产毒型 O1 群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan PCR 的临床应用前研究

 目的 探讨产毒型 O1 群霍乱弧菌实时荧光双重 TaqMan PCR 法对临床模拟标本检测的意义,为该法的临床应用提供可靠的技术依据。 方法 将 O1 群霍乱弧菌灭活菌株悬液[1.0 × 1011 CFU（菌落形成单位）/ml]连续 10 倍稀释后与健康成人新鲜粪便混匀,制备成 5.0 × 101 ~ 5.0 × 109 CFU/g 梯度浓度的模拟带菌者粪便标本并提取 DNA,用以评价产毒型 O1 群霍乱弧菌实时荧光双重 TaqMan PCR 法对临床模拟标本检测的灵敏度、特异性和稳定性。 结果 实时荧光双重 TaqMan PCR 法对 O1 群霍乱弧菌的模拟带菌者粪便标本的检测灵敏度为 1.0 × 103 CFU （5.0 × 104 CFU/g）每反应体系,其检测线性范围为 1.0 × 103 ~ 1.0 × 108 CFU 每反应体系;在稳定性评价中,对含菌量 1.0 × 103 ~ 1.0 × 108 CFU 每反应体系模拟带菌者粪便标本 DNA 进行 3 次重复检测的结果显示,ctxA 基因扩增反应 Ct 值的变异系数为 0.54% ~ 1.36%,rfb-O1 基因扩增反应 Ct 值的变异系数为 1.65% ~ 3.75%;在特异性评价中,3 名健康成人新鲜粪便标本的阴性对照均未见特异性扩增曲线。 结论 产毒型 O1 群霍乱弧菌实时荧光双重 TaqMan PCR 法可用于 O1 群霍乱弧菌临床粪便标本的检测。     

产毒型O1群霍乱弧菌特异性基因序列实时荧光双重TaqMan PCR快速检测体系的建立

目的建立针对O1群霍乱弧菌的高敏感、高特异的实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应快速检测体系。 方法根据O1群霍乱弧菌主基因组O抗原编码基因rfb-O1和霍乱肠毒素的A亚基编码基因ctxA的特异性序列设计引物及TaqMan探针,利用便携式Smartcycler Ⅱ实时荧光PCR检测平台探讨该检测体系的敏感性,用19种其他肠道致病菌及院内感染常见致病菌评价该检测体系的特异性。 结果实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应快速检测体系对O1群霍乱弧菌的检测敏感度为1．0×10^2拷贝每反应体系;对O1群霍乱弧菌基因组DNA的检测敏感度为1．0×10^1 pg每反应体系;该检测体系在检测19种其他肠道致病菌或院内感染中的常见致病菌时不存在非特异性扩增;整个反应在2h内完成。 结论本研究建立的实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应检测体系可作为产毒型O1群霍乱弧菌特异、敏感、快速的检测手段,也可同时检测O1群霍乱弧菌产生霍乱肠毒素的能力。     

价值观多元化条件下的大学生心理健康教育

价值观问题在当前大学生心理健康教育中还没有引起人们的足够重视，心理健康教育也因此还更多地处在“自我循环”状态。在实践中，人们往往把大学生心理问题产生的原因习惯性地归结为学习、就业、经济等压力，以及环境、交际、恋爱等不适，但是在解决心理问题的时候总是感到情况要复杂得多，有时候甚至感到难以人手。实际上，这里涉及到对价值观与心理健康教育关系的认识问题，尤其涉及到如何认识价值观多元化对大学生心理健康的影响问题。     

2015－2016年北京市急性呼吸道感染病例肺炎支原体流行特征分析

目的 分析北京市2015－2016年急性呼吸道感染病例中肺炎支原体的流行特征,为其防控提供科学依据。方法 以2015年1月至2016年12月就诊于北京市各区哨点医院的急性呼吸道感染病例为研究对象,收集其咽拭子、痰、鼻咽抽吸物等呼吸道样本。采用实时荧光PCR法检测样本中肺炎支原体及其基因型别,病例性别、年龄、发病时间、临床表现的不同基因型肺炎支原体阳性率的比较采用χ2检验。结果 所有样本中的肺炎支原体阳性率为4.69%（652/13 904）,其中P1-Ⅰ、P1-Ⅱ和未分型阳性样本分别为238、230和184份;经χ2检验,P1-Ⅰ型与P1-Ⅱ型阳性率差异无统计学意义（χ2=0.139,P=0.709）。男、女性病例阳性率分别为4.35%（342/7 866）和5.13%（310/6 038）,差异有统计学意义（χ2=4.726,P=0.030）。6～岁年龄组阳性率最高,60～岁最低,各年龄组阳性率差异有统计学意义（χ2=347.600,P=0.001）。2016年肺炎支原体阳性率（5.18%）高于2015年（4.11%）（χ2=8.889,P=0.003）,10－ 12月阳性率高于其他月份（χ2=225.000,P=0.001）。肺炎病例中肺炎支原体阳性率（6.45%）高于急性上呼吸道感染病例（1.65%）（χ2=166.800,P=0.001）。结论 2015－2016年北京市急性呼吸道感染病例中,P1-Ⅰ型与P1-Ⅱ型肺炎支原体同时流行,女性患者、6～岁儿童与青少年为肺炎支原体感染的高发人群,不同年龄组病例易感基因型不同,2016年较2015年高发,各季节均有散发病例,10－12月为流行高峰,肺炎支原体的感染更易导致肺炎。     

清窦灵合剂及浸膏的急性毒理学研究

目的观察清窦灵合剂及浸膏的急性毒理作用。方法昆明种小鼠80只（雌雄各半）随机分为4组,每组20只,清窦灵合剂组按每次0．8mL／20g体积灌胃给药,24h内灌胃3次,每次间隔4h。对照组1小鼠给予生理盐水灌胃,方法、剂量同清窦灵合剂组。清窦灵浸膏组按每次0．8mL／20g体积灌胃给药,1次／d,对照组2小鼠给予生理盐水灌胃。方法、剂量同清窦灵浸膏组。观察14d,记录小鼠的外观、饮食、活动、排泄、体质量及死亡等情况,14d后解剖小鼠观察其重要脏器的变化。结果小鼠灌服清窦灵合剂120倍临床剂量,清窦灵浸膏162倍临床剂量,未见明显的急性毒性反应。清窦灵合剂组、清窦灵浸膏组、对照组1、2一般表现、主要脏器均未见明显异常改变,14d内实验组与对照组体质量差异无统计学意义（P〉O．05）。结论清窦灵合剂及浸膏临床使用剂量和给药途径是安全的。     

清窦灵合剂鼻腔冲洗治疗慢性鼻-鼻窦炎鼻内镜术后临床研究

目的观察清窦灵合剂鼻腔冲洗对慢性鼻-鼻窦炎鼻内镜术后患者的临床疗效。方法 60例慢性鼻-鼻窦炎鼻内镜术后患者随机分为治疗组和对照组各30例,对照组采用0.9%的氯化钠注射液鼻腔冲洗,治疗组采用0.9%的氯化钠注射液中加入清窦灵合剂鼻腔冲洗,测定2组术前及术后1个月、3个月、6个月鼻黏膜纤毛传输速率(MTR);随访6个月以上,观察2组临床疗效。结果术后1个月及术后3个月治疗组MTR比对照组增快,2组差异有显著性意义(P0.05);术后6个月2组MTR差异无显著性意义(P0.05);术后3个月、6个月2组疗效比较,治疗组病情完全控制率、总有效率均明显高于对照组,差异有显著性意义(P0.05)。结论清窦灵合剂鼻腔冲洗在控制鼻腔炎症、减少分泌物,改善患者的临床症状,减轻术腔水肿,防止肉芽及囊泡形成,促进术腔上皮化,促进鼻黏膜纤毛功能早期恢复等方面均有较好疗效。     

学校托幼机构免疫预防工作面临的问题及对策

免疫预防已成为传染性疾病预防控制的最重要手段。通过免疫预防,人类成功地消灭了烈性传染病天花,在全球范围消灭脊髓灰质炎的工作已进入最后阶段,麻疹、白喉、百日咳、破伤风、乙型脑炎、流行性脑膜炎等许多曾经严重危害人类健康的传染病已经得到良好控制。然而．由于人们对免疫预防的重要性认识不足．没有建立有效的制度,免疫预防工作还存在着薄弱环节,没有发挥其应有的作用,致使一些本可用疫苗来预防的传染病仍时有发生．甚至出现暴发流行。     

PLLA可吸收螺钉内固定治疗三踝骨折

目的探讨PLLA可吸收螺钉治疗三踝骨折的临床治疗效果。方法对我科2003~2006年采用PLLA可吸收螺钉治疗的23例患者进行回顾性研究分析。结果23例患者均获得随访,随访时间12~38个月,平均18个月。骨折均达到临床愈合,无延迟愈合或不愈合,骨折愈合时间平均10周。根据美国足踝外科协会（AOFAS）制定的踝关节评定标准,优良率达86．9％。结论PLLA可吸收螺钉是治疗三踝骨折理想的内固定材料。     

重症呼吸道合胞病毒肺炎的危险因素分析

目的探索呼吸道合胞病毒肺炎发展为重症的独立危险因素。方法利用北京市呼吸道病原体监测系统，收集北京市35家哨点医院就诊的肺炎患者的临床资料，采集临床标本，开展呼吸道合胞病毒的检测和基因分型，并根据收集的临床数据，进行单因素和多因素logistic回归分析，寻找重症呼吸道合胞病毒肺炎的危险因素。结果2015年3月至2019年2月，共收集369例呼吸道合胞病毒肺炎病例，其中重症肺炎61例。 单因素分析表明，重症呼吸道合胞病毒肺炎患者与普通呼吸道合胞病毒肺炎患者相比，年龄、性别、基础疾病、意识障碍、呼吸频率异常增快、收缩压低于90 mmHg、淋巴细胞减少、血尿素氮增高8项指标的差异有统计学意义。 多因素logistic回归分析表明，合并基础疾病（OR＝4.108，95% CI:1.425～11.840）、呼吸频率异常增快（OR＝10.738，95% CI:3.690～31.252）、淋巴细胞减少（OR＝6.110，95% CI:2.041～18.288）是重症呼吸道合胞病毒肺炎的3个独立危险因素；而女性（OR＝0.471，95% CI:0.199～1.115）、呼吸道合胞病毒B亚型（OR＝0.425，95% CI:0.158～1.141）可能为重症肺炎的保护因素（差异无统计学意义）。结论有基础疾病、呼吸频率异常增快、淋巴细胞减少是呼吸道合胞病毒肺炎发展为重症的独立危险因素，临床诊治过程中应予以重视。