血清循环DNA的EGFR基因突变与肺癌选择性靶向治疗研究

目的:通过血清循环DNA的基因突变检测,筛选EGFR突变型肺癌患者并评估靶向性药物吉非替尼对其的临床疗效。方法:从肺癌患者血清中提取DNA,采用PCR扩增和基因测序检测EGFR突变。结果:116例肺癌血样中检出EGFR突变46例,突变率为39.7%,其中外显子19和21突变分别占65.2%(30/46例)和34.8%(16/46例),EGFR基因突变多见于女性患者和肺腺癌(包括腺鳞癌)患者。对20例肺癌的进一步分析证明,血清EGFR基因突变类型与患者自身肿瘤的突变类型相同。另外通过血清循环DNA基因检测法筛选了19例化疗失败的突变型晚期肺癌进行吉非替尼靶向治疗,客观有效率为52.6%,病情控制率为89.5%,中位无进展生存时间为8个月,中位生存时间为12个月,2年生存率达到33.3%。结论:证实血清循环DNA与肿瘤组织DNA的EGFR基因突变一致;以血清循环EGFR突变检测结果为依据选择分子靶向性药物吉非替尼治疗,对晚期肺癌患者疗效明显。     

血管生成和p16、p53蛋白表达与非小细胞肺癌淋巴结转移的相关性研究

目的　分析非小细胞肺癌 (NSCLC)淋巴结转移与血管生成及p16、p5 3蛋白表达的关系。方法　采用免疫组织化学方法对 187例NSCLC(74例腺癌、76例鳞癌和 37例腺鳞混合癌 )进行血管染色计数和p16、p5 3蛋白测定 ,并作相关临床因素分析。结果　非小细胞肺癌组织中微血管密度平均为 6 .8± 3.3,p16和p5 3蛋白阳性表达率分别为 4 7.6 %和 34.2 %。各组织类型非小细胞肺癌中淋巴结转移病例 (T2 N1～ 2 M0 )的微血管密度显著高于未转移者 (T2 N0 M0 ) ;在肺鳞癌和腺鳞癌中 ,p16和p5 3蛋白同时表达异常 (p16 -p5 3 )与微血管密度增高有关 ,但与淋巴结转移无关 ;而在肺腺癌中 ,p16和p5 3蛋白同时表达异常与淋巴结转移有关 ,但与微血管密度无关。微血管密度和p16、p5 3蛋白表达异常与年龄、性别、病理类型及分化程度均无明显相关。结论　各组织类型非小细胞肺癌的淋巴结转移均与活跃的血管生成密切相关 ,其中在肺鳞癌和腺鳞癌中 ,血管生成与p16和p5 3基因表达异常有关。而在肺腺癌中 ,血管生成和p16、p5 3蛋白异常表达是影响其淋巴结转移的两项独立的因素。     

肺癌外周血细胞角蛋白联合2F7/S5A单抗检测及其临床应用

目的　应用流式细胞仪对肺癌外周血中的细胞角蛋白及 2F7/S5A单抗检测阳性细胞进行定量分析 ,探讨临床应用的可行性。方法　取外周血 5ml ,经Ficoll密度、梯度离心获取单个核细胞 ,CD45、细胞角蛋白 (CK)及肺癌单克隆抗体 ( 2F7/S5A)标记 ,应用流式细胞仪检测CD45 - CK+2F7/S5A+细胞 ,计数单位 (升 )血中的CD45 - CK+2F7/S5A+细胞含量。结果　共 15 1例进入研究 ,其中健康对照 2 0例 ,肺癌 116例 ,肺部良性疾病 15例。正常外周血单核细胞的表型为CD45 +CK- 2F7/S5A- ,而小细胞肺癌和非小细胞肺癌标记的表型均为CD45 - CK+2F7/S5A+。 2 0例健康对照均为阴性 ;15例良性肺部疾病中 1例为阳性 ;116例肺癌患者 39例为阳性 ,检测敏感性为 33.6 2 % ,特异性 93.33% ,阳性预测值 97.5 0 % ,阴性预测值 15 .38% ,检测阳性细胞含量的平均数为 0 .12× 10 6/L。结论　应用流式细胞仪检测肺癌患者外周血中CD45 - CK+2F7/S5A+细胞具有较高的特异性和阳性预测值 ,能定量反应肺癌患者外周血中的微量癌细胞 ,对肺癌的临床诊断及治疗具有一定的应用价值。     

肿瘤转移与肿瘤干细胞研究

转移是恶性肿瘤的基本属性之一,也是临床治疗中一个棘手的问题,因而探索肿瘤转移的细胞学和分子生物学基础并寻找新颖的诊治靶标,是当前普遍关注的一个研究热点.肿瘤干细胞是恶性肿瘤的起始细胞,但最近的研究揭示,此类癌细胞也与肿瘤转移密切相关.本文简要综述了这一领域的最新研究进展.     

人肺腺癌干细胞对顺铂和卡铂的药物敏感度分析

目的:分析人肺腺癌干细胞(lung adenocarcinoma stem cell, LASC)对顺铂(cisplatin,DDP)和卡铂(carboplatin,CBP)的药物敏感度.方法:人肺腺癌细胞SPC-A1、AG及CPA-Y2经DDP和CBP作用后,应用CCK-8(cell counting kit-8)比色法检测细胞存活率,应用免疫荧光检测法测定药物生存细胞(drug surviving cell,DSC)的表型特征.通过磁性细胞分选技术分离肺腺癌干细胞,应用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)示踪技术检测DSC中的肿瘤干细胞,分析DSC对DDP和CBP的药物敏感度.结果:LASC具有细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cell, BASC)表型(OCT4~+CCSP~+SP-C~+).将此类癌干细胞(CD221~+)与肺腺癌分化细胞(CD221~-)混合后检测DSC发现,后者具有OCT4~+BASC表型.DSC对铂类药物具有显著抗性.结论:肺腺癌干细胞对DDP和CBP具有显著耐药性,可能是化疗后肿瘤复发的根源.     

耐药相关基因与肿瘤药敏试验对反映小细胞肺癌治疗效应的意义

目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)多药耐药(MDR1)、谷胱甘肽转移酶(GST鄄π)、多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达与肿瘤药敏试验之间的相关性及其临床指导意义。方法:56例NSCLC(已手术)进入研究,药敏方法采用磷脂结合蛋白V(annexinV)联合碘化丙啶(PI)双参数法,耐药基因MDR1、GST鄄π、MRP采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测。结果:各抗癌药物的平均抑瘤率分别为:紫杉醇(14.6±12.3)%,顺铂(21.7±12.2)%,去甲长春花碱(8.3±13.2)%,丝裂霉素(11.3±15.2)%,鬼臼乙叉甙(10.7±18.1)%,双氟胞苷(13.2±10.8)%,长春碱酰胺(6.6±11.3)%,长春新碱(7.4±7.7)%。耐药基因阳性率分别为MDR164.3%,MRP42.8%,GST鄄π46.4%。耐药基因MRP、GST鄄π阳性和阴性表达与病理类型和期别间未见明显相关;腺癌MDR1阳性表达组明显高于阴性表达组(P<0.05)。MDR1耐药基因阳性和阴性表达与肿瘤的药敏未见相关性。MRP阳性表达者对去甲长春花碱、长春碱酰胺、长春新碱和丝裂霉素的肿瘤抑制率显著低于阴性表达组(P<0.05)。耐药基因GST鄄π阳性表达者对顺铂、去甲长春花碱、丝裂霉素的抑瘤率显著低于阴性表达组(P<0.05)。结论:肺癌耐药基因GST鄄π、MRP表达阳性与部分化疗药物的肿瘤药敏存在相关性,其对临床化疗药物的选择具有一定指导作用。     

肺癌靶向治疗研究进展与我国肺癌的EGFR基因突变概况

近年来,以上皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)为靶标的分子靶向治疗(molecular targeted therapy)受到国内外肿瘤界的普遍关注,其中EGFR酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib(又称Iressa)和Erlotinib(又称Tarceva)已被美国食品药品管理局(FDA)批准用于治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC),并且Gefitinib还获得包括日本、澳大利亚等27个国家的批准,我国也于2005年2月批准了Genfitinib进入临床.