准确率为95%(57/60).结论 MRCP可以在术前较为准确地显示活体肝移植供者胆管分型,为临床制定手术方案提供依据.     

大泡性脂肪变性对活体肝移植右半肝供者早期预后的影响

目的 研究轻度大泡性脂肪变性对活体肝移植供者右半肝切除术后早期肝功能恢复及再生的影响.方法 回顾性分析2007年10月至2009年5月间本移植外科小组完成的95例活体肝移植术(living donorlivertransplantation LDLT)供者的临床资料.术中冰冻活检发现15例存在轻度大泡性脂肪变性(20%～30%5例,10%～19%10例)(A组),80例无明显脂肪变性(B组).比较两组术前基本资料及术后临床结果.结果 单因素分析发现A、B两组术前平均年龄、性别比、残肝体积比、保留肝中静脉/不保留肝中静脉比无显著差异(P=0.870,P=0.608,P=0.928,P=0.196),但A组体重指数(BMI)显著高于B组(P=0.013).t检验发现A组术后总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)峰值显著高于B组(P=0.001,P=0.039),2组术后半月的肝脏再生率无显著差异(P=0.939);Logistic多因素统计分析发现轻度大泡性脂肪变性是导致供者术后高胆红素血症的危险因素(OR=5.375,95%可信区间1.467-19.696,P=0.011).结论 轻度大泡性脂肪变性是术后高胆红素血症的独立危险因素,从供者安全性考虑,对活体肝移植供者需仔细进行术前评估.     

肝内胆管结石的完全腹腔镜下肝切除术

目的 总结肝内胆管结石完全腹腔镜下肝切除术的临床经验.方法 回顾性分析2005年7月至2009年4月间华中科技大学同济医学院附属协和医院腹腔镜外科中心因肝内胆管结石而施行了完全腹腔镜下肝切除术的72例病人临床资料.结果 病人年龄16～65岁,平均(43.8±21.7)岁.72例腹腔镜下肝叶或肝段切除术主要包括左半肝切除术34例,左外叶切除术19例,肝Ⅵ段切除术16例.手术时间125～320 min,平均(262.5±115.5)min.出血量50～400 ml,中位数150 ml.术后并发症发生率12.50%,包括胆漏6例,胃轻瘫1例,术后早期炎性肠梗阻1例,肝包膜下积液1例,均保守治疗成功.结论 微创时代治疗肝内胆管结石应以腹腔镜下肝段或肝叶切除术作为主要方式.