小鼠腹腔巨噬细胞与树突状细胞协同抗瘤效应

目的 :观察巨噬细胞 (Mφ)与树突状细胞 (dendriticcell,DC)对H2 2肝细胞瘤、CT2 6结肠腺癌小鼠协同抗肿瘤免疫作用。方法 :腹腔荷H2 2 (1× 10 6)昆明鼠随机均分成 :①H2 2组、②H2 2 +Mφ组、③H2 2 +DC组、④H2 2 +Mφ +DC组 ,按组别腹腔分别注入Mφ和 (或 )H2 2脉冲致敏DC ;腹腔荷CT2 6 (1× 10 4)BALB/C小鼠以双向有序二因素检测 (9格方格表 )设计 ,治疗鼠同时注射相应数量的Mφ和CT2 6脉冲致敏DC ,每鼠的Mφ和DC呈不同组合。 1周后均强化 1次 ,所注入数量同第 1次。结果 :H2 2组小鼠 38d内均死亡 ,死亡的中位时间为 2 9d ;而H2 2 +Mφ组和H2 2 +DC组均死亡 3只 ,死亡的中位时间分别为 37d ,36d ;H2 2 +Mφ +DC组在实验观察 6 0d内 ,未出现腹水 ,无一死亡 ;荷瘤一段时间后 ,前 3组小鼠静脉血粒细胞 /淋巴细胞比值进行性增大 ,免疫细胞数量减少。荷CT2 6小鼠生存时间行免疫治疗比未免疫治疗延长 ,单用DC或Mφ呈疗效 剂量依赖性 ,高剂量Mφ和DC合用与DC或Mφ单用疗效差异无显著性。结论 :DC、Mφ细胞均能提高机体抗瘤能力和生存期 ,有明确的量效关系 ;DC抗原递呈功能明显大于Mφ ;DC、Mφ的协同抗瘤作用随不同瘤细胞株而有差异     

运用非线性编辑系统制作医学示范教学片

通过介绍非线性编辑系统的配置以及应用非线性编辑系统制作医学示范教学片的过程 ,探讨了非影视专业的教师自行采集影片资料的方法及示范教学片的组稿、拍摄、剪辑、刻录等方面的规律和技巧。提出了示范教学片的制作必须遵循客观、真实、适合教学规律的观点。     

二甲亚砜对人食管癌Eca109细胞细胞周期及DNA聚合酶β表达的影响

目的研究二甲亚砜(DMSO)对人Eca109细胞细胞周期及DNA聚合酶β(polβ)表达的影响。方法用1．5％DMSO处理Eca109细胞，流式细胞仪分析细胞周期的改变，RT—PCR法检测polβ表达水平的变化。结果DMSO处理后的Ecal09细胞，polβmRNA表达明显下调，且细胞周期明显改变，G1／G0期细胞增多，S期细胞减少。结论DMSO可抑制Eca109细胞polβ的表达，使Eca109细胞生长停滞于G1／G0期。     

肿瘤的多基因研究

人类基因组计划的完成 ,使我们对基因的研究从理论研究阶段进入到实际应用阶段即开发性研究阶段。即研究模式和研究重点必须发生转变。概括地说 ,一是由结构研究转向功能研究 ;二是由单基因研究转向多基因研究。人类基因组的全部ＤＮＡ序列的报导[1～ 2 ] 标志着人们试图了解人类所有疾病的分子机制这一时代的开端。尽管所需时间尚不确定 ,其期限目前来讲还是清楚的。随着人们对分子医学的逐步了解 ,临床将从对疾病进行传统的治疗转向以分子分类为基础的治疗。届时 ,医生会开出既可提高疗效又能减轻毒性作用的理性设计的药物。这种新疗法在…     

突发性耳聋、梅尼埃病的甲皱微循环和血液流变学初步观察

选择突发性耳聋（突聋）患者４０例，梅尼埃病３０例，均于清晨空腹抽血作血液流变学检查，同时观察其甲皱微循环情况。选择１２５例健康人作为对照组，均作甲皱微循环和血液流变学的各项检查。结果显示：突聋和梅尼埃病组的甲皱微循环血管袢与对照组相比，最有意义的是袢顶明显增宽及异常袢出现比率明显增加（Ｐ＜０．００１），并且有２／３患者的血管袢属于重度异常；血流状态二者均属于粒流或粒缓流，红细胞呈粒团或絮团状，所以导致血流速度变慢，与正常人相比差异明显（Ｐ＜０．００１）。说明该类患者微血管与正常人相比有明显异常。…     

曲古菌素A对食管癌EC1细胞增殖和细胞周期的影响及其分子机制

目的:探讨不同浓度曲古菌素A对食管癌细胞系EC1 细胞增殖、细胞周期的影响及其对细胞周期调控基因p21 WAF1/CIP1 表达的影响. 方法:用0.3,0.5,1.0 μmol/L 的TSA 处理EC1 细胞,MTT 检测TSA 作用24 、48 h 对EC1 细胞的抑制作用,流式细胞仪检测0.3,0.5,1.0 μmol/L 的TSA 作用24 h 后EC1 细胞周期的改变,Western blot 法检测p21 WAF1/CIP1 变化. 结果:TSA 在0.5 μmol/L 以上时对EC1 细胞有抑制作用;0.3 μmol/L TSA 处理细胞后细胞周期与对照组相比,无明显变化;0.5 μmol/L TSA 处理EC1 细胞后,G0/G1期细胞较对照组明显增加,S 期细胞较对照组明显减少(74.56% ±1.34% vs 62.12%±0.52%;14.52%±1.81% vs 27.50%±0.66%,均P <0.05);0.5,1.0 μmol/L TSA 处理细胞后p21 WAF1/CIP1 表达明显增加(均P<0.05). 结论:一定浓度的TSA 对人食管癌细胞EC 具有的增殖抑制作用,引起EC1 细胞发生G0/G1 期阻滞,其部分机制与p21 WAF1/CIP1 上调有关.     

转染pcDNA3-hCEA的人树突状细胞抑制MGC803裸鼠移植瘤的生长

目的:探讨转染癌胚抗原基因pcDNA3-hCEA的人树突状细胞(DC)对胃癌细胞MGC803裸鼠移植瘤生长的影响. 方法:采用细胞因子rhIL-4和rhGM-CSF诱导培养法制备人外周血DC,并用Lipofectine向人DC转染pcDNA3-hCEA. RT-PCR检测转染人CEA真核表达质粒的表达. 使用DC(pcDNA3-hCEA)疫苗体外诱导人T淋巴细胞靶向性杀伤反应,并在体内实验中观察DC(pcDNA3-hCEA)对MGC803在裸鼠上致瘤性的影响. 结果:针对特定引物DC(pcDNA3-hCEA)在588 bp处有CEA片段的表达;DC(pcDNA3-hCEA)能够诱导的人T淋巴细胞靶向性杀伤活性(%),在效靶比分别为10∶ 1,20∶ 1,40∶ 1时的结果为19.4±3.8, 24.7±3.7, 38.1±5.4;DC(pcDNA3-hCEA)能显著抑制MGC803的生长,其肿瘤生成日期较对照组延长(中位数10 d vs 6 d, n=5),瘤体生长速度较对照组缓慢,d 23瘤体体积明显小于对照组[(0.24±0.10) cm3 vs (0.65±0.17) cm3, (1.36±0.42) cm3, n=5, P<0.05]. 结论:转染pcDNA3-hCEA的人DC能有效抑制MGC803在裸鼠体内的生长.     

小鼠骨髓树突状细胞pcDNA3-hCEA转染疫苗的抗瘤作用

目的:将pcDNA3-hCEA转染小鼠骨髓树突状细胞 (DCs),观察其诱导BALB/c小鼠对CT2 6(hCEA⁺)的抗肿瘤免疫效应。方法:采用rmGM-CSF和rmIL-4体外诱导培养小鼠骨髓DCs;构建真核表达质粒pcDNA3-hCEA;并用lipofectamine将其转染DCs,制备DCs(pCDNA3-hCEA)疫苗;同时制备CT2 6(hCEA⁺);采用RT-PCR检测DCs(pCDNA3-hCEA)中CEAmRNA的表达,采用放射免疫法检测DCs(pCDNA3-hCEA)培养上清中CEA的含量;使用DCs(pCDNA3-hCEA)疫苗体外诱导小鼠同种异体T淋巴细胞靶向性杀伤。采用DCs(pcDNA3-hCEA)疫苗预防免疫BALB/c小鼠,观察其对于荷临界致瘤量CT2 6(hCEA⁺)小鼠的抗肿瘤效应。结果:经G₄₁₈筛选,DCs(pCDNA3-hCEA)有14 %的获得率;RT-PCR检测表明DCs(pCDNA3-hCEA)内CEAmRNA呈阳性表达;放射免疫法检测表明DCs(pCDNA3-hCEA)能微量表达人CEA;DCs(pCDNA3-hCEA)能够有效诱导CEA靶向免疫杀伤。DCs(pcDNA3-hCEA)疫苗延长荷CT2 6(hCEA⁺)瘤小鼠生存期1周至 4周。结论:编码肿瘤抗原基因的真核表达质粒转染的树突状细胞,能够诱导较强的特异性抗肿瘤免疫效应.     

人野生型DNA聚合酶β在NIH3T3细胞中的定位

目的：研究人野生型DNA聚合酶β(wtDNA polβ)在NIH3T3细胞内的定位。方法：将携带人wtDNA polβ的真核绿色荧光表达载体pEGFP—C3—polβ,用脂质体介导的方法转染NIH3T3细胞株,用荧光倒置显微镜观察转染细胞,观察wtpEGFP—C3—polβ融合基因表达。以转染空质粒pEGFP—C3的NIH3T3细胞为对照。结果：转染细胞均有GFP表达,说明转染成功,转染pEGFP—C3—polβ的细胞胞核荧光强度较胞浆强,而空质粒转染细胞胞浆胞核荧光强度无差别。结论：wtDNA polβ在NIH3T3细胞中定位于胞核内。     

PBL教学模式在病理生理实验教学中的应用

目的:探讨在病理生理学实验教学中开展以问题为基础的学习教学方法(Problem-Based Learn-ing,PBL)的必要性。方法:以08级临床医学系七年制大三医学生作为研究对象,分为实验组和对照组,实验组实施PBL教学,对照组实施传统教学。实验课结束之后,学生独立书写实验报告,由教师进行评分,对比两者期末考试成绩,并对学生进行问卷调查。结果:PBL组实验报告成绩和期末考试成绩均高于传统教学组。调查结果实验班认可率高于对照班,P<0.05。结论:病理生理学实验中开展PBL教学,对提高学生学习兴趣,培养问题意识、提高分析问题、解决问题的能力,发挥其主观能动性,培养其临床思维具有重要的意义,是培养高素质优秀医学人才的重要途径之一。