3种不同评分在急诊危重患者预后评估中的对比研究

目的探究简单临床评分和快速急诊内科评分在急诊临床患者预后评价中的应用效果。方法对该院500例急诊患者进行简单临床评分(SCS)评分、快速急诊内科评分(REMS)评分以及急性生理与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分,对3种评分标准下预后预测效果进行评价。患者在进入急诊科进行救治起开始进行生命体征基础数据的收集,生命体征基础数据包括患者体温、血压、心率、呼吸频率、经皮血氧饱和度(SPO2)以及格拉斯哥昏迷指数(GCS)。同时根据患者入院后实验室辅助检查化验结果,参照SCS评分标准、REMS评分标准以及APACHE Ⅱ评分标准进行评分。结果在3种评分标准下患者死亡率均随着评分分数的升高而升高,每种评分分数与死亡率间具有统计学意义。SCS评分与APACHE Ⅱ评分比较,APACHE Ⅱ评分较SCS评分具有更高的灵敏度以及特异性;REMS评分与APACHE Ⅱ评分比较,APACHE Ⅱ评分较REMS评分具有更高的灵敏度以及特异性。SCS评分、REMS评分以及APACHE Ⅱ评分ROC曲线下面积分别为0.803、0.771、0.857,3种评分标准在临床中均具有一定意义的诊断价值,3种评分标准的准确性强度由高至低依次为APACHE Ⅱ评分、SCS评分以及REMS评分。结论 SCS评分、REMS评分以及APACHE Ⅱ评分均在一定程度下可以有效地评价急诊科危重患者治疗预后情况,但考虑急诊科患者的特点,SCS评分以及REMS评分因其操作简便、数据获得方便快捷而优于APACHE Ⅱ评分。因此,SCS评分以及REMS评分在临床急诊科危重患者预后预测中具有良好的预测价值。另外,SCS评分较REMS评分具有更强的综合性以及更高的准确度,较APACHE Ⅱ评分具有更加方便快捷以及更快速的数据收集获取,在临床中可以对急诊科危重症患者预后进行预测。     

日本血吸虫组分蛋白SjR47的大量纯化、收集和鉴定

从日本血吸虫感染兔红细胞上分离的SjR47和SjR12两种组分蛋白能诱导宿生产生明显的抗病免疫效应。为大量纯化、收集该两种组分蛋白，我们采用了聚丙烯酰胺凝胶大柱制备电泳技术，并对该法收集蛋白的纯度及其生物活性进行了鉴定。结果表明，该技术不仅可使蛋白收集量达到毫克级水平，而且蛋白纯度较高，还可保持较高的天然蛋白生物活性，经透析处理后蛋白生物活性更高，用以免疫家兔后可获得高效价的多克隆抗体，为今后进一步深入研究该两种蛋白分子的特性奠定了基础。实验结果进一步表明聚丙烯酰胺凝胶大柱制备电泳技术是一种有效的蛋白纯化方法。     

紫外线致弱日本血吸虫尾蚴感染小鼠引起的肺组织细胞反应及虫体扫描电镜观察

目的通过观察日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)紫外线辐照致弱尾蚴感染小鼠后肺组织的细胞反应以及肺期虫体的受损情况,探寻致弱尾蚴在小鼠体内诱导免疫效应机制和Sj受损情况。方法以紫外线致弱Sj尾蚴经腹部皮肤感染小鼠4d、7d、14d和45d后剖杀,分别取肺组织,固定、切片,光镜下观察虫体周围的组织细胞反应,并与同时期的感染小鼠组织切片进行比较,同时,对小鼠体内肺期Sj童虫进行扫描电镜观察。结果感染后4~7d,小鼠肺期童虫虫体周围出现较明显的出血灶和炎症反应,并有一定量的嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞的浸润,同时期的正常感染小鼠组织内虫体周围炎症反应却不明显;虫体体壁可见不同程度的损伤,电镜观察显示小鼠体内的肺期童虫存在明显的畸形和发育延迟。结论紫外线辐照致弱尾蚴感染后Sj在小鼠体内不能正常发育成熟,和正常尾蚴相比,致弱尾蚴在肺期滞留时间较长,仅有极少数虫体可移行至肠系膜或肝脏,但宜不能发育成熟,引起的病理损害主要表现为在肺期弥漫性出血灶、炎症细胞浸润等反应,这些特征可能与血吸虫致弱尾蚴感染免疫机制有关。     

紫外线致弱日本血吸虫尾蚴诱导BALB／c小鼠免疫保护作用研究

目的观察紫外线（UV）致弱日本血吸虫尾蚴免疫BALB／c小鼠免疫保护作用。方法辐照致弱日本血吸虫尾蚴,经腹部皮肤用UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫诱导BALB／c小鼠,3周后进行攻击感染,同时设正常感染对照组。攻击感染6周后解剖小鼠,计算减虫率、减卵率,并观察虫体发育情况和肝组织细胞免疫应答情况。结果免疫组的减虫率和减卵率分别为37．90％和51．16％;免疫组小鼠体内虫体发育明显滞后于正常感染对照组内虫体;免疫组小鼠肝脏虫卵肉芽肿较正常组明显减少。结论UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫BALB／c小鼠能诱导较好的免疫保护力。     

重组Sj26(rSj26)抗原免疫酶测定新方法诊断日本血吸虫病的研究

将日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和重组Sj26(rSj26)抗原致敏的硝酸纤维素膜片(NCD)用于膜片免疫酶测定(D-IEA),分别检测同批日本血吸虫病人、卫氏并殖吸虫病人、华支睾吸虫病人和健康人血清104例的特异性抗体,同时用目测及光密度(OD)值测定两种方法判断反应结果。结果显示,分别采用上述两种抗原检测所获的阳性率或假阳性率间无显著性差异。此结果首次提示rSj26抗原的血清诊断效果与目前血吸虫病血清学方法常用抗原SEA相似。本文报告的免疫酶测定新方法,可同时采用两种方法判断结果,迄今尚未见到类似报道。试验结果均表明用D-IEA检测时显示高度的敏感性(92.1％—94.7％)和特异性(0.0％—2.9％),具有实用价值。     

聚合酶链反应检测日本血吸虫DNA的实验研究

目的探索核酸检测在日本血吸虫病诊断中的应用。方法根据日本血吸虫基因设计特异性引物,采用PCR方法对日本血吸虫的成虫、虫卵、日本血吸虫感染家兔的肝组织、粪便、外周血清标本中的DNA进行扩增,并将虫卵和粪便的模板DNA倍比稀释后进行扩增,以测定PCR扩增法的敏感性。结果从日本血吸虫的成虫、虫卵、日本血吸虫感染家兔的肝组织、粪便和外周血清中均扩增到分子量为230bp的阳性条带,扩增产物经测序并在基因库中匹配,证实为日本血吸虫基因中的一个片段,其同源性为98%。其PCR扩增敏感性检测结果表明,0.021个虫卵DNA模板即可扩增出该特异性阳性条带。结论聚合酶链反应检测日本血吸虫DNA有较高的敏感性,尤其是能从日本血吸虫感染宿主血清中检测出特异性DNA,具有潜在的诊断应用价值。     

钉螺血淋巴细胞及其功能的研究

目的 研究获取钉螺血淋巴细胞的方法, 观察其形态结构, 研究其免疫等相关功能。 方法 参照外周淋巴器官中淋巴细胞的悬浮收集法, 获取钉螺血淋巴细胞, 经Giemsa染色后显微镜观察其形态。 血淋巴细胞经结晶紫染色后分别计数悬浮法、传统压片法及针刺法获取的血淋巴细胞数, 并进行方差分析和Dunnett?鄄t检验。取冻融的血淋巴细胞上清进行免疫沉淀、抑菌、吞噬杀菌实验。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析血淋巴细胞蛋白组份相对分子质量（Mr）。 结果 钉螺血淋巴细胞分为圆形有丝状伪足、嗜酸性圆形无丝状伪足、嗜碱性圆形无丝状伪足和梭形细胞4种形态, 平均直径依次约为 10.93、6.13、6.08及11.06 μm, 各约占细胞总数的 50%、 30%、 5% 及15%。每只钉螺悬浮法、传统压片法及针刺法获取的血淋巴细胞均数分别为1.50、0.66及0.03万/ml。悬浮法与传统压片法、与针刺法差异有统计学意义（F=281.47, P<0.01）。进一步Dunnett-t检验, 悬浮法与压片法、与针刺法的血淋巴细胞总体均数差异有统计学意义（t₁=15.67, t₂=24.50, 两组P<0.01）。血淋巴上清与日本血吸虫虫卵可溶性抗原（SEA）反应出现絮状沉淀, 抑菌试验对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌出现明显的抑菌圈, 血淋巴细胞对白色念珠菌的吞噬率和杀菌率分别为86%和46%。血淋巴细胞蛋白组份相对分子质量约为Mr 112 300、 107 100、 97 200、 73 500、 60 000及12 000。 结论 悬浮法可获得大量钉螺血淋巴细胞, 其具有沉淀SEA、抑制金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌生长, 以及吞噬杀灭白色念珠菌等免疫功能。     

未成熟日本血吸虫虫卵抗原对宿主肝内肉芽肿病变影响的研究

用４ｗｋ－ＳＥＡ、５ｗｋ－ＳＥＡ和６ｗｋ－ＳＥＡ加福氏佐剂，背部皮下注射免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，攻击感染后短期动态观察结果显示，４ｗｋ－ＳＥＡ免疫小鼠攻击感染后４～６ｗｋ时，小鼠肝组织内的减卵率（４０．７４％～５２．５９％）显著高于感染组和佐剂对照组（Ｐ＜０．０１），且在攻击感染后６ｗｋ时，免疫鼠肝组织内未见成熟虫卵，同期肝组织内肉芽肿平均直径（８１．５４±２０．７０μｍ～１１５．２８±２０．５２μｍ）明显小于对照鼠者（１５２．２２±６０．６９μｍ～３４９．１１±４８．４０μｍ），而用５ｗｋ－ＳＥＡ和６ｗｋ－ＳＥＡ免疫小鼠均未获得类似４ｗｋ－ＳＥＡ的免疫效应。研究结果表明，未成熟虫卵可溶性抗原能诱导出显著的抗病免疫力（明显的减卵率和成熟卵减少率及感染鼠肝内肉芽肿的显著缩小），具有理论意义和应用前景     

非游离循环抗原组分对血吸虫感染宿主虫卵肉芽肿保护性免疫调节机制的研究

首次采用特殊方法从感染兔红细胞上分离、纯化两种血吸虫组分抗原SjR47和SjR12，实验结果证明，前者属卵源性抗原，后者为虫源性抗原．两次实验结果均表明，两种组分抗原能诱导出明显的抗病免疫力，实验1获得54．95％－72．36％的肝内减卵率，实验2获得52．57％－57.27％的肝内减卵率和50.73％－74．70％的成熟卵减少率，并均可使肝内肉芽肿病变明显减小，尤以SjR47效果显著．两种抗原诱导的抗肝内肉芽肿保护性免疫调节机制的研究结果表明，两者均能诱导小鼠产生高水平的IgG，测定IgG及其亚类动态显示，在感染后0－12wk时，免疫小鼠血清IgG和IgG_1水平均显著高于佐剂和感染对照组者（P＜0.01），特别是能反映保护性免疫力指标的IgG_1升高非常明显：SjR47免疫鼠的脾T淋巴细胞亚群表型动态研究显示，SjR47免疫鼠的CD4~＋和CD8~＋T细胞在感染4wk时均升高，随后下降．CD4~＋／CD8~＋比值也随时间延长而下降，呈现免疫下调，其变化趋势同肉芽肿病变减小相一致；SjR47免疫鼠的细胞因子水平动态观察结果表明，SjR47免疫鼠后可使TNF－α在小鼠体内的活性水平较平显著上升（成虫期前），减弱了TNF－α对虫卵肉芽肿形成的介导作用以及对雌虫排卵的促进作用，导致肝内肉芽肿病变减小和虫卵减少。本研究结果表明，两     

日本血吸虫卵源性抗原诱导的抗肉芽肿病变保护性免疫调节机制的研究

日本血吸虫卵源性组分抗原ＳｊＲ４７可诱导小鼠产生明显的抗虫卵肉芽肿病变保护性免疫力。本文对免疫小鼠脾Ｔ淋巴细胞亚群表型动态和抗体免疫应答进行了研究,结果显示ＳｊＲ４７免疫小鼠的ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞水平,在感染后早期（４ｗｋ）升高,随后下降,至感染后８ｗｋ时,ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞比值＜１．００,呈免疫抑制现象。ＳｊＲ４７免疫小鼠感染后０～１２ｗｋ时血清抗ＳｊＲ４７抗体（ＩｇＧ）水平显著高于抗ＳＥＡ抗体水平,也显著高于同时期的佐剂和感染对照组小鼠抗ＳｊＲ４７抗体水平（Ｐ＜０．０１）,进一步测定小鼠血清特异性抗体ＩｇＧ及其亚类表明,ＳｊＲ４７免疫小鼠的ＩｇＧ１水平升高非常显著。实验结果表明,ＳｊＲ４７免疫小鼠后诱导的抗虫卵肉芽肿病变保护性免疫力与细胞免疫及体液免疫均密切相关,其中ＩｇＧ１抗体可能起着重要作用。