中国西部地区产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的耐药及分布特点

目的 了解我国西部地区2016—2017年产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的耐药及分布特点,为临床抗感染治疗提供依 据。方法 采用全自动微生物分析仪按统一方案对西部地区10家医院临床分离菌进行药物敏感性实验,KB纸片法进行补充。依 据2017版CLSI标准判读结果,并用WHONET 5.6软件进行统计分析。结果 收集2016—2017年间10所医院临床分离CRE菌株共 1845株,位列前5位的肠杆菌科细菌是肺炎克雷伯菌953株(52%, 953/1845)、大肠埃希菌266株(14%, 266/1845)、阴沟肠杆菌264 株(14%, 264/1845)、弗氏柠檬酸杆菌69株(4%, 69/1845)、奇异变形菌62株(3%, 62/1845)。药敏试验结果显示,CRE菌株对大多数 临床常用抗菌药物呈高度耐药,除了对替加环素和多黏菌素B的耐药率为5%和8%、对阿米卡星的耐药率为32.2%,对其他抗菌 药物的耐药率大多在80%~97%。CRE儿童分离株对阿米卡星、环丙沙星、多黏菌素和替加环素的耐药率低于成人分离株。结论 CRE菌株对临床上常用的抗菌药物大多呈高度耐药,应加强细菌耐药性和医院感染的监测及抗菌药物的有效管控,遏制CRE菌 株在医院传播流行。     

中国西部地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌的分布及耐药特点

目的 探讨中国西部地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌的分布及耐药特点,为预防和控制医院感染,合理使用抗菌药物 提供依据。 方法 回顾性分析2016—2017年,中国西部地区10家三甲医院微生物实验室从临床标本中分离到的耐亚胺培南铜绿 假单胞菌分布及耐药性特点;数据统计及药敏分析采用WHONET 5.6软件。结果 2016—2017年共分离到铜绿假胞菌7676株, 其中耐亚胺培南铜绿假单胞菌1463株(19.1%)。耐亚胺培南铜绿假单胞菌主要分离自痰液标本,2016年和2017年分别占72.4% 和74.8%,其次为尿液和分泌物。科室分布以重症监护室为主,2016年和2017年分别占17.6%和18.1%,其次是神经外科和呼吸 科。年龄分布特征,61~70岁的患者人数最多,共303例(占20.7%),10岁及以下的患者人数最少,共36例(占2.5%)。耐药分析结果 显示,中国西部地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌对阿米卡星耐药率较低,2016年和2017年分别为16.3%和25.7%,对左氧氟沙星耐 药率较高,分别为43.4%和45.5%;对临床常用的抗菌药物的耐药性,2017年均高于2016年。结论 中国西部地区耐亚胺培南 铜绿假单胞菌主要分离自痰液标本,61~70岁的中老龄患者分离率较高,目前耐药形势严峻,对临床常用抗菌药物的耐药性呈 上升趋势,医院应加强抗菌药物的管理和对耐亚胺培南铜绿假单胞菌感染病例的实时监控,减少此类耐药菌在医院内传播。     

2011年中国CHINET细菌耐药性监测

目的了解国内主要地区临床分离菌对常用抗菌药的敏感性和耐药性。方法国内主要地区15所教学医院(13所综合性医院、2所儿童医院)临床分离菌采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药敏试验。按CLSI 2011年版判断结果。结果 2011年1 12月收集各医院临床分离菌共59 287株,其中革兰阳性菌16 872株,占28.5%,革兰阴性菌42 415株,占71.5%。金葡菌(SA)和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中甲氧西林耐药株的检出率平均分别为50.6%和74.6%。甲氧西林耐药株对β内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株。MRSA中有73.3%的菌株对甲氧苄啶磺胺甲噁唑敏感;MRCNS中有88.2%的菌株对利福平敏感。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。肠球菌属细菌中粪肠球菌对所测试的抗菌药(氯霉素除外)的耐药率均显著低于屎肠球菌,两者中均有少数万古霉素耐药株,根据表型推测多数为VanA型耐药。肺炎链球菌非脑膜炎株成人株和儿童株中PSSP所占比例较2010年均略有升高,PRSP的检出率均有所下降。大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中产ESBLs株分别平均为50.7%、38.5%和13.8%。肠杆菌科细菌中产ESBLs株对测试药物的耐药率均比非产ESBLs株高。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,总耐药率4%～6%。不动杆菌属细菌(鲍曼不动杆菌占88.6%)对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为60.4%和61.4%。肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中仍有少数泛耐药株。结论细菌耐药性仍呈增长趋势,多重耐药和泛耐药菌株在某些科室内的流行播散对临床构成严重威胁,应进行流行病学调查并采取有效的控制措施。     

hBD1稳定表达细胞株的建立及其表达产物对多重耐药菌的活性检测

目的 构建人β防御素1( hBD1)稳定表达细胞株并检测其对多种多重耐药菌的抗菌活性.方法 将重组质粒pCMV-hBD1通过阳离子脂质体转染于非洲绿猴SV40转化的肾细胞(COS-7细胞),经过G418压力筛选后获得单克隆细胞株;提取细胞总RNA,用RT-PCR检测目的基因在转录水平的表达;收集细胞培养上清液,用Western blot检测hBD1基因蛋白的表达;将含有表达产物hBD1的细胞培养上清液分别同各耐药菌液混合,37℃孵育不同时间后涂布于LB平板,以各实验组和对照组的菌落数的比值作为该耐药菌的存活率.结果 经过G418压力筛选所得到的稳定表达细胞株,在转录水平和蛋白水平均检测到目的基因hBD1的表达,在表达产物hBD1的作用下,多重耐药鲍氏不动杆菌、多重耐药大肠埃希菌存活率和多重耐药肺炎克雷伯杆菌的存活率可以分别降至9%、22%和50%,多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌的存活率同对照组没有明显差异.结论 成功获得hBD1稳定表达细胞株,目的基因hBD1的表达产物对多种多重耐药菌均具有抗菌活性.     

苯妥英钠的抑菌活性

背景：苯妥英钠在创面愈合过程中的抑菌作用仍不明确。 目的：通过体外及动物实验观察苯妥英钠在创面愈合过程中是否具有抑菌作用。 方法：①体外实验：采用水解酪蛋白肉汤稀释法检测苯妥英钠的最低抑菌浓度、琼脂扩散法观察1 024 mg/L的苯妥英钠的体外抑菌活性。②动物实验：将30只SD大鼠随机等分为3组,在大鼠背侧脊柱旁设计一2 cm×3 cm矩形创面,分别用10,20 mg/cm²苯妥英钠糊剂或单纯凡士林纱布进行处理,创面均外加凡士林油纱及干纱包扎固定。隔日换药,于第4,8,12,16天进行创面表面细菌定量培养。 结果与结论：①水解酪蛋白肉汤稀释法结果：应用质控菌株、临床菌株进行试验,不同苯妥英钠浓度的试管中均呈现浑浊状态。②琼脂扩散法结果：应用质控菌株进行试验,未发现抑菌圈的形成。③实验动物创面细菌定量培养结果：应用10,20 mg/cm²苯妥英钠糊剂处理的创面细菌定量略低于单纯凡士林纱布处理的创面,但各组之间差异均无显著性意义(P > 0.05)。表明苯妥英钠尚无明确的体外及体内抑菌活性,对创面细菌的清除无明显作用。     

2007年CHINET大肠埃希菌和克雷伯菌属耐药性监测

目的 了解2007年我国不同地区12所医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯菌属的耐药性.方法 采用纸片扩散法( K-B 法)对临床分离株作药敏试验.结果 共收集CHINET 细菌耐药性监测网12所医院分离的大肠埃希菌6 527株,肺炎克雷伯菌3 051株,催产克雷伯菌206株.其中儿童分离株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别占24.0%(1 566/6 527)和 17.8% (542/3 051).大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs菌株检出率分别平均为55.0%(12.3%~72.1%)和44.9%(15.4%~ 70.6% ).各医院ESBLs检出率存在一定差异.药敏结果显示,大肠埃希菌和克雷伯菌属对亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮-舒巴坦都保持高度敏感,耐药率均低于10%.产ESBLs株对上述3种药物的耐药率也均低于20%.50%以上的产ESBLs株对庆大霉素和环丙沙星耐药.有5所医院分离出对碳青霉烯类抗生素不敏感菌株,其中肺炎克雷伯菌21株,大肠埃希菌2株,产酸克雷伯菌1株.其中20株肺炎克雷伯菌为泛耐药株,占0.7%(20/3 051).结论 大肠埃希菌和克雷伯菌属对碳青霉烯类抗生素和头孢哌酮-舒巴坦仍保持高度敏感性,不同地区的分离株中产ESBLs菌株检出率和药敏试验结果存在差异,儿童分离株中产ESBLs检出率上升值得关注.     

黏滑口腔球菌快速鉴定的方法学探讨及耐药性检测

目的 对临床标本中分离的246株黏滑口腔球菌进行系统鉴定,试图建立一种简便的鉴定黏滑口腔球菌的方法,并了解其对临床常用的7种抗生素的耐药特性.方法 常规方法分离菌株,对分离株进行系统的生化鉴定,同时采用K-B法对分离菌株的耐药性进行检测,参考CLIS标准（2006年）中葡萄球菌的药敏判断标准进行判断.结果 从临床标本中分离出246株黏滑口腔球菌,该菌菌落大多牢固黏附于血琼脂平板上,灰白色、不溶血,镜下多呈四联状排列,革兰阳性,也可见成双排列者,触酶阴性,在50 g/L NaCl琼脂上不生长,杆菌肽、呋喃唑酮均敏感,据此可予以简单、快速鉴定.黏滑口腔球菌对β-内酰胺类抗生素敏感,β-内酰胺酶阴性.结论 通过对分离的246株黏滑口腔球菌进行系统鉴定,总结出可以利用菌落黏性、镜下形态、触酶试验等简便的鉴定试验对临床标本中的黏滑口腔球菌进行快速鉴定.     

兰州地区耐甲氧西林葡萄球菌检验及其耐药性观察

目的了解兰州地区耐甲氧西林葡萄球菌的感染状况和耐药特点。方珐常规方法分离、鉴定菌株;琼脂筛选法检测耐甲氧西林葡萄球菌,K-B法检测对氨苄青霉素等15种常用抗生素的耐药性。结果1990～1997年共分离出各种葡萄球菌133株,其中血浆凝固酶阳性(金黄色葡萄球菌)98株,血浆凝固酶阴性(表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、人型葡萄球菌)35株,98株金黄色葡萄球菌中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌67株,占68．3％;血浆凝固酶阴性葡萄球菌中,耐甲氧西林葡萄球菌19株,占54．2％。133株葡萄球菌均对万古霉素敏感,耐甲氧西林葡萄球菌对氨苄青毒素等15种抗生素的耐药率高于对甲氧西林敏感的葡萄球菌对以上抗生素耐药率。结论兰州地区耐甲氧西林葡萄球菌医院内感染严重,防止其散发和流行十分必要。万古霉素为治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引起的感染的首选药物。应加强对耐甲氧西林葡萄球菌的检测,密切注意其对万古霉素等抗生素耐药性的改变。     

烧伤创面感染细菌1116株分析

对1989～1991年536例烧伤病人创面分离的各种细菌、真菌共39种1116株进行了分析,结果表明:金黄色葡萄球菌217株,检出率为19.4%,居第一位;铜绿假单胞菌208株,检出率为18.6%,居第二位;乙酸钙不动杆菌119株,检出率为10.6%,居第三位。同时于创面及烧伤病房环境中分离出了蜡样芽胞杆菌、绿色气球菌、曲霉菌等机会致病菌,且创面分离数量较多的菌在环境中几乎均可检出。我们还对分离数量较多的细菌进行了药物敏感性试验。