乙型肝炎病毒基因分型与临床的相关性探讨

目的探讨本地区乙肝病毒基因型的分布状况及其与临床病情的相关性。方法收集无抗病毒治疗史的慢性乙型肝炎病人、慢性重型肝炎病人、拉米夫定治疗48周末达有效者、YMDD变异阳性的慢性乙型肝炎病人以及1896位点变异阳性的慢性乙肝病人共120例,采用微板核酸杂交法(PCR ELISA)技术进行HBV-DNA基因分型,比较各组基因型分布特点和不同基因型的临床资料。结果 120例病人中B型22．5％,C型65．8％,BC混合型10．0％;慢性重型肝炎组(B 组)与慢性肝炎轻中度组(A组)相比BC混合型明显增多,以C型及BC混合型为主,并显示统计学差异;拉米夫定治疗48周末达有效人群中(C组)B型比例较高,而1896位点变异组(E组)则显示C型比例更高,但与A组相比基因型的分布并未提示统计学差异。B、C基因型间病毒载量相似,C基因型病人血清转氨酶高于B基因型,差异有统计学意义(P<0．05)。结论本地区乙肝病毒绝大多数为B型和C型,且以C型为主;C型和BC混合型可能与乙型肝炎肝组织损害加重有关;拉米夫定疗效、YMDD变异以及1896变异与HBV基因型之间未显示必然的联系。     

乙型肝炎病毒表面抗原变异株对我国16家ELISA检测试剂的影响研究

目的构建包含不同变异位点的HBV表面抗原表达载体,体外表达评价HBVS区不同位点突变对于我国乙肝表面抗原ELISA检测的影响。方法以C基因型野生株HBV的表面抗原基因为模板,采用定点诱变方法引入不同位点的变异序列,分别构建包含S区的8个突变位点表达载体(118Met,122Asn,123Ala,129Asn,141Glu,145Arg,145Lys,154Thr),体外瞬时表达后用国内16家供应商提供的HBV表面抗原ELISA检测试剂盒(A-P)检测,并进行结果比较。结果经鉴定、测序比对,成功构建HBV表面抗原突变表达质粒共8株。分别转染293T细胞后,上清中均检测到HBsAg的表达,不同供应商提供的检测试剂的反应格局及检测灵敏度各不相同。结论 HBV表面抗原变异对国内ELISA检测存在显著影响,不同厂商对变异株检测有着不同的检测谱,适当选择不同的组合能有效提高检测覆盖谱。同时重组表达变异表面抗原是进行ELISA试剂评价的有效方式。     

健康人单核细胞来源树突状细胞Toll样受体的表达模式分析

目的体外诱导健康人外周血单核细胞来源的树突状细胞（dendritic cell,DC）,动态定量分析DC表达Toll样受体（TLRs）的种类,探讨TLRs的表达水平与DC成熟的相关性。方法用羟乙基淀粉（HES）分离健康人外周血单个核细胞（PB-MC）,经重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）、重组人白细胞介素4（rhlL4）诱导培养DC,于培养5d加或不加肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和干扰素一仅（IFN一仅）,诱导其为成熟与未成熟两种类型的细胞。分别于3、5、7d用特异性单克隆抗体（单抗）标记未成熟DC（immature DC,imDC）和7d成熟DC（mature DC,mDC）,在流式细胞仪（FACS）上检测,用CellQuest软件分析细胞表面共刺激分子（B7—1、B7—2）和MHCII类分子以及细胞内、外TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR9的表达百分率。结果健康人TLR3在imDC细胞膜表面的表达高于细胞内,并随着培养时间的延长有所下降;TLR4则主要表达在imDC细胞膜外,并伴随着干预性成熟而下降;TLR7在imDC细胞内的表达高于细胞表面,并随着imDC生长时间延长而逐渐增加,DC成熟时表达下降;TLR8和TLR9细胞内外均有表达,但细胞内稍高于细胞外,随DC成熟而表达增加。结论健康人单核细胞来源的DC表面TLRs的表达具有多样性,TLRs在DC的不同分化阶段表达模式不同,这种差异可能是DC通过TLRs识别病原体相关分子模式（pathogen associated molecular pattern,PAMPs）的基础,从而有效地调节或控制固有免疫与获得性免疫。     

医疗安全与病人安全文化

医疗安全指的是病人在医疗过程中不发生允许范围以外的心理、机体结构或功能上的障碍、缺陷或死亡。医疗安全是一切医疗活动的基本要求和准则。病人安全文化是指医疗机构为实现病人安全而形成的员工共同的态度、信念、价值观及行为方式。病人安全文化是医疗安全的思想基础、行动依据和内在动力。作者从文化、技术、制度和监管4个层面深入分析医疗安全隐患的成因,提出病人安全文化建设势在必行。强调从领导者重视和亲身参与,坚持以病人为中心的服务宗旨,坚决落实各项安全措施、正确对待和处理医疗安全不良事件4个方面,构筑医疗安全的牢固防线。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的测定分析

目的：探讨淋巴细胞亚群(T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及T细胞亚群)在慢性乙型肝炎患者外周血中的变化意义。方法：通过流式细胞技术比较分析56例慢性乙型肝炎患者及30例键康正常人的外周血淋巴细胞亚群。结果：与正常对照组相比，慢性乙型肝炎患者组外周血CD3^ CD4^ 细胞降低，淋巴细胞CD4^ /CD8^ 比值下降。结论：慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能紊乱，存在辅助性T细胞减少及辅助性T细胞和细胞毒性T细胞比例失衡等异常表现。     

江苏省三级综合医院评审标准实施细则（2017版）特点解析及启示

《江苏省三级综合医院评审标准实施细则（2017版）》（简称《新标准》）总结了2012版实施以来的经验与不足，对部分章节进行了调整，对部分内容进行了修改、充实，融入了许多新理念、新指标、新方法，进一步体现了抓内涵建设的指导思想。《新标准》的出台，昭示在当前新形势下，医院评审仍然是加强医院管理，促进改革任务落实的重要抓手。     

人兽共患病:感染病科医师的必修课

根据世界卫生组织和联合国粮食及农业组织的定义,人兽共患病是指在人类和脊椎动物之间自然感染与传播的疾病,即人类和脊椎动物由共同病原体引起,在流行病学上又有关联的疾病.世界上已经证实的人兽共患感染性疾病有200多种,在我国已发现的也有100余种.20世纪70年代以来,全球范围的新出现传染病(emerging infectious diseases,EII))和重新出现传染病(reemerging infectious diseases,R-EID)有60多种,其中半数以上是人兽共患病.因此,人兽共患病已经成为全世界共同关注的公共卫生问题[1].     

人宫颈癌基因蛋白在人肝细癌中的表达及其临床意义

人宫颈癌基因(HCCR)是新近确定的一种癌基因,定位于人染色体12q,编码HCCR-1和HCCR-2两种蛋白。HCCR不仅在宫颈癌组织中表达,而且在人其他肿瘤如白血病、淋巴瘤、乳腺癌、肾癌、胃癌、结肠癌、肝癌和子宫癌中均有过度表达,可作为肝癌及乳腺癌诊断的标志物。本研究通过制备HCCR蛋白多克隆抗体,检测人肝细胞癌及肝癌细胞株中HCCR的表达,旨在了解HCCR的表达与肝细胞癌临床病理特征之间的关系。     

新型乙型肝炎病毒核心区核酸疫苗的免疫原性研究

目的观察新型乙型肝炎病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)核酸疫苗的免疫原性。方法应用新型人体应用载体质粒pSW389l构建HBcAg核酸疫苗(pSW3891／HBc)，对照组和实验组Balb／c小鼠分别以基因枪法免疫对照载体质粒(PSW3891)和HBcAg核酸疫苗，采用酶联免疫吸附试验检测抗HBc，乳酸脱氢酶(LDH)释放测定法检测小鼠HBcAg特异性cTL杀伤活性。结果HBcAg核酸疫苗可在体外293T细胞中高效表达，免疫小鼠后可产生高滴度抗HBc(1：97200)，免疫鼠脾细胞HBc特异性CTL杀伤活性达73．25％。结论新型HBcAg核酸疫苗在Balb／c小鼠实验中表现出良好的体液和细胞免疫原性。     

干扰素-α真核表达载体的构建及抗肿瘤研究

目的：构建干扰素真核表达载体及干扰素对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat的作用。方法：将编码干扰素的基因片段插入到真核表达载体pCI中，构建的重组体转化大肠杆菌HB101，经筛选鉴定后，再转染哺乳动物细胞，检测其表达产物。(MTT)法测定梯度浓度的干扰素—α对Jurkat细胞增殖起杀伤作用。结果：电泳显示目的基因片段已正确地插入到真核表达载体中．其阳性克隆转染哺乳动物细胞后的产物可表达干扰素的活性及对Jurkat的作用。结论：干扰素—α真核表达载体构建成功。