抗纤维蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

用XL-FN颗粒、D-D、FN单体等作为免疫原获得一组小鼠单克隆抗体。除了3个与FG有交叉反应,其余均只与XL-FN和/或其片段反应。其中SZ-58、SZ-60及SZ-63与血浆凝块的结合反应不受血浆或全血影响。在免疫印迹电泳中,SZ-63主要识别D-D,而SZ-58不识别任何区带。SZ-58、SZ-60可抑制血浆凝固,并对ADP诱导的血小板聚集有程度不同的抑制作用。SZ-60可与固相化的FG结合而与溶解态的FG无结合反应。结果提示,SZ-58、SZ-60、SZ-63对XL-FN反应的特异性较高,因此可应用于体内血栓显像而SZ-63同时又可应用于D-D检测。     

等速离心肌力训练治疗膝关节骨关节炎的研究

运动Ｃｙｂｅｘ－６０００型等还肌力测试和训练系统对２０例膝关节骨关节炎患者进行 量等速离心肌力训练，观察训练对患膝肌力、疼痛及下肢功能的影响。结果表明：经过４周的训练，患膝 伸肌群各项测试指标均有不同程度提高，疼痛明显缓解，下肢功能显著改善。说明亚极量等速离心训练对膝关节骨关节炎２的近期疗效是明显的。     

三种粘结剂在唇侧间接粘结技术中的临床应用

目的 观察比较三种粘结剂对正畸托槽间接粘结效果的影响.方法 选择需要正畸治疗患者60例,共计1200个托槽.随机分为三组,SondhiTM快速间接粘结剂组(A组)20例400个托槽、TransbondTM Supreme LV粘结剂组(B组)20例400个托槽和GC Fuji ORTHO LC粘结剂组(C组)20例400个托槽.分别采用相同方法进行托槽间接粘结,并对三组的托槽脱落率进行统计分析.结果 SondhiTM快速间接粘结剂组(A组)的脱落率为3.05％,TransbondTM Supreme LV粘结剂组(B组)脱落率为2.67％,而GC Fuji ORTHO LC粘结剂组(C组)脱落率为2.33％.三者差异无统计学意义.结论 在唇侧间接粘结技术中,应用三种粘结剂粘结托槽均可取得良好的粘结效果,但GC Fuji ORTHO LC粘结剂的脱落率最低.     

血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ体外表达及功能研究

为了深入研究血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ(glycoproteinⅥ，GPⅥ)功能及筛选特异性抑制剂，利用基因重组技术体外表达GPⅥ胞外区片段。采用PCR方法扩增GPⅥ胞外区片段eDNA，构建表达载体pET-20b( )-GPⅥ，转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS，经IPTG诱导表达。表达产物经Ni—NTA Resin纯化、复性：使用Western blot方法鉴定重组蛋白性质；采用胶原结合试验测定重组蛋白的胶原结合能力。结果表明，经测序证明PCR扩增产物与GPⅥ胞外区eDNA序列完全一致；酶切分析证明成功构建了表达载体pET-20b( )-GPⅥ；原核细胞经诱导表达后出现新的相对分子量32kD蛋白条带，诱导产物以包涵体形式存在；Western blot分析表明重组蛋白可与抗Penta—His抗体和抗GPⅥ多抗特异性结合；胶原结合试验表明重组蛋白拥有较好的生物学功能。结论：正确构建了GPⅥ表达载体并成功表达重组蛋白，纯化、复性后的重组蛋白具有良好的抗原性和生物学活性。     

脐血体外同时诱导扩增T,NK和CD34+细胞

体外研究表明,人脐血含有比骨髓细胞更原始更早期的造血干细胞群。移植后所引起的GVHD发生率及程度都比骨髓及外周血要低,但其相应的GVL效应也较低,容易复发。单份脐血所含有的造血细胞量仅可以满足一定体重以下的儿童患者需求,对需移植的大部分成人患者则要进行体外扩增。脐血体外扩增后进行干细胞移植是一种新的设想和尝试,移植物中免疫细胞的组成和功能是决定干细胞移植能否成功重建造血与免疫、以及平衡GVHD和GVL的重要因素。为了研究脐血体外同时诱导扩增T、NK和CD34 细胞的可能性,本实验无菌采集健康正常足月产新生儿脐血,并分离出单个核细胞,在不同的细胞因子组合作用下用IMDM培养液培养14天。在培养0、3、7、14天时收集细胞,用FCM分析扩增前后脐血干/祖细胞及T、NK免疫细胞含量。结果表明,与无细胞因子的对照组相比,所有细胞因子SCF,IL3,IL6,IL7,IL2组合组别均能显著扩增脐血中的单个核细胞。所有细胞因子组合组别均能显著增加脐血中的CD34 细胞比例,使其含量从新鲜脐血中的1.6%升高到最高D组的11.9%。第7天时CD34 细胞平均增加10至50倍不等。新鲜脐血中CD3 T细胞平均为(18.7±4.3)%,在无细胞因子的对照组中CD3 T细胞下降明显,而在含细胞因子的组别中CD3 T有不同程度的增加,扩增最高的组别中CD3 T细胞是新鲜脐血的2倍。在新鲜脐血中含(3.6±1.9)?56 细胞。CD56 细胞数量仅在含细胞因子IL2的组别中有显著增加,其它组则无明显变化。结论:脐血中T细胞、NK细胞在一定细胞因子组合下,可与干/祖细胞同时在体外被扩增和诱导分化。     

螺旋CT对缩窄性心包炎诊断价值研究

目的 :分析缩窄性心包炎螺旋CT表现特点 ,评价螺旋CT诊断价值。方法 :对 31例手术病理证实的缩窄性心包炎患者进行螺旋CT检查 ,分析其CT表现特点并和手术发现对比。结果 :CT诊断正确率为 96 8%(30 /31)。 30例发现心包增厚 ,最大厚度为 3～ 2 4mm (6± 2 6mm) ,和术中心包厚度测量一致性较高 (P <0 0 5 )。CT显示心包钙化 17例 ,漏诊 3例。心室腔缩小、变形 15例 ,室间隔扭曲 4例。心包钙化组血流动力学异常征象出现率显著高于非钙化组 (P <0 0 5 )。结论 :螺旋CT能准确显示缩窄性心包炎的各种病理改变 ,是诊断缩窄性心包炎的可靠手段之一。     

湖南省SARS早期症状监测预警系统的建立与反应

目的对湖南省SARS早期症状监测预警系统的监测结果进行评价。方法建立监测病例和预警指标,实施SARS早期症状监测,对非典预警病例进行报告、调查、实验室检测与处理。结果2003年12月1日至2004年6月6日,监测系统共发现并报告4例SARS预警病例,经流行病学调查和实验室检测排除了SARS。结论完善的监测系统可及时发现发热呼吸道病人及发热肺炎病人,确认或排除SARS疫情,及时有效地采取公共卫生防控措施。     

应用荧光偏振技术检测HBV DNA

目的　建立一种简便、灵敏、特异的DNA检测方法。方法　用荧光偏振技术检测 10 2例乙型肝炎患者血清中的HBVDNA ,并与多聚酶链反应 酶联免疫吸附试验 (PCR ELISA)方法作比较。结果　该方法可以检测出 1× 10 1拷贝的HBVDNA模板 ,CV为 6 .4 4 % ,对 10 2例乙型肝炎患者的血清进行检测 ,HBsAg( )、HBeAg( )、抗HBc( )血清HBVDNA阳性率为 10 0 % ( 4 0 / 4 0 ) ;HBsAg( )、抗HBe( )、抗HBc( )血清HBVDNA阳性率为 81.8% ( 2 7/ 33) ;HBsAg( )、抗HBc( )血清HBVDNA阳性率为 72 .4 % ( 2 1/ 2 9) ,其余为阴性。 30例非乙型肝炎患者血清中HBVDNA的检测结果均为阴性。结论　该方法简单、灵敏、特异 ,适用于临床进行大样本核酸检测     

荧光偏振检测HBVDNA前C区nt1896位点突变

目的　建立简便的HBVDNA前C区nt1896位点突变的检测方法。方法　采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测。首先对HBVDNA前C区基因进行PCR扩增 ,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交 ,使探针的 3’端可以在DNA聚合酶的作用下 ,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的ddNTP ,然后检测该 3’端带有荧光素探针的偏振光值 ,根据检测得到的荧光素种类及其偏振光的强度可以判定待测点是何种核苷酸。结果　该方法可以检测出HBV基因序列中nt1896的核苷酸类型 ,最低可检出的突变模板量为 1× 10 1拷贝。结论　该技术可以对血清中HBVDNA前C区nt1896位点突变以及其他基因突变进行检测。     

重型再生障碍性贫血患者骨髓Ⅰ型树突细胞亚群的变化

目的　测定重型再生障碍性贫血 (SAA)患者在免疫抑制治疗前、后骨髓中Ⅰ型树突细胞(DC1)亚群 (CD11c CD1a 细胞、CD11c CD83 细胞 )的改变 ,评价CD11c CD83 细胞与Th1细胞、CD3 CD8 细胞及造血功能的相关性 ,探讨DC1在SAA发病机制中的作用。方法　以正常人为对照 ,用单克隆抗体及流式细胞仪检测发病期和恢复期SAA患者骨髓中Th1细胞、CD3 CD8 细胞、CD11c CD1a 细胞、CD11c CD83 细胞百分率及CD11c CD83 细胞 /CD11c CD1a 细胞比值的改变 ;评价CD11c CD83 细胞与Th1细胞、CD3 CD8 细胞及网织红细胞绝对值、中性粒细胞绝对值(ANC)的相关性。结果　正常人骨髓中Th1细胞、CD11c CD1a 细胞、CD11c CD83 细胞百分率及CD11c CD83 细胞 /CD1a CD11c 细胞比值分别为 (0 .4 2± 0 .30 ) %、(0 .38± 0 .2 9) %、(0 .37±0 .32 ) %、1.0 7± 0 .10 ,SAA患者发病期为 (4.87± 0 .5 4 ) %、(1.73± 0 .2 4 ) %、(3.38± 0 .5 6 ) %、2 .2 1±0 .32 ,SAA患者恢复期为 (0 .5 3± 0 .2 2 ) %、(0 .6 1± 0 .2 3) %、(0 .6 5± 0 .2 2 ) %、1.37± 0 .2 5 ;SAA患者发病期Th1细胞、CD11c CD1a 细胞、CD11c CD83 细胞百分率及CD11c CD83 细胞 /CD11c CD1a 细胞比值均显著高于正常对照