丙型肝炎病毒1b型NS5A 2209-2248区基因突变与干扰素疗效的关系

目前 ,干扰素仍然是治疗慢性丙型肝炎有效的药物。Ｅｎｏｍｏｔｏ等[1] 研究发现丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ ) 1ｂ型ＮＳ5Ａ2 2 0 9 2 2 48区存在有干扰素敏感决定区 (ＩｎｔｅｒｆｅｒｏｎＳｅｎｓｉｔｉ ｖｉｔｙＤｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇＲｅｇｉｏｎ ,ＩＳＤＲ) ,是独立预测干扰素疗效的预测因子。为此 ,我们对ＨＣＶ 1ｂ型慢性丙型肝炎患者 ,采用干扰素 α治疗 ,结果发现治疗前ＨＣＶＮＳ5Ａ 2 2 0 9 2 2 48区基因突变与干扰素疗效之间存在一定的相关性。现将结果报道如下。材料和方法一、研究对象本研究对象为 1997年 6月至 1998年 3月我院…     

SFTSV糖蛋白Gn重组质粒的构建及其体液免疫原性研究

目的:研究严重发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)糖蛋白Gn的体液免疫原性?方法:将PCR方法扩增的SFTSV糖蛋白Gn基因和密码子优化后Gn基因克隆入载体pJW4303,构建Gn野生型和双优化重组质粒;经酶切和测序鉴定确认为目的质粒后,分别转染HEK293T细胞,Western blot检测糖蛋白Gn的表达;用Gn重组表达质粒及空载体分别免疫BALB/c小鼠,ELISA检测免疫后小鼠血清抗Gn特异性IgG抗体?结果:成功构建Gn重组野生型质粒pJW4303-WSP-Gn和双优化质粒pJW4303-tPA-Gn-opt;Western blot证实pJW4303-WSP-Gn编码Gn可在HEK293T细胞内表达,pJW4303-tPA-Gn-opt编码Gn在HEK293T细胞内表达并分泌到细胞外;ELISA检测免疫后小鼠血清抗Gn特异性IgG抗体证实各重组质粒均能诱导特异性IgG抗体产生,双优化质粒较野生型质粒诱导产生的IgG时间更早?滴度更高?结论:SFTSV的糖蛋白Gn具有良好的免疫原性;和野生型质粒相比,双优化质粒更有利于糖蛋白Gn的表达和分泌,并且具有更好的体液免疫原性?     

乙型肝炎患者957例血清学标志分析

目的　探讨乙型肝炎（ 乙肝） 病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） 血清学标记的表现模式。方法　共９５７ 份乙肝患者血清标本,均以 Ａｂｂｏｔｔ 多功能全自动酶免疫快速分析仪进行检测。以聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ。为表述方便,设定血清病毒学标记检测项目第１ ～５ 项的排列顺序为（１） 乙肝表面抗原（ Ｈ Ｂｓ Ａｇ） ,（２） 乙肝表面抗体（ 抗 Ｈ Ｂｓ） ,（３） 乙肝ｅ 抗原（ Ｈ Ｂｅ Ａｇ） ,（４） 乙肝ｅ 抗体（ 抗 Ｈ Ｂｅ） 和（５） 乙肝核心抗体（ 抗 Ｈ Ｂｃ） ,并以出现阳性项目的序号为该模式的代码。结果　本组血清病毒学标记模式可分为感染期模式组和恢复期模式组,两组共１６ 种模式。感染期模式组以“１４５”和“１３５”模式为主,占全部病例的４７ ％ 。恢复期模式组以“２４５”和“２５”模式为主,占全部病例的３５６ ％ 。随访结果表明,模式改变大致可分为５ 种类型。结论　本组 Ｈ Ｂ Ｖ 血清免疫学标记的模式较为复杂。除了检验误差外,产生少见模式的主要原因有低滴度抗 Ｈ Ｂｃ ,低滴度抗 Ｈ Ｂｓ 等。推测 Ｈ Ｂ Ｖ 血清免疫标志模式转换的顺序依次为ｅ 系统的转换,ｓ 系统的转换,抗 Ｈ Ｂｅ 消失或抗 Ｈ Ｂｅ 和抗 Ｈ Ｂｓ     

应用聚合酶链反应检测南京地区TT病毒感染

目的：了解南京地区TT病毒感染情况。方法：采用巢式PCR方法检测血清标本中TTV－DNA。结果：163例病毒性肝炎患者血清标本中,TTV－DNA总检出率为21.5％（35／163）,其中甲型肝炎13.3％（4／30）,乙型肝炎21.3％（16／75）,丙型肝炎20.0％（3／15）,戊型肝炎5.3％（1／19）,非甲－庚型肝炎45.8％（11／24）。结论：南京地区存在TTV感染,TTV是导致非甲－庚型肝炎的重要病因,TTV可能存在非血源性传播途径。     

HBV DNA疫苗治疗慢性乙型肝炎的实验研究进展

慢性乙型肝炎病毒 (HBV)感染是严重危害人们生命和健康的疾病之一 ,目前对此尚无特效药物。HBV DNA疫苗的出现为慢性 HBV感染的治疗提供了新的途径。本文综述了最近几年治疗性 HBV DNA疫苗在实验动物研究中的一些进展     

慢性单-TT型肝炎病理特征初步研究

目的观察慢性TT型肝炎的病理特征,探讨TTV的致病性.方法9例慢性单一TT型肝炎行肝穿刺术,肝组织一部分经10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,送光镜检查;另一部分经2%戊二醛固定,中性树酯包埋,送电镜检查.结果9例慢性单一TT型肝炎病理和临床诊断基本相符,其病理变化发生率依次为肝细胞水肿、胞浆疏松化、点状坏死、嗜酸性变、嗜酸小体形成等,未见特殊病理改变.光、电镜检查结果可概括为四个方面(1)变性坏死性改变是慢性单一TT型肝炎的主要病理改变,表现为肝细胞不同程度的浊样肿胀、嗜酸性变和点状坏死,部分有碎屑样坏死,未见到桥状坏死;(2)炎性改变肝实质内坏死灶区、汇管区和新形成的纤维间隔内可见到程度不等的炎症细胞浸润,肝窦内Kupffer细胞增生;(3)纤维增生性改变9例慢性单一TT型肝炎中,仅其中1例,肝组织损害较重,部分网状支架塌陷,纤维组织增生明显,形成间隔,但没有形成假小叶;(4)超微结构改变肝细胞普遍存在线粒体肿胀,粗面内质网、滑面内质网肿胀或脱颗粒等.结论慢性单一TT型肝炎的病理改变符合病毒性肝炎的一般特征,TTV可能有致病性,但其致病性较弱     

H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究

目的研发一种具有良好免疫原性的H3N8型马流感血凝素(hemagglutinin,HA)核酸疫苗。方法根据马A型流感病毒A/Equine/Xinjiang/3/08(H3N8)的HA蛋白序列,经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的基因片段,并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJW4303中,构建带有天然信号肽的H3HA核酸疫苗,命名为H3HA/XJ3-08-wt;进一步对HA基因进行修饰,以人组织纤维蛋白酶原激活剂(human tissue plasminogen activator,tPA)取代H3HA天然信号肽,命名为H3HA/XJ3-08-tPA,或切除部分HA的基因片段使之只表达HA蛋白的胞外域,命名为H3HA/XJ3-08-dTM。用这3种重组质粒分别转染293T细胞,蛋白表达经蛋白质印迹检测得到确认。采用电转录法免疫新西兰白兔。ELISA方法检测免疫后兔血清中抗H3HA抗体滴度,血凝抑制实验(hemagglutination inhibition,HI)检测保护性抗体水平。结果 3种H3HA核酸疫苗均可在293T细胞中高效表达,并能够在新西兰白兔体内诱导产生特异性抗H3HA抗体,HI检测到不同水平的保护性抗体。其中以H3HA/XJ3-08-tPA的免疫原性最强。结论新构建的H3N8型马流感血凝素核酸疫苗具有良好的免疫原性,为此类疫苗的进一步研发奠定了基础。     

乙型肝炎病毒核心抗原及Flt3配体双表达核酸疫苗的构建与体外表达

目的:构建可同时表达乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)和Flt3配体(FL)胞外段的双表达核酸疫苗。方法:将HBcAg和FL胞外段的基因用PCR方法扩增并分别引入相应的限制性内切酶酶切位点,然后克隆入真核双表达载体pIRES,获得含双基因片段的表达质粒;再取该表达质粒中的内部核糖体切入位点(IRES)序列和基因片段克隆入pJW4303载体中,获得相应的双表达核酸疫苗,经筛选鉴定后,以293T细胞瞬时表达检测两基因的表达水平。结果:构建成功以pIRES、pJW4303为载体的4种HBcAg和FL胞外段的双表达核酸疫苗,体外表达证实HBcAg和FL胞外段均能高效表达,基因位于IRES上游时表达水平较高。结论:用IRES元件实现了HBcAg和FL胞外段双表达核酸疫苗的构建,pJW4303为载体的核酸疫苗两基因表达水平优于pIRES为载体的核酸疫苗。     

Mutation in the NS5A Region of Chinese HCV-1b Isolates and Its Correlation with Efficacy of Interferon Alpha Therapy

Interferonalpha(IFN-α)hasbeenprovenaneffectivetherapeuticdrugforchronichepatitisCvirus(HCV)infection.However,therateofresponsetoIFN-αtherapyisquitelow,andisevenloweramongthepatientswithHCV1binfection[1].Enomotoetal[2]noticedthatHCVRNApersistedinserumduringtherapyinpatientswithHCV1binfectionthatdidnotrespondtoIFN-α,butthatthedistributionofHCVquasispecieschanged.So,theyhypothesizedthatIFN-αtherapywouldleadtoclearanceoftheinterferon-sensitivequasispeciesleavingbehindtheresistanton…     

猕猴对乙型肝炎病毒核心抗原核酸疫苗的特异性细胞免疫应答

目的 观察乙型肝炎病毒核心抗原核心酸疫苗即ＨＢｃＡｇ核酸疫苗（ｐＪＷ４３０３／ＨＢｃ）免疫猕猴的特异性细胞免疫应答。方法 猕猴分别在第０、２、４、６个月肌肉注射法接种核酸疫苗（ｐＪＷ４３０３／ＨＢｃ）或对照质粒（ｐＪＷ３０３）；ＥＬＩＳＡ法检测猕猴外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），经特异性抗原（ＨＢｃＡｇ）刺激后，培养上清中人白细胞介素－４（ＩＬ－４）和干扰素γ（ＩＦＮ－γ）以及猕猴血清中抗－ＨＢｃｌ