外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡诱导大鼠星形胶质细胞向神经元的转分化

背景:脊髓损伤会使星形胶质细胞增生进而形成胶质瘢痕阻碍神经轴突的形成,而局部炎症微环境进一步加重了神经元的死亡,因此,将星形胶质细胞转分化为神经元既能减轻星形胶质细胞的增生又能增加神经元的数量,可谓是一举两得.而有关外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡能否诱导星形胶质细胞转分化为神经元尚未见相关报道.目的:探索外胚层间充质...     

大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞的分裂增殖和免疫细胞化学特性

目的:体外培养大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs),观察其形态、分裂增殖和免疫细胞化学特性,探索自体嗅黏膜嗅鞘细胞作为OECs来源的可能性。方法:采用差时贴壁的方法分离培养成年大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞,相差显微镜下观察细胞形态和分裂增殖;用免疫组化方法观察GFAP、NGFRp75、S鄄100、NGF、BDNF、NT鄄3的表达。结果:培养的细胞根据形态来分,可分为双极、多极和偏平状;细胞分裂时先回缩成球形,分裂成两个子球,再伸出突起,变成梭形或多极形。GFAP、NGFRp75、S鄄100、BDNF和NT鄄3表达阳性。结论:在含血清培养基上,大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞能正常分裂增殖和分泌神经营养因子。     

针药并用治疗功能性子宫出血临床观察

功能性子宫出血 (简称功血 )属祖国医学“崩漏”范畴 ,是妇科常见疑难病症。我站从1 995年 3月～ 2 0 0 1年 1 2月 ,遵循辨证论治的治疗原则 ,利用针药并治功血症 1 66例 ,效果较为满意 ,现报告如下 :1　资料与方法1 1　资料 :1 1 1　资料分析 :本组 1 66例均属门诊服务对象 ,随机分为两组 ,针药并用为治疗组 ,西药治疗为对照组 ,各 83例。两组病例中年龄最小的为 1 5岁 ,最大的为 45岁 ,多数年龄在 2 5～ 3 5岁之间 ,已婚 98例 ,未婚 68例 ,病程最短 7天 ,最长 60天 ,经妇科 ,Ｂ超及阴道细胞学检查 ,排除妊娠、肿瘤、炎症、上环及全身出…     

用连锁分析方法确定疾病基因易位

我们通过协作得到一个Y连锁遗传视网膜色素变性(RP)家系[1],根据我们对该家系系谱及视网膜变性有关研究[2]分析,Y染色体上的该显性致病基因可能是X染色体上RP15基因易位所致,因此,我们在X染色体上选取了与RP15紧密连锁的两个微卫星DXS989和DXS7161作为RP15的标记[3]来检测...     

长效黏膜黏附型微胶囊的构建及在幽门螺杆菌感染小鼠中的应用

目的: 制备一种能长效黏膜滞留且有CT示踪成像功能的微胶囊,用于治疗幽门螺杆菌感染。方法: 首先利用N (3 二甲基氨基丙基) N′ 乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）催化的酰胺反应,制备具有黏膜黏附功能的儿茶酚化壳聚糖。然后通过静电喷雾和聚电解质自组装方法,原位合成具有硫酸钡沉淀的儿茶酚化微胶囊（Cat C/A@BS MCs）。对幽门螺杆菌感染小鼠连续灌胃载阿莫西林微胶囊10 d,评价其体重变化及快速尿素酶试验强度。结果： 成功制备了形态均一、粒径约500 μm的Cat C/A@BS MCs。Cat C/A@BS MCs具有良好的CT成像能力,可在小鼠消化道内滞留长达48 h。小鼠体内实验结果证实,Cat C/A@BS MCs可有效提高阿莫西林对幽门螺杆菌感染的清除率。结论： 成功构建黏膜黏附与CT成像双功能微胶囊,制备的微胶囊能显著提升阿莫西林对幽门螺杆菌感染的清除。     

咪康唑与纤维蛋白协同促进神经球分化为成髓鞘样细胞

目的:探讨咪康唑与纤维蛋白能否协同促进神经球分化为成髓鞘样细胞。方法:培养并鉴定胎鼠神经球;通过MTT法确定不同浓度咪康唑对神经球存活的影响;将神经球按培养条件不同分为四组,对照组、咪康唑组(mico组)、纤维蛋白组(fibrin组)及纤维蛋白-咪康唑联用组(fibrin+mico组),培养两周后以免疫荧光染色比较髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达;Western Blot法比较MBP、2’3’环核苷酸磷酸二酯酶(CNPase)、整合素、细胞外调节蛋白激酶及其磷酸化(ERK、p-ERK)的表达。结果:(1)神经球阳性表达巢蛋白(nestin)和CD133:当咪康唑浓度低于或等于1.5μmol/L时,神经球存活在各组之间不存在统计学差异(P0.05),但2.5μmol/L组显著低于2μmol/L组和1.5μmol/L组(P0.05)。(2)免疫荧光结果显示:神经球分化所成的成髓鞘样细胞表达MBP阳性,呈多突起形态;fibrin组及mico组MBP相对荧光强度均高于对照组(P0.05),fibrin+mico组神经球分化为网络状的成髓鞘样细胞团,其相对荧光强度高于其他组(P0.05)。(3)Western Blot结果显示:fibrin+mico组MBP及CNPase表达显著高于mico组和fibrin组(P0.05),fibrin+mico组整合素表达及p-ERK/ERK显著高于mico组和fibrin组(P0.05),同时咪康唑及纤维蛋白对MBP、CNPase、整合素的表达及p-ERK/ERK的效应具有交互作用(P0.05)。结论:咪康唑与纤维蛋白能协同促进神经球分化为成髓鞘样细胞,其机制可能与ERK磷酸化有关。     

应用体外DNA同源重组技术构建pcDNA3.1-NGF和pcDNA3.1-TrkA

目的:利用体外DNA 同源重组的方法分别构建含神经生长因子(NGF)和神经生长因子受体(TrkA)基因的真核表达载体.方法:在引物5′加上一段与载体克隆位点两端碱基序列相同的序列,PCR扩增目的基因NGF和TrkA,线性载体片段和目的基因片段经T4 DNA 聚合酶的外切产生互补的单链DNA,然后37℃退火实现体外同源重...     

纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘形成相关蛋白表达的影响

目的:探讨纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘相关蛋白表达的影响.方法:将体外培养的成人鼻粘膜嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架,用多聚赖氨酸修饰的玻片作为对照底物,培养14 天后用扫描电镜观察细胞的形态学变化并对细胞内髓鞘形成相关蛋白2,3-环核苷3-磷酸二酯酶(2′,3′ cyclic nucleotide 3′ phosphodiesterase,CNPase)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein, MBP)进行免疫荧光染色定位和免疫印迹半定量测定,分析纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞CNPase和MBP表达的影响.结果:人嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架后,其形态为长条带状,细胞成束排列,方向一致.细胞内CNPase和MBP表达水平明显高于对照组.结论:纤维蛋白支架与人嗅鞘细胞具有很好的生物相容性并可促进细胞表达髓鞘相关蛋白CNPase和MBP;将该组织工程支架用于移植治疗脊髓损伤,有利于再生神经纤维的髓鞘形成.