大鼠睾丸Leydig细胞体外增殖研究

目的:探讨通过优化细胞培养体系,实现Leydig细胞的体外增殖培养。方法:联合应用胶原酶消化、不锈钢滤网过滤及差速贴壁法获得3周龄雄性Wistar大鼠睾丸Leydig细胞,贴壁细胞以DMEM/F12培养液及优化培养体系培养,MTT法、细胞计数法检测培养细胞的增殖能力;分别对原代培养2h、4d细胞进行3β-HSD免疫化学染色及流式细胞术分析,检测细胞成分,同时检测培养细胞睾酮在hCG刺激下分泌能力变化。结果:优化培养体系能够明显促进3周龄大鼠睾丸Leydig细胞大量增殖,群体倍增时间为(2.26±0.31)d,传统培养体系培养细胞群体倍增时间为(16.32±2.14)d,两者差异有显著性(P<0.05);原代细胞经流式细胞术鉴定,3β-HSD阳性细胞所占比例分别为(54.3±7.1)%,培养4d后,增殖细胞3β-HSD阳性细胞率为(93.6±4.6)%。增殖细胞均有睾酮生成功能,在hCG刺激下睾酮分泌均明显上升(P<0.05)。结论:优化培养体系能够促进差速贴壁法获得的睾丸Leydig细胞大量增殖。     

白介素-1β介导缺血再灌注损伤后肺损伤

目的探讨大鼠肾缺血再灌注（ischemia reperfusion,IR）后血清白介素-1β（IL-1β）和肺细胞凋亡的变化。方法将48只Sprague—Dawley大鼠随机平均分为IR组（n=40）和假手术对照组（n=8）。IR组再按照缺血再灌注时间随机分为2h（IR2h组）、6h（IR6h组）、12h（IR12h组）、24h（IR24h组）和72h组（IR72h组）,每组8只大鼠。IR组用无损伤动脉夹钳夹大鼠双侧肾蒂45min制成肾缺血再灌注损伤（renal ischemia reperfusion injury,RIRI）模型。假手术对照组只暴露双肾,不钳夹肾蒂。观察缺血再灌注后2h,6h,12h,24h和72h各时间点血清白介素-1β及血清肌酐（scr）水平变化和肺组织细胞凋亡改变。结果假手术对照组血清白介素-1β、血清肌酐水平及肺组织细胞凋亡阳性细胞数均为最低。IR组缺血再灌注2h后,血清白介素-1β、血清肌酐水平及肺组织细胞凋亡阳性细胞数均逐渐升高,12h达峰值（IR12h组）。肾缺血再灌注12h,肺组织细胞病理学改变最为严重。结论肾缺血再灌注后,大鼠血清白介素-1β、血清肌酐水平升高及肺组织细胞凋亡阳性细胞数增多。     

氢醌对人骨髓单个核细胞拓扑异构酶Ⅱα表达的影响

目的 研究苯代谢物氢醌(hydroquinone,HQ)对人骨髓单个核细胞中拓扑异构酶(TOPO)Ⅱα表达的影响,探讨TOPOⅡα在HQ所致造血毒性中的作用及调控机制.方法 50μmol/LHQ处理的正常人骨髓单个核细胞为实验组,设立对照组(等体积灭菌蒸馏水培养),应用TOPOⅡ检测试剂盒检测TOPOⅡ的活力,免疫印迹法(Western blotting)检测TOPOⅡα含量的变化,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TOPOⅡα mRNA表达水平的改变,染色质免疫沉淀分析法(ChIp)检测TOPOⅡα含量的变化.结果 (1)正常人骨髓单个核细胞50 μmol/LHQ处理10 h后,TOPOⅡ的活力下降,TOPOⅡα含量以及TOPOⅡαmRNA水平分别为0.017±0.029、0.610±0.128,较对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);(2)TOPOⅡα含量降低伴随着TOPOⅡα启动子组蛋白H4乙酰化水平的明显降低(分别为1.198±0.056、0.324±0.229),差异有统计学意义(P<0.01),不伴有组蛋白H3乙酰化水平的改变,分别为1.253±0.045、1.177±0.025;(3)HQ接触不同时间TOPOⅡαmRNA水平呈动态变化,且TOPOⅡα启动子水平的变化早于mRNA水平的变化.结论 HQ可抑制造血细胞TOPOⅡα的表达.组蛋白化学修饰水平的改变在苯代谢物所致的造血毒性中发挥一定的作用.     

2008-2012年无锡市惠山区肺结核病疫情分析

目的通过分析无锡市惠山区2008--2012年度结核病疫情,了解该地区肺结核病流行特征,为制定下一步防控措施、降低肺结核病发病率提供科学依据。方法对2008--2012年无锡市惠山区肺结核病例统计监测资料进行整理并利用SPSS13．0、MicrosoftExcel软件进行流行病学、统计学分析。结果惠山区年均活动性肺结核登记率为39．07／10万,新涂阳登记率为16．19／10万。患者中男性病例975例,患病率为27．21／10万;女性425例,患病率为11．86／10万;男性肺结核患病率明显大于女性,差异有统计学意义（x2=6．401,P〈0．05）。除0—4岁组其余均有发病,其中15～24岁、25～34岁、35～44岁组病例数较多,占发病总数的57．21％。患者以农民、民工为主,共计988例,占活动性肺结核总数的70．57％。洛社、堰桥、钱桥等外来务工人员较多的地区,患者发现例数相对较多。全年各月均有发病,无明显季节性差异,11、12、1月份病例数较少。结论该区活动性结核患者以从事体力劳动的男性青壮年为主,根据结核病发病特点有针对性地采取防治措施才能更为有效的控制结核病传播流行。     

中国丙型肝炎血清流行病学研究

目的 了解中国现阶段丙型肝炎病毒(HCV)感染现状。方法利用中国疾病预防控制中心“2006年中国乙型病毒性肝炎血清流行病学调查”保留的血清,以美国Murex 3.0和Ortho 3.0抗-HCV试剂为金标准建立标准血清库,筛选中国抗-HCV检测试剂,并用Chiron HCVRIBA 3.0复核检测结果。结果 中国1～ 59岁人群抗-HCV调整流行率为0.43％(95％CI:0.33％～0.53％),男性和女性抗-HCV流行率分别为0.46％和0.40％,城市和农村人群经调整后均为0.43％。东、中和西部地区人群抗-HCV流行率分别为0.37％（95％CI:0.21％～0.53％）、0.67％(95％CI:0.40％～0.94％)和0.31％ (95％CI:0.20％ ～ 0.42％),3个地区人群抗-HCV流行率的差异无统计学意义;南方和北方地区人群抗-HCV流行率分别为0.29％(95％CI:0.21％～0.52％)和0.53％(95％CI:0.38％ ～ 0.64％)。结论经综合性防治,目前中国属丙型肝炎低流行区。     

肾上腺外嗜铬细胞瘤的诊断与治疗(附18例报告)

目的 探讨肾上腺外嗜铬细胞瘤的诊断和治疗方法。方法 回顾性分析18例肾上腺外嗜铬细胞瘤的临床资料。男13例，女5例。平均发病年龄30岁。18例均有不同程度的血压升高，头痛头晕(67％)、心悸多汗(44％)、视物不清(33％)及肉眼血尿(28％)为主要临床症状。尿儿茶酚胺(CA)和(或)3-甲氧4—羟苦杏仁酸(VMA)阳性者16例，阳性率89％。经B超、CT、MRI及膀胱镜等检查，肿瘤位于膀胱7例、腹主动脉旁5例、肾门4例、脐尿管1例、盆腔1例。结果 18例中行肿瘤切除术15例，探查术3例。病理诊断良性16例，恶性2例。5例术后3个月～10年复发。结论 尿CA和VMA测定是定性诊断和监测复发的有效方法。围手术期控制血压和扩容是保障手术安全的关键。术后应长期严密随访。     

两种颈椎前路手术治疗多节段脊髓型颈椎病的临床疗效与安全性

【摘要】 目的 比较两种不同的颈前路手术治疗多节段脊髓型颈椎病的临床疗效和安全性,为临床治疗选择手术方式提供参考。方法 选取2013年3月～2015年6月我院行颈前路手术治疗的多节段脊髓型颈椎病患者98例,手术方法包括前路长节段椎体次全切除减压、钛笼内植骨、钛板内固定术（LTTS）和椎体次全切除、椎间盘切除减压联合钛笼、cage植骨融合术（SITC）。采用LTTS的患者共50例为A组;采用SITC的患者共48例为B组。治疗结束后一年内每隔3个月复诊一次。观察指标包括手术用时、术中出血,术后伤口感染、喉上神经或喉返神经损伤,内固定松动的发生率,植骨融合率、颈椎高度与曲度变化以及神经功能分改善率等。结果 B组手术时间明显少于A组（P<005）;B组术中出血量明显少于A组（P<005）;两组患者术后均未见感染发生和喉上神经或喉返神经损伤相关的临床表现;A组内固定松动的发生率显著高于B组（P<005）;两组患者的植骨融合率差异均无统计学意义（P>005）;两组患者术前和术后椎体高度均无统计学差异（P>005）,但相较于自身治疗前均有显著改善（P<005）; 两组患者术前和术后颈椎曲度均无统计学差异（P>005）,但相较于自身治疗前均有显著改善（P<005）;两组患者的神经功能改善率差异无统计学意义（P>005）。结论 两种术式均具有较好的临床疗效,但从安全性和操作性来看, SITC更具有优势。     

虹膜识别引导的个体化LASIK与传统LASIK治疗近视散光眼术后波前像差的对比研究

目的评价虹膜识别定位下波前像差引导的个体化LASIK治疗近视性散光眼术后波前像差的变化。方法采用随机对照研究,对接受LASIK治疗近视性散光眼的患者97人采用随机表分为两组,Zyoptix组49人(98眼)采用虹膜识别定位下波前像差引导的个体化LASIK治疗,Planoscan组48人(96眼)采用传统LASIK治疗,采集术前和术后6个月患者视力,屈光度和波前像差数据,比较两种手术对术后眼波前像差的影响。结果术前两组的球镜度、柱镜度、瞳孔直径6mm区的总体波前像差均方根值(RMS)、高阶像差RMS、三阶彗差三叶草像差和四阶球差RMS差异均无统计学意义(P0.05)。术后6个月各观察值与术前比较差异有统计学意义(P0.01)。术后6个月两组间比较柱镜度,瞳孔直径6mm的总体波前像差、总体高阶像差、三叶草像差和四阶球差的RMS,Zyoptix组均小于Planoscan组差异有统计学意义(P0.05),两组球镜度、瞳孔直径6mm去四阶球差总体高阶像差和三阶彗差RMS值差异无统计学意义(P0.05)。结论虹膜识别定位下波前像差引导的个体化LASIK治疗近视性散光眼术后降低波前像差效果要优于传统LASIK手术。     

CT导向下125I粒子植入治疗肝门区肝癌

目的评价CT导向下125I粒子植入治疗肝门区肝癌及淋巴结的临床价值.方法本组病例32例,其中肝门区肝细胞癌(HCC)8例,肝门区胆管癌(HC)12例,肝转移瘤6例,肝门区淋巴结转移6例.14例侵犯肝门胆管致肝内胆管扩张,22例合并肝硬化.全部病例经CT、MRI检查或病理穿刺活检证实.病灶平均直径为4.2 cm.采用TPS计算布源,在CT导向下将125I粒子植入瘤灶内,采用0.6～0.9 mCi活度的12I粒子相隔1.0～1.5 cm平面播植.结果2例死于远处转移,3例死于肝功能衰竭,全组中位生存时间10个月.2个月后CT复查,完全缓解(CR)2例;部分缓解(PR)20例;无变化(NC)5例;进展(pD)5例.总有效率(CR+PR)68.8%.2个月随访过程中发现7颗粒子在肝脏内游走,3颗粒子迁徙至肺内;1例出现气胸,肺压缩在30%以下,白细胞轻度下降1例.未见大出血、胆汁瘘、肠瘘、肠出血等严重并发症.结论CT导向下放射性粒子植入治疗肝门区肿瘤及淋巴结创伤小,并发症发生率低,生活质量改善明显,近期效果好,是治疗中晚期肝门区肿瘤及淋巴结的简单、安全、有效的方法.     

主要组织相容性复合体Ⅱ类基因在多器官功能障碍综合征中的表达及意义

目的探讨主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类基因在多器官功能障碍综合征(MODS)中的表达及意义。方法建立二次打击猪MODS模型。18只雄性家猪随机分为实验组(M组)和正常对照组(C组)每组9只。M组给予失血性休克、再灌注损伤、内毒素血症复合因素；C组仅进行麻醉和动静脉插管。观察7 d后处死动物,取脾组织用Trizol法提取总RNA。设计SLA- DQA(猪MHCⅡ类基因)引物序列,逆转录构建cDNA,用实时荧光定量PCR(Real Time FQ-PCR)检测SLA-DQA mRNA的表达量。UVP计算机图像分析系统绘出标准曲线。结果M组动物死亡率为7/9,有8例发生MODS,发生率为8/9。C组SLA-DQA mRNA拷贝数为(1．376±1．006)×10~3．M组拷贝数为(1．376±1．006)×10~3,两组差异有统计学意义(P＜0．01)。结论MODS模型复制满意。MHCⅡ类基因在MODS中表达下降,可能与逆转录因子(CIITA)的调控和TNF-α、IL-10等多种细胞因子的释放有关。