组织工程尿道在裸鼠皮下的埋置

背景：由于创伤、先天畸形、肿瘤或手术继发的尿道缺损、狭窄、憩室等病理状况下，需要采用自体组织修复其缺损。 目的：验证构建组织工程化尿道的可行性。 设计、时间及地点：观察性实验，于2005-01/2006-01在中山大学林百欣医学研究中心完成。 材料：雄性新西兰兔10只，体质量3.0~3.5 kg，用于制备脱细胞尿道；4~6周龄BALB/cA-nude裸鼠20只，体质量18~20 g，与细胞外基质材料复合体进行体内培育。 方法：取新西兰兔完整尿道，脱细胞后形成细胞外基质材料，切取成体新西兰兔阴茎头约1/2大小，组织块法培养扩增兔平滑肌细胞；之后将尿道海绵体平滑肌细胞种植到脱细胞尿道基质上，将其植入裸鼠背部皮下进行培育。实验分为2组，实验组埋置细胞材料复合体，对照组埋置未接种细胞的单纯脱细胞尿道基质。 主要观察指标：植入后1，2，4，6，8周取材，行大体和组织学及电镜观察细胞材料复合体的生长情况，免疫组织化学鉴定平滑肌细胞的表达。 结果：①大体观察裸鼠背部切口愈合良好，饮食活动正常。植入后1，2周实验组脱细胞基质表面已有少量的组织膜形成； 4周组织膜逐渐增厚，有小血管长入；6，8周脱细胞基质材料逐渐被新的细胞替代。②苏木精-伊红染色可见，随着时间延长，脱细胞材料逐渐被吸收，被各种细胞代替。其中平滑肌细胞最多，并可见大小不等的血管长入基质，部分有形成血窦的倾向；提示复合材料在裸鼠体内逐渐形成类似正常尿道的组织结构。③电镜观察从第4周有血管长入基质，可见较多的平滑肌细胞和内皮细胞及少量的成纤维细胞和巨噬细胞，并有部分平滑肌细胞凋亡。④α-平滑肌肌动蛋白抗体进行免疫组织化学染色后可见有平滑肌细胞生长。 结论：采用组织工程技术可再造出类似于正常尿道的海绵体组织。     

持续低热致深度烧伤的特点及临床治疗

目的对持续低热（45～65℃）所致深度烧伤的致伤原因、发病患者群、临床特点进行探讨。方法对于烧伤后早期人院的42例患者,清创后创面即时移植自体皮片25例,采用创面持续负压吸引后植皮7例,采用皮瓣修复10例。对于人院较晚坏死组织较多的9例患者,均采用负压吸引,肉芽组织生长情况好后,给予创面植皮。对于合并糖尿病的12例患者,控制血糖后行手术治疗。结果植皮32例患者一次植皮成活30例,其中再次手术2例,手术后创面均愈合。10例采用皮瓣修复患者,术后皮瓣均成活。保守治疗2例,经换药2．5个月余治愈。结论持续性低热致伤患者经综合治疗,均可治愈,获得较好的治疗效果。     

组织工程尿道在裸鼠皮下的埋置

背景：由于创伤、先天畸形、肿瘤或手术继发的尿道缺损、狭窄、憩室等病理状况下，需要采用自体组织修复其缺损。目的：验证构建组织工程化尿道的可行性。设计、时间及地点：观察性实验，于2005—01／2006-01在中山大学林百欣医学研究中心完成。材料：雄性新西兰兔10只，体质量3．0～3．5k，用于制备脱细胞尿道；4～6周龄BALB／cA—nude裸鼠20只，体质量18～20g，与细胞外基质材料复合体进行体内培育。方法：取新西兰兔完整尿道，脱细胞后形成细胞外基质材料，切取成体新西兰兔阴茎头约1／2大小，组织块法培养扩增兔平滑肌细胞：之后将尿道海绵体平滑肌细胞种植到脱细胞尿道基质上，将其植入裸鼠背部皮下进行培育。实验分为2组，实验组埋置细胞材料复合体，对照组埋置未接种细胞的单纯脱细胞尿道基质。主要观察指标：植入后1，2，4，6，8周取材，行大体和组织学及电镜观察细胞材料复合体的生长情况，免疫组织化学鉴定平滑肌细胞的表达。结果：①大体观察裸鼠背部切口愈合良好，饮食活动正常。植入后1，2周实验组脱细胞基质表面已有少量的组织膜形成；4周组织膜逐渐增厚，有小血管长入；6，8周脱细胞基质材料逐渐被新的细胞替代。②苏木精一伊红染色可见，随着时间延长，脱细胞材料逐渐被吸收，被各种细胞代替。其中平滑肌细胞最多，并可见大小不等的血管长入基质，部分有形成血窦的倾向；提示复合材料在裸鼠体内逐渐形成类似正常尿道的组织结构。③电镜观察从第4周有血管长入基质，可见较多的平滑肌细胞和内皮细胞及少量的成纤维细胞和巨噬细胞，并有部分平滑肌细胞凋亡。④α-平滑肌肌动蛋白抗体进行免疫组织化学染色后可见有平滑肌细胞生长。 结论：采用组织工程技术可再造出类似于正常尿道的海绵体组织。     

严重烧伤患者早期深静脉置管感染相关分析

大面积烧伤患者早期大量血浆样液体外渗,导致脱水、低血容量性休克、四肢水肿等,需较好的静脉通道保证大量液体及营养物质输入,但患者可供输液的周围静脉少,故常行深静脉置管以保证治疗顺利进行[1],置管后往往并发静脉导管细菌定植或感染.笔者对本单位2005年1月一2009年12月收治的160例严重烧伤后行深静脉置管患者进行调查,分析置管后感染与并发症情况.     

小儿烧伤后中晚期严重肝损害十例

肝损害是烧伤常见的并发症之一,小儿烧伤后中晚期严重肝损害较少见.笔者单位1990年1月-2007年6月收治10例烧伤后中晚期严重肝损害的患儿,现将其治疗情况介绍如下.     

兔肌源性干细胞的生物学特性及表型分析

背景：骨髓间质干细胞作为种子细胞具有巨大的分化潜力和优势，但对于再生障碍性贫血或骨髓源性肿瘤等疾病的应用受限。现已发现肌源性干细胞具备与其相似的优越性，已引起相关领域研究者的注意。 目的：观察兔肌源性干细胞的生物学特性，并对其进行表型分析。 设计、时间和地点：细胞体外观察，于2005-08/2006-03在中山大学附属第二医院医研中心完成。 材料：清洁级1.5月龄新西兰大白兔1只，增殖培养基为DMEM-LG+体积分数0.1胎牛血清+100 g/L马血清，融合培养基为DMEM-LG+2%胎牛血清。 方法：兔麻醉后取大腿肌肉，采用差速贴壁Preplate技术分离培养肌源性干细胞，以Ⅺ胶原酶、dispase蛋白酶及胰蛋白酶分步消化，沉淀用增殖培养基重悬，接种在胶原包被的培养瓶中，该培养瓶为PP1。PP1于 37 ℃、含体积分数为0.05的CO2培养箱中静置过夜，随后将悬液转移到另一个胶原包被的培养瓶，此为PP2。随后同法建立PP3，PP4，PP5，PP6。将PP6接种到6孔板进行融合实验，分为两组：一组使用增殖培养基培养，在汇合度超过50%后继续培养，不传代；另一组使用融合培养基进行培养，汇合度达30%时传代培养。 主要观察指标：收集PP1~PP6，采用流式细胞仪、免疫细胞化学及Western Blot法鉴定细胞表型。通过不同汇合度及不同浓度血清培养，检测PP6融合情况。 结果：PP6细胞 > 80%为desmin+，> 70%为Bcl-2+，> 95%为CD45-，提示为高浓度肌源性干细胞，随着纯化步骤的进行，α-SMA表达逐渐减弱，至高度纯化的PP6时已无 α-SMA表达。PP6在高汇合度（> 50%）或低血清（仅含2%血清）培养时，极易融合成肌管或肌细胞链，骨骼肌肌球蛋白呈阳性表达。 结论：肌源性干细胞具有高水平表达desmin，Bcl-2，极低水平表达CD45，不表达α-SMA的生物学特性，在高汇合度或低血清培养条件下能够多向分化。     

服务器集群技术在医院中的应用

本文以医院信息系统的升级为支点,探讨分析服务器集群技术在医院信息系统中的安装与调试过程,充分认识集群技术给人们带来的便利。     

手部Ⅲ～Ⅳ度烧伤的治疗与康复

目的探讨手部Ⅲ、Ⅳ度烧伤的治疗方法。方法379例（562只手）本着早减压、早手术（切削痂,大张皮片移植或皮瓣覆盖）、少去除、多保留、早锻炼、重康复的原则,对尚未伤及深筋膜以下的Ⅲ度创面,移植中厚皮,对伤及肌腱关节和骨质者,尽可能皮瓣修复。移植成活后,即可开始功能训练和抗瘢痕治疗。结果手各关节功能及感觉良好,外观无明显异常达优者406只手（72%）;关节活动基本正常,外观部分异常达良者96只手（17%）;瘢痕畸形明显或截指,功能基本丧失为差者60只手（11%）。结论对手部深度烧伤早期手术干预,尽可能移植中厚皮或皮瓣修复,结合康复训练,可最大限度恢复手的功能和外形。     

中原地区大面积烧伤休克期补液量调查

目的探讨大面积烧伤休克液体复苏方案。方法随机抽取我院2002年3月~2005年6月大面积烧伤及时复苏(A组)124例和延迟复苏(B组)54例病人,入院后在多指标监测下快速补液,观察神志、血压、心率、呼吸频率、尿量、平均动脉压(MAP)和中心静脉压(CVP)、各种并发症发病率等指标,并收集烧伤后8h、第1个24h、第2个24h补液量与国内通用公式理论计算量相比较。结果烧伤后及时复苏组、延迟复苏组补液量均大于国内通用公式理论计算量。及时复苏组较延迟复苏组血流动力学相对平稳,并发症发生率低。结论国内通用烧伤补液公式满足不了大面积烧伤休克期补液需要,改进补液公式可快速纠正休克,减少烧伤并发症。     

新西兰兔尿道海绵体平滑肌细胞的原代培养及鉴定

目的 为构建新西兰兔组织工程尿道提供种子细胞。方法 取新西兰兔阴茎头，用含10％胎牛血清的高糖DMEM作体外原代培养，并行免疫组织化学法鉴定。结果经10～14d培养后，培养瓶底铺满梭状细胞，免疫组织化学法鉴定确认为兔尿道海绵体平滑肌细胞。结论兔阴茎头平滑肌细胞可在体外条件下生长传代、扩增，可作为构建组织工程尿道的种子细胞。