大鼠神经元Arnt2亚细胞定位的预测与分析

目的:分析大鼠小脑颗粒神经元Arnt2的亚细胞定位情况。 方法:利用CBS生物信息资源，根据Arnt2氨基酸序列 (LOCUS：NP_036913) 进行真核生物亚细胞定位预测，并寻找Arnt2核输出信号(NES)；最后利用激光扫描共聚焦显微术(LSM) 确定Arnt2在正常大鼠小脑颗粒神经元中的亚细胞定位情况。 结果:预测Arnt2在真核生物细胞中主要为细胞核定位，并具有线粒体定位的可能性；预测结果还显示Arnt2氨基酸序列上存在着核输出信号，具体位置为氨基端第143位亮氨酸；LSM分析结果证实Arnt2定位于大鼠小脑颗粒神经元细胞核内。 结论:Arnt2定位于正常大鼠小脑颗粒神经元细胞核内；Arnt2具有线粒体定位的可能性，并存在核输出信号，提示在某些诱导因素作用下,Arnt2存在线粒体定向转位的趋势。     

ONO-AE-248诱发线粒体膜势能降低导致中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡

目的研究线粒体在ONO—AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡中形态结构及功能的变化情况,为进一步确立这一新的死亡形式和找寻其独特的死亡信号转导途径提供实验依据。方法体外新鲜分离人外周血中性粒细胞与ONO—AE-248共同培养,流式细胞术检测其线粒体膜势能的变化;激光共聚焦扫描显微镜观察线粒体形态结构和分布情况。结果ONO—AE-248迅速导致中性粒细胞线粒体膜势能的溃散;ONO—AE-248刺激后中性粒细胞在线粒体形态、结构、分布和胞浆内染色特性等方面均与阴性对照有明显差异。结论线粒体变化是ONO—AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡早期形态学上区别于凋亡的显著变化之一。线粒体膜通透性转变以及线粒体膜势能下降可能是ONO—AE-248诱导的非凋亡性程序化细胞死亡的主要原因。     

左归丸加减方对谷氨酸诱导的体外培养大鼠小脑颗粒神经元凋亡影响

目的 :研究左归丸加减方对谷氨酸引起的体外培养的小脑颗粒神经元 (CGNs)兴奋毒性死亡是否有抑制作用及其可能的分子机制。方法 :采用二乙酸荧光素 (PDA)和Hoechst332 5 8DNA染色法 ,观察神经元存活率及形态学特征 ,用琼脂糖凝脉电泳分析神经元死亡的生化特征。结果 :30 0 μmol·L- 1 谷氨酸可引起体外培养的CGNs调亡 ,左归丸加减方水提物 (ZGP)可以剂量依赖地阻断谷氨酸所致的CGNs调亡。PD980 5 9可以阻断谷氨酸的诱导CGNs调亡作用 ,协同ZGP的抗谷氨酸诱导CGNs调亡作用。LY2 94 0 0 2可以阻断ZGP的抗谷氨酸诱导CGNs调亡作用。结论 :ZGP对谷氨酸诱导的体外培养的大鼠CGNs调亡有保护作用 ,PI3 K Akt信号传导通路可能参与其作用。     

鼻咽癌组织端粒酶活性的研究

探讨端粒酶活性与鼻咽癌的关系。方法采用端粒重复序列扩增法测定６９例经病理确诊的鼻咽活检组织及两株鼻咽癌细胞株的端粒酶活性。