应用颗粒细胞部分剥除法提高冻融胚胎移植后妊娠率和植入率的临床研究

目的探讨应用颗粒细胞部分剥除法对常规体外受精-胚胎移植（IVF-ET）冻融胚胎移植后妊娠率和植入率的影响。方法140个冻融周期共完成122例移植。实验组70个冻融周期共374个胚胎冷冻前采用颗粒细胞部分剥除法培养，对照组70个冻融周期共392个胚胎冷冻前颗粒细胞完全剥除后培养。复苏后胚胎经激光辅助孵化，培养0．5～3h后移植。比较两组冻融胚胎移植后的妊娠率和植入率。结果对照组完成60个移植周期，临床妊娠率20．00％。植入率7．87％；实验组完成62个移植周期，临床妊娠率37．10％，植入率14．77％，均高于对照组（P〈0．05）。结论应用颗粒细胞部分剥除法可以提高IVF-ET冻融胚胎移植后妊娠率和植入率。     

HLA-E介导孕激素对绒毛膜癌JEG-3细胞血管内皮生长因子表达的调节作用

目的:研究人类白细胞抗原E(HLA-E)是否参与孕激素对JEG-3细胞VEGF基因表达的调节作用。方法:JEG-3细胞分为5组,接受不同处理:空白对照(组1)、孕激素处理(组2)、转染HLA-E siRNA慢病毒后孕激素处理(组3),HLA-E siRNA慢病毒转染(组4)以及慢病毒阴性对照转染(组5)。48小时后收集细胞,分别采用Real-time PCR和Western blot方法检测JEG-3细胞血管内皮生长因子(VEGF) mRNA及蛋白表达水平。结果:组2 JEG-3细胞的VEGF mRNA和蛋白表达较组1增高,差异有统计学意义(P0.05);沉默HLA-E基因(组4)导致VEGF mRNA和蛋白表达降低,与组1比较,差异有统计学意义(P0.05)。组3 JEG-3细胞经HLA-E siRNA慢病毒转染、沉默HLA-E表达后再接受孕激素处理,VEGF mRNA及蛋白表达水平与组1比较差异无统计学意义(P0.05)。组5与组1比较,VEGF mRNA及蛋白水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:HLA-E介导孕激素对JEG-3滋养细胞VEGF表达的上调,孕激素对JEG-3细胞VEGF的上调作用被HLA-E基因的沉默消除。     

超排卵对小鼠卵母细胞和胚胎发育潜能的影响

目的 比较超排卵对小鼠卵母细胞和胚胎发育潜能的影响.方法 建立超排卵妊娠小鼠模型,获取孕4 d胚胎,观察获取卵母细胞的数目、受精率、卵裂率、优质胚胎率和囊胚形成率,并与自然周期排卵小鼠的比较.结果 超排周期组获取的卵母细胞的数目高于自然周期组;超排周期组的受精率(88.57%)和卵裂率(92.17%)与自然周期组的受精率(92.86%)和卵裂率(96.70%)相似,但超排周期组的优质胚胎率(76.50%)和囊胚形成率(22.50%)低于自然周期组的优质胚胎率(88.64%)和囊胚形成率(43.18%).结论 超排卵能增加卵母细胞和胚胎的数量,不影响受精和卵裂,但会降低优质胚胎率和囊胚形成率,影响卵裂后胚胎的进一步发育的潜能.     

卵泡液中游离Fas（sFas）、游离FasL（sFasL）以及LH的不同浓度对体外受精-胚胎移植中妊娠结局的影响

目的：分析体外受精（IVF）患者卵泡液中sFas和sFasL的浓度与妊娠的关系,以及与卵泡液中的促黄体素（LH）水平之间的相关性。方法：收集行IVF／ICSI患者的卵泡液,测定sFas、sFasL和LH浓度。结果：妊娠组排卵前卵泡液中的sFasL和LH水平显著高于未妊娠组（P分别为0．002和〈0．001）,两组中sFas水平没有明显差异。通过logistic回归分析,卵泡液中与妊娠有统计学相关的因素仅为LH,OR=4．117（P为0．001）。卵泡液中的LH和sFasL的水平呈明显正相关关系（P〈O．001）,LH与sFas之间无显著相关关系。结论：在IVF／ICSI治疗周期中,卵泡液中的sFasL蛋白和LH水平与妊娠结局有关,卵泡液中的LH水平可能通过调节卵泡局部的某些系统来调节卵泡中Fas-FasL系统介导的凋亡作用。     

血β-hCG对体外受精-胚胎移植后妊娠早期诊断的预测价值

目的:探讨血β-hCG水平对体外受精—胚胎移植(IVF-ET)后妊娠早期诊断的预测价值。方法:对2001年9月～2002年4月于我院行IVF-ET治疗的80例患者,取卵前36小时肌注hCG10000u,胚胎移植(ET)后2～14天隔日检测血β-hCG。结果:ET后血β-hCG进行性下降;在第8天或第10天时,未孕组血β-hCG即呈阴性,而已孕组血β-hCG开始有不同程度的回升;第8天时为21.70±19.34(mIU/ml),第10天时为56.38±46.51(mIU/ml),第12天时增至192.26±124.45(mIU/ml),均高于同时期未孕组,差异有显著性。自ET后8天起,异位妊娠或流产组血β-hCG水平均低于同时期宫内继续妊娠组;多胎妊娠组血β-hCG水平明显高于同时期单胎妊娠组。结论:IVF-ET后妊娠的早期诊断,至少可由通常的ET后14天提早到12天或10天,甚至可早至8天;异位妊娠、流产或多胎妊娠与同时期宫内单胎妊娠比较,血β-hCG水平有明显差异,故于ET后10天、12天连续2次测血β-hCG水平,有助于临床及早鉴别诊断。     

应用颗粒细胞部分剥除法提高行体外受精-胚胎移植后胚胎质量及临床妊娠率的研究

行体外受精-胚胎移植（IVF—ET）后，约50％以上的胚胎发育至4～8细胞阶段，即发生阻断现象，胚胎不再继续发育。动物研究证明，应用颗粒细胞部分剥除法（即将保留的部分自体卵母细胞周围颗粒细胞与胚胎共培养），是克服体外胚胎发育阻断的有效方法，用于共培养的细胞可来自自体，也可来自异体。目前，有关研究报道较多的是选用输卵管上皮细胞，也有选用颗粒细胞的。本研究旨在探讨应用颡粘细胞部分剥除法在行常规IVF—ET中的应用价值。     

原因不明性反复自然流产患者免疫治疗结局的探讨

目的观察淋巴细胞免疫治疗原因不明性反复自然流产的效果,探讨封闭抗体对治疗结局的意义.方法对54例原因不明性反复自然流产患者进行淋巴细胞免疫治疗.结果11例患者已分娩正常活婴,5例处于妊娠中期,6例再次发生流产.妊娠成功率72.73%(16/22).免疫治疗后,患者血封闭抗体的阳性率明显高于治疗前(P＜0.005);封闭抗体阳性者再次妊娠的成功率高于阴性者,差异有显著性.结论淋巴细胞免疫治疗原因不明性反复自然流产有效、安全.封闭抗体对再次妊娠结局有一定预示价值.     

降低聚乙烯吡咯烷酮浓度对卵胞浆内单精子显微注射效果的影响

目的:探讨卵胞浆内单精子注射(ICSI)操作中,降低聚乙烯吡咯烷酮(PVP)浓度对ICSI效果的影响。方法:将132例160个周期接受ICSI治疗的患者所获1549个MⅡ卵随机1∶1分配,分别采用在含7%和3.5%PVP(对有A、B级活动精子的周期)或者在3.5%和不含PVP(对仅有C、D级活动精子的周期)操作液中制动的精子行ICSI,比较ICSI效果。结果:PVP浓度为3.5%时,ICSI卵的受精率和卵裂率分别为80.12%和96.78%,与PVP浓度为7%时的受精率(79.84%)和卵裂率(96.89%)比较差异无显著性(P>0.05),但采用3.5%PVP制动精子行ICSI获得的优质胚胎率达77.76%,高于7%PVP制动时的71.43%,差异有显著性(P<0.05)。在不含PVP操作液中制动精子后行ICSI,卵子的受精率、卵裂率及优质胚胎率均与在3.5%PVP制动精子行ICSI差异无显著性(P>0.05)。结论:对于活动力良好的精子,降低精子制动液的PVP浓度至3.5%,可提高ICSI的优质胚胎率。精子活动力差时,进一步降低PVP浓度对ICSI效果无明显影响。     

原因不明性不孕的助孕方式的探讨

目的:探讨不同助孕技术对原发性或继发性原因不明不孕(UI)的治疗结局。方法:回顾分析2001年1月～2006年4月我院诊断为UI并采用助孕技术治疗的患者共90例:原发性UI47例(A组),继发性UI43例(B组)。两组患者分别进行了宫腔内人工授精(IUI)和体外受精(IVF)治疗。结果:两组IUI的累积妊娠率分别为A组20.4%,B组23.2%。促排卵周期方案中的CC/HMG/HCG IUI和HMG/HCG IUI方案的妊娠率均显著高于自然周期和CC IUI;第2和第3个IUI周期的妊娠率显著高于第1周期;≥4个周期的IUI均无妊娠。在IVF中,A组的取消周期数、临床妊娠率、获卵数、受精率和胚胎种植率显著低于B组,受精率<30%的周期数显著高于B组。在B组中,IUI和IVF治疗中各出现一例异位妊娠。结论:促排卵 IUI能纠正部分UI患者的轻微病因,是UI的首选治疗方法。原发性UI患者行IVF时,卵子不受精或受精率明显下降的风险明显高于继发性UI;继发性UI的病因可能与输卵管功能和/或子宫内膜容受性下降有关。     

小鼠超排卵胚胎的着床与Lif基因表达水平的关系

目的检测胚胎移植时子宫内膜中自血病抑制因子（1eukemia inhibitory factor，Lif）基因的表达水平，探讨超排卵对小鼠胚胎着床潜能的影响。方法建立超排周期胚胎和自然周期胚胎受体妊娠小鼠模型，比较妊娠率、胚胎着床率与可基因表达水平之间的关系。结果超排周期受体组的妊娠率（20．00％）和胚胎着床率（8．33％）显著低于自然周期组的妊娠率（55．00％）和胚胎着床率（35．00％）。自然周期胚胎和超排周期胚胎受体组内膜中Lif矿基因表达水平相似，妊娠受体组Lif矿基因表达水平显著高于未孕受体组，但单胎妊娠和多胎妊娠受体组内膜中Lif矿基因表达水平相似。结论超排卵可能因影响胚胎的质量而降低具有相同Lif mRNA表达水平的受体鼠的妊娠率和胚胎着床率。