CD28/CD80和CD2/CD58活化PBLs作用肝癌细胞的表型分析与TCR Vβ基因亚家族的优势取用

目的　采用抗ＣＤ２８ ,ＣＤ８０ ,ＣＤ２ 及ＣＤ５８ 分别刺激健康人ＰＢＬｓ 后作用肝癌细胞,对作用前后ＰＢＬｓ 的表型变化及ＴＣＲＶβ基因亚家族的表达水平进行探讨．方法　用ＦＡＣＳ 分析作用肝癌细胞前后ＰＢＬｓ 表型变化,并用ＲＴＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ 印迹分析其ＴＣＲ Ｖβ１ ～２０ 的表达水平及特征．结果　健康人ＰＢＬｓ 作用肝癌细胞后ＣＤ３ 和ＣＤ８ 分子表达比作用前明显增高,而ＣＤ４ 分子无显著变化． 健康人ＰＢＬｓ 分别加ＩＬ２ , ＰＨＡ, 抗 ＣＤ３ 和 ＣＤ３ ＋ ＣＤ２８ , ＣＤ２８ ＋ ＣＤ８０ ,ＣＤ２ ＋ ＣＤ５８ 作用肝癌细胞（ＢＥＬ７４０２） 前表达水平平均约５ ％ ,作用ＢＥＬ７４０２ 后表达水平约１３ ％ ～２５ ％ ,其特征为Ｖβ７增高．结论　在癌抗原的参与下,ＭｃＡｂ 共刺激的Ｔ 细胞活化,ＴＣＲ接受ＡＰＣ 提呈的相应抗原的刺激,具有该ＴＣＲ 的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的Ｔ 细胞克隆,发挥其识别和杀伤癌细胞的作用．     

肝细胞癌患者偏移免疫治疗前后T细胞亚群分析

肿瘤免疫反应是涉及各种免疫细胞和细胞因子（ＣＫ）以及它们之间相互作用的复杂过程,这个过程大致可以分为相互联系、交错进行的两个阶段,即诱导阶段和效应阶段．诱导阶段包括对抗原的识别、免疫细胞的增殖和活化．在免疫反应的诱导阶段,以辅助Ｔ细胞（Ｔｈ）的活化为...     

低位直肠癌保肛手术60例治疗体会

目的探讨直肠全系膜切除联合双器械吻合在低位直肠癌保肛术中应用效果及其实用性和安全性。方法回顾性分析2010年1月至2013年12月我院60例用全直肠系膜切除加双吻合器行保肛根治手术的临床资料。结果 60例均保肛成功,无手术死亡病例(其中32例行预防性造瘘术)。术后共发生并发症8例(13.3%),吻合口漏2例(3.3%),均为未行预防性造瘘术患者。所有并发症经保守治疗后均治愈。术后一年内局部复发3例(5%)。结论全直肠系膜切除联合双器械吻合行低位直肠癌保肛术不仅提高了保肛率且降低了局部复发率,是一种安全有效的手术方式。     

TCRVβ7.1转基因治疗多西他赛联用对MCF-7细胞的体外杀伤作用

目的 观察TCRVβ7.1基因修饰的T淋巴细胞与化疗药多西他赛联用对乳腺癌细胞株MCF-7的体外杀伤作用.方法 脂质体介导进行基因转染,流式细胞术检测TCRVβ7-1基因表达及基因修饰的T淋巴细胞作用后乳腺癌细胞MCF-7的调亡率,MTT法检测TCRVβ7-1基因修饰的T淋巴细胞与多西他赛对MCF-7的杀伤活性,Burgi修正公式评价药物联合应用的细胞杀伤效果是否有协同作用.结果 TCRVβ7-1基因修饰的T淋巴细胞与化疗药多西他赛联用对乳腺癌细胞MCF-7细胞杀伤效果有明显的协同作用,且协同强度随多西他赛J浓度的降低而增强,序贯给药分析显示两种给药顺序对协同作用没有显著影响.结论 TCRVβ7-1基因修饰的T淋巴细胞与化疗药多西他赛联用对乳腺癌细胞MCF-7有明显的协同作用.     

侧卧推臀旋腰法治疗腰椎后关节错缝165例报告

通过运用侧卧推臀旋腰法治疗腰椎后关节错缝１６５例患者，结果痊愈１２１例，显效４０例，好转３例，无效１例，总有效率为９９．４％。认为其符合力学原理，其简便，易掌握，安全可靠，省力，定位准，效果佳。     

侧卧推臀旋腰法治疗腰椎后关节错缝165例报告

侧卧推臀旋腰法治疗腰椎后关节错缝１６５例报告黄树林北京空军总医院理疗科（１０００３６）关键词：腰椎后关节／骨错缝，手法／治疗腰椎后关节错缝是指腰椎之间上、下小关节的接触面因外伤、劳损而发生微小错位，导致腰痛及活动功能障碍。其治疗一般药物难以奏效。因此...     

用DNA-DNA杂交检测脐血HCMV基因

通过核酸分子杂交检测脐血HCMV—DNA的阳性率为30.4％,从而可较为准确地确定HCMV经胎盘的传播情况,检测脐血的HCMV感染可除外出生时经产道所致的HCMV感染,并为HCMV研究的先天性感染提供了一个可靠的证据,并可及早对感染HCMV的新生儿进行随访、观察、予以早期治疗。     

HSV-2感染人外周血淋巴细胞后TCRVβ基因片段的选择性扩增

T细胞受体（TCR）Vβ基因 1—20亚家族在识别和杀伤病毒及肿瘤抗原方面各自有着重要的作用。本研究采用单纯性痢疾病毒（HSV-2）感染正常人的外用血淋巴细胞（PBLs）后发现TCR Vβ2,6,7,8基因在体外选择性扩增,而用 HSV-2攻击生殖器单纯疱疹性皮肤病患者不同病程时期的 PBLs时发现 TCRVβ基因的表达水平随病程不同而改变。结果提示Vβ7,8在识别HSV-2时呈选择性扩增而限制 HSV-2的增殖。     

肿瘤抗原活化T细胞体外模型的建立及其免疫效应研究

目的建立体外肿瘤抗原活化T细胞模型，研究活化后T细胞的功能特点与分化方向。方法将肝癌BEL-7402细胞与健康人外周血单个核细胞（PBMC）和协同刺激分子抗CD3、CD28单抗共培养（初次刺激组），或与经肝癌细胞刺激的PBMC共培养（再次刺激组），共培养时间分别为24、48、72h。另设靶细胞对照组和PBMC对照组。各组实验均设6孔。以流式细胞仪分析PBMC经肝癌细胞刺激后CD45RO＋T细胞比例变化；MTT法检测活化T细胞对肝癌细胞的杀伤率；双抗体夹心ELISA法检测活化T细胞IFN-γ，和IL-4分泌水平；流式细胞仪分析T细胞表面Fas配体表达和T细胞受体（TCR）Vβ亚家族表达水平，并比较初次刺激组与再次刺激组T细胞免疫效应的差异。结果健康人PBMC在肿瘤抗原和协同刺激分子作用下，CD45RO＋T细胞比例逐渐上升，共培养72h时为（16．1±0．9）％，明显高于PBMC对照组[（2．4±0．3）％，P〈0．05]。活化T细胞对肝癌细胞的杀伤率随共培养时间的延长而增大[24h为（28．4±6．7）％、48h为（60．4±6．2）％、72h为（78．0±9．3）％]；IFN-γ，分泌水平升高，共培养48h时为（932±117）ng／L，明显高于PBMC对照组[（157±30）ng／L，P〈0．05]：T细胞表面FasL表达增加至（8．1±1．8）％，明显高于PBMC对照组[（0．5±0．2）％，P〈0．01]；肿瘤抗原刺激后，TCRVβ的表达水平与PBMC对照组相比有所增加。再次刺激组CD45RO＋T细胞比例、对肝癌细胞的杀伤率、IFN-γ分泌水平及FasL表达水平均明显高于初次刺激组。结论成功建立了体外肿瘤抗原活化T细胞模型。活化T细胞具有明显的免疫效应，并向Th1和Tc1方向分化；再次接触相同抗原时，其免疫效应更为迅速、强烈，表现出一定的记忆特性。