脐带间充质干细胞联合HLA单倍型相合造血干细胞治疗重型再生障碍性贫血的临床观察

目的 观察人脐带间充质干细胞(HUC-MSC)在联合人类白细胞抗原(HLA)单倍型相合移植治疗重型再生障碍性贫血的疗效和安全性.方法 对8例重型再生障碍性贫血患者进行HUC-MSC联合HLA单倍型相合移植治疗,观察移植疗效及相关并发症.结果 所有患者均重建供者造血,中性粒细胞大于0.5×109/L和血小板大于20×109/L的恢复中位时间分别为12.1 d和15.2 d.8例患者均出现粒细胞缺乏症伴感染,1例(12.5%)发生急性移植物抗宿主病(aGVHD),予甲泼尼松龙和布地奈德后治疗控制.巨细胞病毒(CMV)感染1例,无1 例发生肝静脉闭塞病(VOD).结论 HUC-MSC联合HLA单倍型相合移植治疗重型再生障碍性贫血安全有效,可加快造血重建.     

人脐血源基质细胞移植重建造血微环境促进巨核细胞生成的实验研究

目的 探讨人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)移植重建裸鼠造血微环境对巨核细胞生成的促进作用.方法 取63只雌性BALB/c-nu/nu裸鼠,经5.0Gy60Coγ射线照射后,随机分为对照组、人骨髓基质细胞(hBMSCs)组和hUCBDSCs组(n=21),分别输注生理盐水、hBMSCs(1×105/只)和hUCBDSCs(1×105/只),观察移植后1、3、5、7、10、14、21d裸鼠血小板计数(PLT)变化,以及移植后1、7、14、21d的巨核细胞数、类成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)、骨髓象和骨髓病理组织变化.结果 3组裸鼠移植后PLT、巨核细胞和CFU-U计数均降低(P<0.05),其中hUCBDSCs组裸鼠以上3个指标降低程度最轻(P<0.05),且恢复速度优于hBMSCs组和对照组(P<0.05).hUCBDSCs组移植后骨髓抑制程度减轻,所有裸鼠均健康存活.结论 hUCN3SCs具备修复造血微环境、促进巨核细胞增殖和血小板生成的作用,输注hUCBDSCs可作为一种安全有效的促进放/化疗或造血干细胞移植后血小板数量和功能恢复的方法.     

人AB型血清培养体系体外培养扩增人脐血源基质细胞的试验研究

目的建立并优化AB型健康成人血清培养体系对人脐血源基质细胞的体外培养条件,观察基质细胞的生物学特性。方法人脐带血标本分离培养人脐血源基质细胞,经密度梯度分离后,在含有15％人AB型血清、bFGF（2．5～20．0μg／L）、10mol／L氢化可的松的DMEM／F12培养液中进行原代培养和传代。倒置显微镜观察细胞生长情况,HE染色观察细胞形态特征,并采用常规HE染色和免疫细胞化学染色对培养细胞进行鉴定。结果成功获得人脐血源基质细胞并进行体外扩增培养和传代,培养细胞能形成纤维细胞样集落。优化的培养条件为：DMEM／F12培养基添加15％人AB型血清、10．0μg／LbFGF、10^-6mol／L氢化可的松。免疫细胞化学染色Vimentin＋、CD34＋、TdT-、CD45-、CK-,符合造血基质细胞特点。结论采用人AB型血清培养体系可成功培养扩增人脐血源基质细胞,为下一步临床应用研究打下坚实的基础。     

SDF-1／CXCR4轴在人脐血源基质细胞促进巨核细胞增殖中的作用

本研究探讨基质细胞衍生因子（stromal cell derived factor-1,SDF-1）及其受体CXCR4在人脐血源基质细胞（human umbilical cord blood-derived stromal cells,hUCBSCs）促进巨核细胞增殖中的作用。以巨核细胞系HEL细胞作为研究对象,实验分HEL／hUCBSC共培养组、HEL／骨髓基质细胞（human bone marrow stromal cells,hBMSCs）共培养组和HEL悬浮培养组。应用ELISA法检测huCBSC和hBMSC培养上清SDF-1水平,应用激光共聚焦和流式细胞仪检测HEL细胞CXCR4蛋白表达,RT—PCR检测CxcR4mRNA表达。结果表明：hUCBSC高分泌表达SDF-1,其分泌高峰在培养第8天,稍迟于hBMSCs。与hUCBSCs共培养的HEL细胞,流式细胞仪和激光共聚焦检测均显示其CXCR4蛋白的表达较弱（P〈0．05）,且可在部分HEL细胞胞浆中发现红色点状荧光。RT-PCR检测结果显示,不同培养条件下HEL细胞CXCR4mRNA表达无显著性差异（P〉0．05）。结论：hUCBSC在分泌SDF-1和调控巨核细胞表达CXCR4方面起重要作用。     

儿童急性非淋巴细胞白血病临床分析

目的探讨儿童急性非淋巴细胞白血病临床特点.方法对我院2000～2004年收治的儿童急性非淋巴细胞白血病进行总结分析.结果儿童急性非淋巴细胞白血病临床表现多样,髓外浸润较多见,MICMe分型可提高诊断准确性,有t(15,17)、inv(16)等遗传学异常者治疗反应良好.结论了解儿童急性非淋巴细胞白血病的特点,有利于对疾病的诊治.     

^131I—抗HBxAg人／鼠嵌合抗体在裸鼠人肝癌模型定位的初步研究

在抗ＨＢｘＡｇ人／鼠嵌合抗体基因构建及表达成功后，进行了放射免疫显像研究，以评价在其在动物模型中的导向活性。＾１３１Ｉ标记嵌合抗体，经腹腔注射１，５，７天后行裸鼠人肝癌模型放射免疫显像，于第７天作组织分布测定，并以单区抗体及原鼠源抗体对照进行比较，结果显示实验组在标记抗体注入后２天即获肿瘤阳性显像，第７天更清晰，此时嵌合抗体，单区抗体，抗ＨＢｘ单抗及对照组的瘤／肝放射性比值分别为２．８，２．４４，     

Langhans细胞与Langerhans细胞的概念区别

Langhans与Langerhans细胞是内涵完全不同的医学用语，分别以纪念19世纪著名病理学家Theodor Langharts和Paul Langerhans的发现而得名。由于其英文字母拼写的相似，容易引起混淆，在多种医学类书籍和期刊中将两者英文拼写及翻译后的名称误用甚至混为一谈，在人民卫生出版社统编教材第6版《病理学》中也出现两种细胞名称使用的混乱，不利于医学知识的传播和学术的健康发展。[第一段]     

腺病毒介导PSMA3基因过表达对肝癌SMMC7721细胞增殖、周期、凋亡及其荷瘤生长的影响

目的：构建蛋白酶体亚基α3（proteasome subunit alpha type 3,PSMA3）基因腺病毒重组载体,并观测腺病毒介导PSMA3基因过表达对肝癌SMMC7721细胞增殖、周期、凋亡及其荷瘤生长的影响。方法：RT-PCR法扩增PSMA3基因全长CDs序列后,克隆入pTG19-T载体,再亚克隆入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭载体中,构建重组pAdTrack/PSMA3腺病毒载体,随后与骨架质粒pAdEasy-1同源重组形成pAd/PSMA3重组腺病毒,经包装及滴度测定,获高感染力的pAd/PSMA3病毒。用pAd/PSMA3病毒感染人肝癌SMMC7721细胞,荧光显微镜观测被感染的SMMC7721细胞的绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的变化情况。Cell counting kit-8（CCK-8）法检测pAd/PSMA3病毒对SMMC7721细胞增殖的影响。Real-time PCR和Western blot分别检测被感染的SMMC7721细胞的PSMA3基因、增殖细胞核抗原基因（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）、Caspase-3促凋亡基因及其编码蛋白的表达情况。流式细胞仪（FCM）检测被感染的SMMC7721的周期、凋亡变化。将经pAd/PSMA3病毒感染的SMMC7721细胞移植裸鼠皮下以生成荷瘤,逐日观察荷瘤的生长情况。所有实验以空病毒感染及未感染的细胞做对照。结果：克隆到768 bp的PSMA3基因,并构建了其具高感染力的pAd/PSMA3重组病毒。CCK-8法结果表明,过表达PSMA3基因的SMMC7721细胞,其增殖明显减慢（P<0.05）。Real-time PCR、Western blot检测显示,pAd/PSMA3重组病毒可介导SMMC7721细胞过表达PSMA3基因,上调其Caspase-3基因及其编码蛋白的表达,并下调其PCNA 基因及其蛋白的表达（P<0.05）。FCM检测证实,过表达PSMA3基因的细胞可被阻滞于G1期（细胞周期）,并可促使其凋亡,其凋亡率差异有统计学意义（P<0.05）。动物实验证实,pAd/PSMA3病毒可明显抑制裸鼠荷瘤的生长（P<0.01）。结论：重组病毒pAd/PSMA3可将SMMC7721细胞阻滞于G1期（细胞周期）,抑制其增殖,促使其凋亡,并可抑制其裸鼠荷瘤的生长,这些可能和下调其增殖相关PCNA蛋白,上调其凋亡相关caspase-3蛋白的表达密切相关。