尸体骨髓活力观察

对10例开放性颅脑外伤猝死者骨髓细胞活力进行丁初步研究，发现用抽吸采集法可采得大量尸体骨髓细胞，足以满足临床应用需要。机体死亡后，骨髓细胞活力迅速下降，理想的采集层在死后2小时内完成，机体死亡后内环境发生一系列变化，通过相关系数测定，发现与骨髓细胞活力下降相关的因素有葡萄糖值下降、酸度升高及硷储减少。     

人骨髓细胞长期冻存的观察

深低温保存骨髓细胞有重要的临床意义,当前主要是利用液氮来进行.理论上讲,深低温下,细胞生机停滞,一切代谢停止,其活力可以永远保存.本文报告我们的人骨髓细胞冻存十年的活力观察.材料与方法     

无关供者24例外周血干细胞动员和采集

目的 总结无关供者外周血千细胞(PBSC)动员和采集情况.方法 24例无关供者给予重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)5 μμg·kg-1·d-1,每天皮下注射,第4、5天或5、6天用CS-3000PLUS血细胞分离机采集外周血干细胞,计数采集物中单个核细胞(MNC)和CD34+细胞.结果 所有供者均安全顺利完成...     

脐带血清对造血细胞的增殖刺激作用

目的：探讨脐带血清(CBS)对骨髓造血细胞的效应。方法：采用骨髓粒单系祖细胞、混合细胞、卵石造血区、长期培养超始细胞培养法，在培养体系中加入CBS或/和细胞因子（CK），根据培养集落的形成量，推算CBS中CK的含量。结果：CBS中含有能直接刺激骨髓造血细胞形成的CK，其中约含GM-CSF65.6μg/L，IL-32.9μg/L，有较高的SCF、IL-6等活性。结论：CBS内含有的造血刺激活性，可支持造血细胞体外生长、扩增，与CK比，有一定可比性及协同作用，具有一定应用前景。     

盐酸克伦特罗生物素化单链抗体在大肠埃希氏菌中的表达

目的 提取盐酸克伦特罗(CLB)生物素化抗体片段蛋白进行表达,为下一步纯化及农兽药品快速检测奠定基础。方法 确定一株生物素化CLB噬菌体抗体 “pHEN1-BHNS-CLB1”对其进行蛋白表达,即从噬菌粒“PHEN1-BHNS-CLB1”切下scFv基因片段,亚克隆至能引导可溶性表达的载体pCANTAB5E上,完成了重组质粒的构建,将所构质粒转化大肠埃希氏菌感受态细胞BL21。命名“5E-BHNS-CLB1”,并对“5E-BHNS-CLB1”进行PCR及酶切鉴定后,测序分析。结果 ELISA结果证明其具有较好的亲和性,竞争抑制ELISA、与gp120蛋白及三聚氰胺的交叉反应ELISA结果均证明其具有很好的特异性,片段大小与预想目的片段大小一致,SDS-PAGE及Western blotting的结果显示,其分子量大小与目的一致,并能与抗E-tag标签抗体结合显色。结论 说明表达的蛋白能与表达载体5E后带有E-Tag标签的短肽作用,含有E-Tag标签,是我们要表达的目的蛋白,为下一步纯化蛋白创造了条件。     

HLA配型相合母子间移植1例

本文报告了１例母子间外周血干细胞移植病例。供受者ＨＬＡ表型完全相合．但供者ＣＭＶ—ＩｇＧ（＋）,ＩｇＭ（＋）。预处理为全身照射（ＴＢＩ）加环磷酰胺（ＣＹ）方案,环孢素Ａ（ＣＳＡ）加甲氨喋呤（ＭＴＸ）方案预防ＧＶＨＤ。输入ＭＮＣ ３．３×１０３／ｋｇ,ＣＤ３４＋ＣＤ３８—１１．８×１０６／ｋｇ。ＷＢＣ下降到最低点（０．１×１０９／Ｌ）为移植后第７天,血小板下降到最低点（７×１０９／Ｌ）为第８天。ＷＢＣ超过１．０×１０９／Ｌ为第１９天,血小板达到２０×１０９／Ｌ上下为第２５天。移植后第３０天、５８天两次行细胞遗传学检查,结果均为４６（Ｘ,Ｘ）。移植后产生了ＩＶ度ａＧＶＨＤ和ＣＭＶ间质性肺炎,经积极治疗后均得到控制。移植后已近２年,现血象基本正常,有局限性ｃＧＶＨＤ表现。仍在服用环胞素Ａ胶囊中。本文对二代间移植的相关问题进行了讨论。     

脐带血清与细胞因子在造血细胞培养中的效应比较

目的：比较人脐带血清（CBS）与细胞因子在骨髓血细胞培养中的效应。方法：在体外人骨骨CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM、CAFC、LTC－IC培养体系中,加入CBS或／和细胞因子,观察所形成的集落。结果：与细胞因子比,CBS中含有较高的GM－CSF、EPO、SCF、IL－3、IL－6等活性,能直接刺激骨髓造血细胞形成。结论：CBS内的造血刺激活性能刺激CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM的生长,使CAFC、LTC－IC、得到明显扩增,具有一定应用前景。     

预激态补骨脂素对白血病原代细胞杀伤作用的研究

目的:体外观察预激态补骨脂素(PAP)对白血病原代细胞的杀伤作用。方法:6例临床确诊为白血病的血标本采用体外细胞培养方法,在白血病原代细胞培养板中加入PAP,使其浓度保持在0.05g/L。短期用药PAP浓度维持24h,7天时终止实验;长期用药PAP浓度维持5天,并分别在第7天、第10天、第14天时终止实验。以细胞总数、台盼蓝拒染率和台盼蓝拒染细胞抑制率等作为检测指标,以配对t检验进行组间比较。结果:短期用药和长期用药均显示PAP对白血病原代细胞具有显著杀伤作用。短期用药(≤7天),作用时间延长对PAP杀伤白血病细胞作用的影响不明确。长期用药结果显示台盼蓝拒染细胞抑制率从32.40%～69.50%升至94.10%～98.90%。难治或耐药与否对PAP杀伤白血病细胞作用无明显影响。结论:PAP对白血病原代细胞具有显著的杀伤作用,有可能成为一广谱抗白血病药物。     

异基因造血干细胞移植治疗儿童血液病

目的观察异基因造血干细胞移植对儿童血液病的治疗效果。方法采用异基因造血干细胞移植治疗15例儿童血液病,其中非血缘脐血移植9例,同胞脐血移植3例,同胞外周血干细胞移植2例,同胞骨髓移植1例。采用马利兰/环磷酰胺(BU/CY)或环磷酰胺/全身照射(CY/TBI)为基础的预处理的方案。结果14例患儿植入成功,白细胞的植入时间各组间差异无统计学意义;脐血移植血小板的植入时间较骨髓或外周血延迟(P<0.05)。主要并发症为CMV感染和复发,11例患儿生存,其中10例无病存活(占66.7%),存活最长时间为6年。Kaplan-meier生存曲线提示:1年生存率为76.6%,预计5年生存率为57.4%。结论脐血移植具有GVHD轻且较容易控制、搜寻时间短等优点,对儿童患者具有广泛的应用前景。     

经CD34+纯化的自体外周造血干细胞移植治疗小儿皮肌炎1例报告

目的探讨经CD34^＋纯化的自体外周造血干细胞移植治疗小儿皮肌炎的疗效。方法1例3岁皮肌炎患儿接受经CD34^＋纯化的自体外周造血干细胞移植。采用环磷酰胺（CTX）＋粒细胞集落刺激因子（G-CSF）方案动员外周血干细胞后,通过CliniMACS细胞分选仪分选CD34＋细胞,预处理选用CTX、兔抗人T淋巴免疫球蛋白（ATG）和马法兰（MeL）。0天回输CD34^＋细胞数9.45×10^6/kg。观察症状体征变化、造血重建及免疫恢复情况。结果动员获得单核细胞数为1.04×10^7/kg,经纯化获得CD34^＋细胞占94%,CD34^＋细胞回收率达67%,去除3个对数级CD3^＋。＋9d粒系植入,＋14d巨核系植入。＋19d皮损恢复正常,四肢肌力由移植前Ⅱ级或Ⅲ级转为Ⅳ级。＋180d免疫恢复,＋210d肌力恢复Ⅴ级。结论对常规治疗无效的小儿皮肌炎,可选择CD34^＋纯化自体外周造血干细胞移植。