SARS患者继发细菌性感染菌型及耐药性研究

目的 探讨SARS患者继发细菌性感染的发病机理、病原菌菌型分布及耐药现状。方法对本院收治38例SARS继发细菌性感染患者的痰液等标本中分离的55株细菌进行菌型分类，体外作MIC药敏试验并分析药敏结果。结果 共分离出55株细菌，其中革兰阴性杆菌25株(非发酵菌20株)，革兰阳性球菌20株(凝固酶阴性葡萄球菌13株)，白色假丝酵母菌10株；耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCoNS)9株。非发酵菌对三代头孢、四代头孢抗生素耐药率高达58．8％，白色假丝酵母菌对氟康唑均敏感。结论SARS患者继发细菌性感染以非发酵菌为主，凝固酶阴性葡萄球菌次之。症状重者出现菌型变化或二重感染，菌群失调后有白色假丝酵母菌感染者；SARS患者继发细菌性感染对抗生素的耐药率较高，且可能发生菌型变化，应引起临床重视。     

动态分析铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性

目的探讨铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性。方法用法国生物梅里埃全自动微生物鉴定/药敏V ITEK 32系统对PA的实验资料进行分析,统计分析其耐药性。结果多重耐药性PA分离率逐年上升,其耐药率也逐年上升;从2004年1月开始出现泛耐药的PA,至2005年12月已出现泛耐药PA 43株,其M IC值均有明显增加。结论PA多重耐药十分严重。     

23株多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌感染的实验和中西医结合治疗分析

目的:分析多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性及中西医结合治疗的疗效。方法:用全自动细菌鉴定/药敏VITEK32系统对23株多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌的实验资料进行分析,并调查与实验菌株相对应的临床用药情况,观察中西医结合治疗的疗效。结果:多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌分离率逐年增加,其耐药率明显增加;联合应用抗生素及辅助应用中药后,由多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌感染导致的死亡率为23.5%。结论:多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌引起的感染用中西医结合治疗效果较好。     

检验分析前质量管理策略研究与实施

检验过程可分为分析前、分析中、分析后三个环节,其中分析前工作主要由临床医护人员完成.作为检验质量管理的重要环节,分析前包括的步骤多、牵涉的人员范围广,质量控制存在较大的漏洞[1].研究表明,在实验误差中,分析前错误占71%[2].临床反馈不满意的检验结果中,有80%的报告最终可溯源到标本不符合要求[3].临床实验室为了降低分析前差错率,通过标本采集手册、宣传栏等向患者和医护人员介绍检验相关的注意事项,但往往事倍功半,达不到预期的效果.     

pPICZαA-CDK2重组质粒的构建及表达

目的:构建含有细胞周期依赖性激酶2(CDK2)的胞外分泌型pPICZαA-CDK2重组质粒,利用毕赤酵母表达体系表达CDK2蛋白。方法:从人白细胞中提取总RNA,逆转录后采用聚合酶链反应扩增出CDK2基因,并将其插入pPICZαA质粒,构建重组质粒,化学法转化大肠杆菌JM109进行克隆。重组质粒pPICZαA-CDK2转化毕赤酵母菌株GS115,甲醇诱导酵母细胞进行蛋白表达,SDS-PAGE和Western-Blot鉴定蛋白表达情况及抗原性。结果:PCR电泳及DNA测序证实CDK2基因已正确克隆到表达载体中;重组质粒转入酵母菌GS115,酵母经甲醇诱导表达后经SDS-PAGE检测发现在34000左右有条带,Western-Blot检测发现有与CDK2单抗结合蛋白。结论:成功构建重组质粒,初步判断CDK2全长蛋白在毕赤酵母中表达成功且抗原性良好。     

细胞周期蛋白依赖性激酶2及相关蛋白研究进展

在所有真核细胞中,细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin dependent kinase,CDK）调控着细胞周期各个环节的起始与进程,进而控制细胞的增生和凋亡。CDK2在20世纪90年代初鉴定并命名,是目前已发现的11个CDK成员中研究极为深入的细胞周期调控因子之一,在决定细胞周期进程中起着重要作用。     

ImageJ软件在重组质粒pET32a-CDK2中蛋白表达的应用

目的应用Image J软件探索细胞周期依赖性蛋白激酶2(CDK2)在重组质粒pET32a-CDK2中的蛋白表达条件。方法将重组质粒pET32a-CDK2转入表达菌株BL21(DE3),然后在不同时间点(0、1、2、3、4h)和不同浓度(0.5、1、2 mmol/L)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)下诱导表达目的蛋白CDK2,对CDK2采用SDS-PAGE法进行蛋白电泳,并应用Image J软件对电泳条带进行灰度分析。结果 CDK2诱导表达量在不同时间点差异有统计学意义(P0.001),其中0h与1h、2h、3h、4h诱导表达量的差异均有统计学意义(P=0.007,P0.001,P0.001,P0.001);1h与3h和4h诱导表达量的差异均有统计学意义(P=0.001);而2h和1h、3h、4h诱导表达量的差异均无统计学意义(均有P0.05);不同浓度IPTG下的CDK2诱导表达量差异无统计学意义(P=0.336,P=0.240,P=1.000)。结论根据Image J软件分析结果,采用0.5 mmol/L浓度IPTG 2h的条件,节约诱导时间和试剂用量。     

动态监测SARS患者白细胞介素-6、白细胞介素-8和白细胞介素-10含量及其意义

为了探讨细胞因子在严重急性呼吸综合征(SARS)发病中的作用，我们检测了我院收治的105例SARS患者中的早期患者39例，恢复期患者36例，在我院治愈后的第一次随访者72例，第二次随访者70例，急诊等一线未患SARS医护人员43人，健康体检者35人的血清中自细胞介素-6(IL-6)、自细胞介素．8(II广8)和自细胞介素-10(IL-10)的含量。