单次上游单次离心高活力精子分离与宫腔内授精

介绍了一种用于宫腔内授精（ＩＵＩ）的高活力精子分离方法一单次上游单次离心法，活性精子提取率为（１９．９±６．３）％，其中，ａ精子提取率为（３２．０±１３．８）％。提取的精子悬液中，ａ精子率为（８３．８±５．５）％。精子活动率约９５％，畸形精子率下降了６个百分点。应用上述方法进行精子分离对２７对男性少、弱、畸精子症致不育夫妇进行了４０个周期的ＩＵＩ治疗，妊娠率（ＰＧＲ）２０％。ＩＵＩ中精子数量超过６×１０＿６，ＰＧＲ为３２％，而不足６×１０＿６者无一例妊娠（Ｐ＜０．０５）。     

人类辅助生殖技术研究与实施中知情同意的伦理思考

近20年来，随着我国经济市场化和社会法制化的转型，传统的医院和家属决定医疗措施的模式已经不能充分保护患者的权益，对病情的知情权和治疗措施的决定权已经被动地移到患者本人。然而在辅助生殖技术领域知情同意更为特殊。由于生殖涉及夫妻双方和家庭，知情权有时与隐私权形成尖锐地对立；患者是否能自愿选择，也仍然受到了女性的弱势社会地位、来自家庭和社会的各种压力的影响；辅助生殖技术是在其尚不成熟时开始临床应用的，其科研探索和医疗行为的性质同时并存。这些问题须引起伦理学界的高度关注。从伦理角度而言，对于辅助生殖技术，政府和行业协会应当通过制度和行业规范保障社会公益性不受到损害，病人的普遍利益得到保护，而知情同意则是针对特定的个人进行权益保护的防线。     

ICOSL/ICOS在母胎免疫耐受中的研究进展

共信号分子指细胞表面的配体与T细胞表面受体相互作用向细胞内传递刺激或抑制信号,来调节免疫反应的一类分子。共信号分子在肿瘤及自身免疫性疾病等方面发挥了重要作用。目前研究认为共信号分子也参与了母胎免疫耐受的调节,共信号分子的异常会导致母胎免疫耐受失衡从而引起复发性流产、子痫等妊娠并发症。ICOSL/ICOS是共刺激信号的配体和受体,通过参与T细胞分化、Th1、Th2细胞因子分泌调节母胎免疫耐受。因此,本文就ICOSL/ICOS结构、母胎界面中的分布及其在妊娠过程中的免疫调节进行综述,旨在为今后研究共信号分子异常引起的妊娠并发症的免疫治疗提供新思路。     

海南地区718例男性不育患者AZF基因微缺失研究

目的研究Y染色体AZF基因微缺失与男性不育的关系。方法应用多重PCR对718例男性不育患者进行Y染色体AZFa、AZFb、AZFc和AZFd基因的18个位点进行检测。结果228例特发性无精症患者中有4例缺失,占1．7％;2091例严重少精子症患者中有17例缺失,占8．1％;其余281例少弱精子症患者中有8例缺失,占2.8％。结论在男性不育症患者中,Y染色体AZF基因微缺失是男性不育发生的重要原因之一,基因检测可为患者的诊断、治疗及遗传咨询提供理论依据。     

儿外科针对新型冠状病毒感染防控护理管理策略

2020年1月12日,WHO将湖北省卫生健康委员会首次公布的一组原因不明的肺炎病例中发现的病毒命名为2019新型冠状病毒[1-2]。新冠肺炎疫情持续蔓延,家族聚集性发病提示它有人传人的能力,全国乃至全球各地也相继发现了此类病例[3]。2020年1月20日,国家疾病预防控制中心宣布将该病纳入国家乙类传染病,采取甲类传染病防控措施[4]。2020年1月30日,WHO宣布将新冠肺炎疫情列为国际关注的突发公共卫生事件,引起了国际社会的广泛关注[5]。截止2020年2月2日24时,全国共有17205例确诊病例,21558例疑似病例[6]。目前国内已有儿童感染确诊病例,最小患儿年龄仅3个多月,尚不能确定是否存在母-婴传播[7]。为阻止新冠肺炎在儿外科病区内传播和蔓延,我科全体医护人员认真学习和梳理相关指南、感染防控制度和流程,在感染防控护理管理策略方面做了大量具体工作,期望能给其他护理单元抗击新型冠状病毒感染提供参考与借鉴。现报告如下。     

三种不同饲养层上人胚胎干细胞生长状态的比较★

背景：人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞作为饲养层尽管能够维持胚胎干细胞的未分化状态，但存在细胞克隆不饱满、平铺情况明显等问题。 目的：制备小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合饲养层，观察人胚胎干细胞在其上面的生长状态。 设计：多样本观察比较。 单位：海南医学院附属医院生殖医学中心。 材料：实验于2006-04/2007-07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成。包皮来自于行包皮环切的儿童，由海南医学院附属医院泌尿外科提供，儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书，实验经医院医学伦理委员会批准。人胚胎干细胞系HN-1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定。清洁级孕12.5~14.5 d的胎鼠11只，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。 方法：胎鼠麻醉后去除头、四肢和内脏，按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养，待生长汇合后冻存部分原代细胞，用丝裂霉素C处理2.0~3.0 h后，按1×108 L-1密度接种于明胶包被的中心皿内，即小鼠胚胎成纤维细胞饲养层。人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上。上述两种成纤维细胞分别计数后，按1∶0，3∶1，1∶1，1∶3，0∶1比例混合，然后以1×108 L-1密度接种于明胶包被的中心皿内，即混合饲养层。观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态，并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测。撤除饲养层，观察人胚胎干细胞体外分化情况。 主要观察指标：①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较。②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长状态比较。③混合饲养层上人胚胎干细胞未分化状态的检测。④体外分化实验。 结果：①：生长在小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞上的人胚胎干细胞克隆扁平、不饱满，而生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞克隆饱满、厚实，其克隆形态显著好于其他两种饲养层。②：小鼠胚胎成纤维细胞：人包皮成纤维细胞按1∶1混合时，人胚胎干细胞显著堆积生长，克隆边缘清晰、隆起明显且饱满，按1:3混合时无明显变化，优于其余3种混合比例。③：碱性磷酸酶染色及OCT-4抗原表达均呈强阳性，分别在200~300 bp和300~400 bp处可见OCT-4和端粒酶mRNA表达的特异性条带。④：能形成拟胚体，贴壁后人胚胎干细胞可分化为多种形态的细胞。 结论：①与小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞常规饲养层相比，两者混合饲养层能够更好的支持人胚胎干细胞的体外传代培养，获得更佳的克隆形态。②小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合比例为1∶1时效果较好。