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目的克隆长双歧杆菌NCC2705中ATP结合蛋白BL0034的基因,利用大肠杆菌表达并纯化GST-BL0034融合蛋白,测定其结合ATP的活性。方法以长双歧杆菌NCC2705基因组为模板PCR扩增BL0034基因,双酶切后连接到pGEX-4T-1表达载体上,转入大肠杆菌BL21中表达;用谷胱甘肽-Sepharose 4B树脂对可溶性的GST-BL0034融合蛋白进行纯化,并用Western印迹验证。结果将BL0034基因克隆至质粒pGEX-4T-1,构建表达载体pGEX-4T-1-BL0034。BL0034经0.05 mmoL/L IPTG诱导,16℃过夜表达,SDS-PAGE可见相对分子质量约为82×103的可溶性表达条带;亲和纯化GST-BL0034,Western印迹结果为阳性。对纯化后的融合BL0033蛋白结合ATP的能力进行了定量测定,每毫克BL0034蛋白能结合约40 nmol/L ATP。结论成功克隆了BL0034蛋白的基因,表达并纯化GST-BL0034蛋白,证实了BL0034与ATP具有较强的结合能力,为进一步研究长双歧杆菌NCC2705 BL0034蛋白的功能奠定了基础,为阐明其在果糖ABC转运系统中如何通过水解ATP产生能量提供了前提。 相似文献
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<正>1992年全球最著名的疾病预防控制机构——美国疾病控制中心(Centers for Disease Control)在其名称中增加预防(Prevention)后,疾病预防控制(Disease prevention and control)一词开始进入人们视野。2002年我国预防医学科学院及各级防疫站陆续更名为疾病预防控制中心后,疾病预防控制开 相似文献
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痢疾菌体内诱导基因表达文库的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 构建筛选痢疾菌福氏2a体内诱导基因的融合基因表达文库。方法 以自杀载体pGP704为骨架,用氯霉素乙酰转移酶基因作为报告基因,构建了用于筛选体内诱导基因的载体pGP-cat。把痢疾菌福氏2a基因组DNA的随机酶切片段(0.6-1kb)亚克隆到pGPcat载体报告基因上游的BglⅡ位点,构建了融合基因文库。结果 与痢疾菌福氏2a2457T结合转移后,获得融合基因表达文库。以氯霉素为选择标记,经过体外初步筛选,得到3.2%的具有氯霉素抗性的菌株。结论 构建的融合基因表达文库适用于筛选福氏2a痢疾菌的体内诱导基因。 相似文献
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目的 通过北戴河卫生监督保障,总结工作经验,提高保障能力和水平.方法 根据历年卫生监督保障情况,结合座谈调查,分析危害因素并进行总结.结果 总结出5点主要做法:(1)完善工作方案预案,拓展监督内容;(2)建立卫生监督模式,开展培训演练;(3)建立公共卫生监测体系,开展危害因素分析;(4)加强监督检查力度,力求做细做精;(5)开展健康教育,创建健康军营文化.结论 总结出的做法对确保卫生监督保障质量和水平具有积极的意义. 相似文献
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军队科研院所和技术院校承担着教学、科研等职能任务,拥有较为完备的科研支撑条件和较强的科技人员队伍,承担了大量国家、军队和地方的科研课题,取得了一大批科技成果,如何将装备类成果转化为生产力和战斗力,成为科技管理部门亟待解决的问题.本文通过问卷调查方式,调查了军队科研院所和技术院校未转化装备类科技成果80项,应用层次分析法,系统的分析了制约装备类科技成果未转化的因素,提出了主要解决措施. 相似文献
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目的研制一种重大活动现场卫生保障专用的便携式检测箱组,提高重大活动保障工作规范化水平。方法总结多年工作经验,从实际工作流程需要出发,通过风险评估,得出现场需要检测的项目和工作内容,筛选项目方法,进行组合配套,并研发配套的专用计算机管理软件。结果与结论研制的重大活动保障专用卫生监督箱满足工作人员执行相应卫生监督监测任务时对携行装备的全部需要,配套的专用管理系统可协助完成现场保障工作标准化业务流程。本研究对弥补重大活动卫生防病保障适用装备欠缺、规范卫生监督工作程序、提高卫生监督工作人员办公效率、提升军队卫生保障工作水平具有明显意义。 相似文献
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军队基层健康教育现状调查 总被引:5,自引:0,他引:5
目的掌握军队基层健康教育实施情况及官兵健康知识、态度、行为现状,为有针对性的指导部队健康教育和健康促进工作提供依据。方法采用多阶段整群抽样方法,从军队各军区、各军兵种抽取56个基层部队的4263名官兵,用自行设计的“全军健康教育调查问卷”对其所在单位的健康教育实施及个人健康知识、态度、行为情况进行调查。结果分别有80.49%、69.30%、69.99%、54.36%和22.80%的人依次接受了2小时以上新兵健康教育课、2小时以上的继续健康教育课、住院病员健康教育、2小时以上的军校健康教育课和专题健康教育课;官兵健康知识总知晓率为76.70%,健康态度正确持有率为90.35%;健康行为持有率为60.57%;兵龄、职别、兵源地和学历是影响部队官兵健康知识知晓率的因素。结论军队基层健康教育在健康知识的传播方面成效显著,专题健康教育、康复健康教育、继续健康教育时间保证不足。 相似文献
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产超广谱β-内酰胺酶宋内志贺菌的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 了解宋内志贺菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型别.方法 K-B法测定5株宋内志贺菌对常用抗菌药物的耐药性,CLSI推荐的确证试验进行产ESBLs菌株的表型鉴定,并进行接合试验;采用TEM、SHV、CTX 3种β-内酰胺酶基因通用引物进行PCR扩增和DNA序列分析;同时进行指纹分析脉冲场检测.结果 5株宋内志贺菌对青霉素类、第一、二代头孢菌素、第三代头孢菌素中的头孢噻肟及庆大霉素、磺胺类显著耐药,对喹诺酮类抗菌药物中度敏感,对头孢他啶、四代头孢、阿米卡星、美罗培南敏感;这些菌株的ESBLs基因型均为CTX-M-15,CTX-M-15编码基因型可接合方式发生水平转移;4株菌株的PFGE谱型相同,1株不同.结论 5株宋内志贺菌产生CTX-M-15型ESBLs,引发对多种抗菌药物耐药,并存在克隆传播,需要加强检测. 相似文献