表达人泛素样修饰子基因细胞株的构建及其鉴定

目的：构建人泛素样修饰子(hUBL)基因的逆转录病毒载体并转染293T细胞，以探讨其生物学功能。方法：将hUBL克隆到原核表达质粒PET28a中，构建重组质粒PET28a-hUBL，转化BL2l菌，以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用其纯化蛋白免疫小鼠，获得多克隆抗体。重组蛋白用Westernblot鉴定。将hUBL基因克隆到逆转录病毒质粒中并转染293T细胞，用免疫组化染色法鉴定hUBL基因的表达。结果：hUBL在大肠杆菌中获得高效表达，并纯化了hUBL—PET28a的融合蛋白，以此为抗原制备了高效价的抗hUBL蛋白的小鼠多克隆抗体。免疫组化染色表明，hUBL重组逆转录质粒可在293T细胞中高效表达hUBL蛋白。结论：成功地构建了hUBL重组逆转录病毒载体，使得其在293T细胞中表达，获得稳定表达的细胞株。     

HBV转录激活蛋白HBx、MHBst78MHBst155真核重组载体构建

目的分别构建人乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白、羧基端截断的中分子表面蛋白MHBst78、MHBst155编码基因的真核重组表达载体,以便进一步研究其转录激活功能及对宿主细胞信号传导通路的影响。方法设计合成3对寡核苷酸引物,以adr亚型HBV质粒pHBVDNA为模板,采用PCR法分别扩增HBVX基因、MHBst78与MHBst155编码基因片段;用HindⅢ,KpnⅠ双酶切HBVⅩ基因;用HindⅢ和BamHⅠ双酶切MHBst78与MHBst155编码基因片段后,分别定向插入到真核表达载体pcDNA3.1相应酶切位点,转化宿主菌JM109,提取质粒,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。结果酶切重组体显示所切下的片段大小均与预计相符,测序结果与文献报道序列及预计结果一致。结论成功构建了HBVX基因、羧基端截断的HBV中分子表面蛋白MHBst78、MHBst155编码基因的真核重组表达载体,为进一步研究HBV转录激活蛋白HBx、MHBst78MHBst155对宿主细胞信号转导通路的影响奠定基础。     

巨大型听神经瘤术中面听神经的保留

我科自1994年1月～2001年9月间共收治听神经瘤81例,仅1例直径小于4 cm.现报告如下:     

碘伏治疗静脉滴注多巴胺外渗引起的组织损伤9例报告

静脉滴注多巴胺是治疗休克的常用方法，但因长时间连续滴注，或病人肢体活动，药液偶可渗出到血管外软组织，引起局部血管收缩，出现皮肤水疱甚至组织坏死。对多巴胺外渗引起的上述损伤，过去常用局部热敷的方法，但效果并不理想。我们通过局部涂抹碘伏进行修复治疗，现报道如下。     

高血压左心室肥厚患者血浆内皮素-1、氨基末端脑钠肽前体浓度的变化及意义

目的:探讨血浆内皮素-1(ET-1)、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)与高血压左心室肥厚间的潜在联系,及其对高血压左心室肥厚的诊断价值。方法:对原发性高血压左心室肥厚(LVH)患者50例,健康对照组50例,采用酶联免疫吸附法检测血浆ET-1及NT-proBNP的浓度,并通过绘制ROC曲线制定ET-1、NT-proBNP对高血压左心室肥厚的诊断界值。结果:原发性高血压LVH患者血浆ET-1、NT-proBNP浓度均较正常对照组显著升高(P<0.01)。通过绘制ROC曲线发现:以ET-1作为高血压LVH的诊断指标,最佳临界值为279.9pg/ml,所对应的灵敏度为97%,特异度为79%;以NT-proBNP作为高血压LVH的诊断指标,最佳临界值为32.6pg/ml,所对应的灵敏度为64%,特异度为93%。结论:血浆ET-1、NT-proBNP水平与高血压LVH密切相关。血浆ET-1、NT-proBNP水平对高血压左心室肥厚具有较高的诊断效能。     

血管栓塞后切除巨大肾上腺嗜铬细胞瘤1例

1病例报告患者女,43岁。经常性头晕、头痛、心悸、畏热、多汗、四肢乏力,平卧休息后,症状可缓解,患者逐渐消瘦。发病6个月后就诊,检查:血压220/120mmHg,心率140/min,门诊口服硝苯地平、厄贝沙坦,血压调整困难,维持在180/100mmHg。入院后检查发现合并糖尿病,空腹血糖12mmol/L。查体:左上腹部巨大肿块,     

bFGF和硫糖铝局部应用促扩张术方法研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)不同剂量、用药方法对扩张组织的影响.方法以白色家猪为实验动物,采用持续恒压扩张技术,观察不同剂量和不同给药时间,bFGF和硫糖铝对扩张组织的影响及组织结构变化.结果扩张术同时每日2次局部应用bFGF 9AU/cm2 硫糖铝100μg/ml,共7 d,浸于明胶海绵上缓慢持续释放对扩张组织的影响最明显,效果最佳,扩张器内实际注液量、扩张所获得的皮肤净增面积明显增加,皮瓣回缩率降低.表皮细胞层数增多,胶原纤维、弹力纤维、成纤维细胞密度和毛细血管密度显著增高.药量增加效果未随之增加.结论持续恒压扩张术时合用bF-GF 9AU/cm2 硫糖铝100μg/ml,每日2次注药浸入明胶海绵持续缓慢释放效果最佳.     

CT扫描在胸腰椎骨折中的诊断价值

临床上 ,胸腰椎损伤常见于交通和建筑业事故 ,在胸腰椎骨折中以爆裂骨折多见 ,准确诊断和了解椎管及椎管内情况是临床正确治疗及疗效估计的关键 ,由于X线平片的局限性 ,对椎体骨折类型及损伤程度常估计不足 ,CT对骨折类型、椎管受累情况、治疗方法及疗效估计提供更详细的资料。本文通过经X线平片及CT检查的 4 0例胸腰椎骨折的回顾性分析 ,以探讨CT扫描在胸腰椎骨折中的诊断价值。1　材料与方法本组共 4 0例胸腰椎损伤病例 ,其中男性 31例 ,女性 9例 ,年龄 1 8～ 6 2岁 ,平均 39 3岁。使用SimenssomatomARC全身扫描仪 ,病人仰卧 ,以 5 1 2长度侧位常规扫描定位 ,决定扫描椎体和扫描范围 ,倾斜角度 ,扫描范围应包括伤椎上下各一个椎体 ,层厚 5mm ,层距 5mm ,连续扫描 ,如第一层或最后一层还发现有骨折征象 ,应向上或向下连续扫描至无骨折征象发现为止 ,骨窗和软组织窗观察 ,必要时行矢状和冠状重建 ,正位Tope像扫描。2　结　果4 0例共 4 8个椎体骨折中 ,T6椎体 2个 ,T7、T8、T9椎体各 1个 ,T1 2 椎体 1 7个 ,L1 椎体 1 3个 ,L2 ...     

人本原理在研究生培养中的应用

人本原理是以人为核心 ,以人为根本的理论 ,将其引入研究生培养中 ,为研究生教育注入了竞争和活力 ,有利于提高研究生培养质量 ,推动研究生教育的不断发展