慢性乙型肝炎e抗原阳性和阴性患者细胞免疫功能的研究

应用间接夹心ELISA法检测了59例慢性乙型肝炎患者血清IL-2,对其中27例用A-PAAP法检测T细胞亚群。结果表明慢性乙型肝炎患者较正常对照组CD~-细胞数明显降低,CD_8~+细胞数明显增高,CD_4~+/CD_8~+比值和IL-2水平均显著降低。HBeAg阳性组与抗-HBe阳性组比较,在CD_8~+细胞数增加和CD_4~+/CD_8~+比值降低方面均有显著差异。HBeAg阳性组较HBeAg/抗-HBe阴性组T细胞亚群和IL-2变化亦有显著差异,且IL-2与CD_4~+细胞数呈正相关。通过对8例HBeAg阴转过程的观察,发现多有IL-2水平增高,且IL-2水平与ALT水平、HBV DNA及临床症状有良好的一致性,但病程中出现抗-HBe阳性慢性乙型肝炎患者中2/4例出现IL-2升高、ALT下降及HBV DNA阴转。提示抗-HBe的出现不一定意味着机体免疫力的提高和疾病的缓解。     

小剂量γ线长期照射引起豚鼠和猕猴红细胞生化的某些变化

豚鼠和猕猴受小剂量⁶⁰Coγ线长期慢性照射后对血液生化的某些变化进行了研究。豚鼠受照射置为9.6伦/8小时,每周照射6天。先后共进行9批实验,最大积累照射量达900伦。猕猴照射量为2.55伦/6小时,每周照射6天,累积月照射量为63.7伦,年剂量为764伦,最大积累照射量为3080伦。在照射过程中先后曾对16个生化指标进行了测定。结果表明,豚鼠经9.6伦/8小时长期照射后,红细胞的谷草转氨酶活性发生明显变化-血中氧容量、血红蛋白氧化速率、谷胱甘肽以及碱性磷酸醣酶等四个指标也发生一定的变化.猕猴在小剂量长期慢性照射后的第3个月红细胞谷草转氨酶的活力开始显著升高,红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氧酶活力则显著下降,但整个照射过程中这些变化都呈波动性.     

急性戊型肝炎高胆红素血症合并溶血性贫血1例

1病例资料患者,女性,21岁,孕31周,2010年10月26日因＂发热伴尿黄1周＂入院。入院时发热,体温最高达39℃,伴极度乏力、高度腹胀、纳差、恶心、呕吐、肌肉酸痛、时有咳嗽、咳白粘痰,大便正常,小便色黄如浓茶样,发病以来有1次酱油色小便。既往无肝炎及其他特殊病史。     

护理本科实习生手卫生情况的调查分析

[目的]了解护理本科实习生手卫生情况。[方法]对97名护理本科实习生在实习期间手卫生情况进行调查,内容包括对《医务人员手卫生规范》的了解情况、洗手的时机、影响洗手卫生的因素。[结果]大多数护理本科实习生对《医务人员手卫生规范》不了解;护理本科实习生在接触病人的血液、体液、排泄物、伤口敷料后洗手率较高,从同一个病人身上的污染部位移到清洁部位、在接触病人周围物品后洗手率较低;影响护理本科实习生洗手的因素主要为工作太忙、没有对洗手效果有效监督、带教老师洗手带教意识薄弱、对洗手不是很重视、手卫生设施不方便。[结论]护理本科实习生对手部污染的认识不足,对控制交叉感染未引起重视;应加强全面防护教育,规范护理本科实习生自身操作技术及临床带教,进一步完善医院手卫生管理制度。     

移植前应用伊马替尼对慢性粒细胞白血病患者造血重建及早期并发症的影响

目的 研究移植前伊马替尼治疗对慢性粒细胞白血病（CML）异基因移植患者造血重建及移植相关早期并发症的影响.方法 回顾性分析南方医科大学南方医院2003年5月至2013年5月97例行异基因移植CML患者病例资料,分为伊马替尼组（27例）与对照组（70例）,分析两组间造血重建时间、早期预后以及急性心力衰竭、肝静脉闭塞病（HVOD）、移植物抗宿主病（GVHD）、出血性膀胱炎、病原体感染等移植相关早期（＋100天）并发症发生率.结果 两组间移植后造血重建时间以及HVOD、GVHD、出血性膀胱炎、病原体感染发生率差异均无统计学意义（P＞0.05）.但伊马替尼组急性心力衰竭发生率较对照组高29.6％（8/27）比8.6％（6/70）,P=0.02],且死亡或放弃治疗事件发生率也较对照组高[18.5％（5/27）比2.9％（2/70）,P=0.02].结论 移植前伊马替尼治疗可能会增加CML异基因移植患者急性心衰发生率且一定程度上影响患者预后,但对造血重建时间以及HVOD、GVHD、出血性膀胱炎、病原体感染等移植相关早期并发症发生率无明显影响.     

宏基因组二代测序在异基因造血干细胞移植后耶氏肺孢子菌肺炎诊断中的意义

目的评估宏基因组二代测序(mNGS)对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者耶氏肺孢子菌肺炎(PJP)的诊断价值。方法纳入2019年6月至2023年8月南方医科大学南方医院血液科allo-HSCT后疑似肺感染并接受肺泡灌洗液病原学检测的98例患者, 比较mNGS与常规方法、实时定量PCR(RQ-PCR)对PJP的诊断效能。结果 12例患者最终诊断为PJP(确诊11例、临床诊断1例)。确诊患者中1例为常规方法和RQ-PCR检测均阳性, 10例仅RQ-PCR阳性。12例患者mNGS均检出耶氏肺孢子菌。mNGS诊断PJP的敏感性为100%, 高于常规方法(8.3%, P=0.001), 与RQ-PCR(91.6%)相当(P=1.000)。75%的PJP患者为肺混合感染, 合并EB病毒和巨细胞病毒最为常见。mNGS检出混合感染8例, RQ-PCR检出5例, 常规方法未检出(P=0.008)。结论 mNGS在allo-HSCT患者PJP诊断中具有良好的敏感性, 在混合感染病原检测方面具有优势, 可作为常规检测方法及RQ-PCR的有效补充。     

多重实时荧光定量PCR同时检测急性白血病患者WT1和MDR1基因表达水平方法的建立

目的 构建可同时检测AL患者WT1和MDR1基因表达水平的多重实时荧光定量PCR方法.方法 提取K562细胞的总RNA,并逆转录扩增WT1和MDR1的cDNA,通过Bam H Ⅰ及BglⅡ酶切后连接成WT1和MDR1重组片段,对WT1和MDR1重组片段进行PCR扩增,PCR产物纯化后与pMD18载体进行连接,转化宿主菌DH-5α,构建载有WT1和MDR1基因的标准品重组质粒,用限制性核酸内切酶法和PCR法鉴定质粒.用FAM荧光标记MDR1探针、VIC荧光标记WT1探针,建立能在1个试管中同时检测WT1和MDR1基因表达水平的多重实时荧光定量PCR反应体系.应用该体系检测47例AL患者及32例对照者WT1和MDR1基因表达水平,比较两组之间WT1和MDR1基因表达水平的差异,并随访7例AL患者不同病程中WT1和MDR1基因表达水平的变化与临床预后的关系.结果 经EcoR1酶切及PCR法证实WT1和MDR1基因重组质粒已成功构建.所建立多重实时荧光定量PCR方法的灵敏度为102拷贝/μl;所建立标准曲线的R2分别为0.999和0.998.AL患者WT1和MDR1基因的表达水平中位数分别为37 000(163～6 370 000)拷贝/μg RNA和76 200(179～18 000 000)拷贝/μg RNA,显著高于对照组的258(0～643)拷贝/μg RNA和333(0～779)拷贝/μg RNA,差异有统计学意义(Z=6.755、6.736,P＜0.01).对应用相同的诱导和巩固化疗方案治疗的7例AL患者进行随访,3例持续缓解患者中,WT1和MDR1的表达水平在初治时分别为2 170和86 900、1 130和5 860、1 170和586拷贝/μg RNA,治疗后WT1和MDR1的表达水平明显下降,分别为370和560、138和980、150和690拷贝/μg RNA,此3例患者获长期完全缓解.在3例完全缓解后复发患者中,WT1和MDR1表达水平在初治时分别为1 600和11800、24 800和968、48 200和1 100 000拷贝/μg RNA,在化疗获得完全缓解后均降低,但在随后治疗过程中,WT1、MDR1表达量又逐渐升高,分别为20 314和25 660、184 364和31 530、15 680和878 000拷贝/μg RNA,此3例患者最终均出现临床复发.另外1例未缓解患者初治时WT1和MDR1表达水平分别为81 600和1 200 000拷贝/μg RNA,化疗后WT1、MDR1表达水平不仅未下降,反而有所上升,分别为124 100和7 632 400拷贝/μg RNA,此例患者始终未获缓解.结论 本研究成功构建了可同时检测WT1和MDR1基因表达水平的多重实时荧光定量PCR方法.同时检测AL患者WT1和MDR1基因表达水平的变化可能有助于判断预后.

Abstract：

Objective To set up a multiplex real time quantitative PCR method to detect the expression of WT1 and MDR1 gene simultaneously in acute leukemia patient. Methods Total RNA was extracted from k562 cell line and was reverse transcribed to cDNA by the outer primers of WT1 and MDR1 respectively. The cDNA of WT1 and MDR1 were purified and digested by Bam H Ⅰ and Bgl Ⅱ , and then the two fragments were ligated to form the recombinant fragment WT1 + MDR1. The outer forward primer of WT1 and outer reverse primer of MDR1 were used to amplify the recombinant fragment WT1 + MDR1. The PCR product was purified and cloned into pMD18-T vector, and then transferred into E. coli DH-5α. A new kind of WT1-MDRl-contained standard plasmid was obtained from the positive colony. The recombinant plasmid was verified by digestion with restriction enzyme and PCR amplification. A multiplex real time quantitative PCR method was set up with FAM-labeled MDR1 probe and VIC-labeled WT1 probe in one reaction tube. The WT1 and MDR1 gene expression was detected in forty-seven AL patients and thirty-two controls by this method. Seven patients were followed-up to elucidate the relationship between the gene expression levels and clinical prognosis. Results The recombinant plasmid was confirmed by EcoR1 digestion and PCR amplification. The multiplex real time quantitative PCR technique could reach the sensitivity of WT1 and MDR1 gene up to 102 copy/μl. The standard curve slopes were 0. 999 and 0. 998. The WT1 [ 37 000( 163-6 370 000 )copies/μg RNA ] and MDR1 [ 76 200( 179-18 000 000 )copies/μg RNA ]expression levels of AL patients were significantly higher as compared to the controls [ 258( 0-643 ) copies/μg RNA and 333( 0-779 )copies/μg RNA ]( Z= 6. 755,6. 736, P ＜ 0. 01 ). Following up seven patients with similar regimen of chemotherapy, the WT1 and MDR1 expression correlated to the clinical course. Three AL patients with WT1 and MDR1 expression levels (2 170 and 86 900, 1 130 and 5 860, 1 170 and 586 copies/μg RNA )significantly decreased after chemotherapy and kept in the low range ( 370 and 560,138 and 980, 150 and 690 copies/μg RNA ), and had a favorable outcome. Three AL patients with WT1 and MDR1 expression levels ( 1 600 and 11 800, 24 800 and 968, 48 200 and 1 100 000 copies/μg RNA )decreased after initial chemotherapy, but increased significantly afterwards (20 314 and 25 660,184 364 and 31 530, 15 680 and 878 000 copies/μg RNA ),and suffered clinical relapse. One patient with high WT1 and MDR1 expression levels ( from 81 600 and 1 200 000 copies/μg RNA to 124 100 and 7 632 400 copies/μg RNA )showed the persistence of disease. Conclusions A multiplex real time quantitative PCR method to detect WT1 and MDR1 gene simultaneously is constructed successfully. The expression of WT1 and MDR1 may provide useful information for AL patients prognosis.     

难治复发性多发性骨髓瘤特点分析

目的 探讨难治复发性多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）患者临床特点及预后因素。方法 回顾性分析初治并随访为难治复发的MM患者53例,对他们的临床表现及预后进行分析。并比较进展时间(time to progression,TTP)＜1年和≥1年两组患者预后。结果 53例难治复发的MM患者14例存活,25例死亡,14例失访。初诊时骨痛患者占78.6%,进展时为48.2%。临床Durie-salmon分期多为Ⅲ期,占89.3%。53例患者中10例合并髓外浆细胞侵犯,1例合并浆细胞白血病。53例患者中位进展时为16.0个月,进展后中位随访时间为6.0个月,中位随访时间为29.5个月。21例患者进展时间＜1年,32例≥1年。两组中位随访时间分别为11.0个月,44.0个月,进展后中位随访时间分别为4.0个月,12.0个月。结论 MM患者治疗过程中出现骨痛多提示疾病进展;骨髓浆细胞含量较高的患者预后较差;进展时间较早患者其进展后生存时间也相对较短。     

安徽省某市级医院HBV感染住院患者HBV基因型检测分析

目的 了解安徽省某市级医院乙型肝炎病毒(HBV)感染住院患者的HBV基因型分布状况,并探讨HBV基因型与肝炎严重程度、疾病进展的关系.方法 HBV基因型检测采用 PCR技术结合荧光探针技术,进行荧光PCR分型检测.HBV血清标志物的检测应用化学发光微粒子免疫分析法(CMIA).HBV-DNA含量应用实时荧光定量方法检测...     

女大学生生殖健康信息素养干预措施综述

在健康产出方面,健康信息素养一致具有重要的作用和意义,其已成为重大的公共卫生课题并且广受关注,本文通过对其历史发展、国内外现状评述进行深入的分析和研究,同时对其发展前景进行预测,并以此阐述女大学生生殖健康信息素养的干预措施。