应用pcr-sscp技术检测结核分枝杆菌耐链霉素相关基因rpsl和rrs突变

目的 应用聚合酶链反应-单链构象多态性(pcr-sscp)技术,建立快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药相关基因rpsl和rrs突变的新方法.方法 采用常规药敏试验检测112株结核分枝杆菌临床分离株对链霉素的耐药性,建立pcr-sscp法检测耐药相关基因rpsl和rrs的突变.采用pcr直接测序技术(pcr-ds)确定rpsl和rrs基因突变情况并与pcr-sscp法检测结果进行比较.结果 112株结核分枝杆菌临床分离株均携带rpsl和rrs基因,52株(46.4％)对链霉素敏感,其中有1株敏感菌株rrs基因pcr-sscp条带异常,pcr-sscp方法的特异性为98.1％ (51/52).60株(53.6％)结核分枝杆菌对链霉素耐药,用pcr-sscp方法分别检出46株(76.6％) rpsl基因和11株(18.3％)rrs基因条带异常,1株同时出现rpsl和rrs基因条带异常,pcr-sscp检测的灵敏度为93.3％ (56/60).结论 pcr-sscp方法检测结核分枝杆菌耐药相关基因rpsl和rrs突变的特异性和敏感性高,临床上值得推广应用. abstract： objective to establish a novel rapid detection method based on pcr-single-strand-conformational polymorphism (pcr-sscp) to determine mutation of streptomycin-resistance associated rpsl and rrs genes in isolates of mycobacterium tuberculosis (mtb).methods streptomycin-resistance of 112 mtb isolates was detected using the routine drug susceptibility test,and a special pcr-sscp assay was established.the mutations of rpsl and rrs genes in streptomycin-resistant mtb isolates were detected by pcr-sscp and pcr direct sequencing (pcr-ds) ; the results from two techniques were compared.results all isolates had both rpsl and rrs genes.fifty-two isolates (46.4％) were streptomycin susceptible,in which only 1 isolate showed abnormal pcr-sscp fragments from rrs gene,and the specificity of pcr-sscp was 98.1％ (51/52).sixty isolates (53.6％) were streptomycin-resistant,in which 46 (76.6％) and 11 ( 18.3％ ) isolates presented the abnormal pcr-sscp fragments of rpsl and rrs gene,respectively.one streptomycin-resistant isolate showed abnormal pcr-sscp fragments from both rpsl and rrs genes.the sensitivity of pcr-sscp was 93.3％ (56/60).conclusion the pcr-sscp that established in this study is a specific and sensitive method for rapid detection of the streptomycin-resistance associated mutations in rpsl and rrs genes of mtb.     

深化医药卫生体制改革的几点建议

在<医改意见>中提出了要扶持中医药发展,要促进中医药继承和创新等,这些都是很好的、很难能可贵的.但其淡忘或遗漏了将中医药宝库中,疗效卓著、适应性广、无任何毒副作用、易学易推广的非药物疗法和导引疗法,列入<医改意见>.     

急性胃肠炎自我防治法

急性胃肠炎是夏、秋季的常见病。其起病突然,轻者一般只有消化不良、上腹部饱胀不适、嗳气或轻度恶心呕吐;重者则腹部剧烈疼痛,腹泻每日3—5次,甚者每日10余次或更多,粪便呈水样,一般无粘液脓血,恶心、呕吐厉害,呕吐物中有酸腐气味,并可带血,有的患者伴有发热(38—39℃)和上腹部压痛,严重者可出现脱水、电解质紊乱、酸中毒、血压下降甚至休克。     

非ST段抬高型ACS患者耳折程度与GRACE评分的关系

目的：探讨非ST段抬高型急性冠脉综合征（ NSTE-ACS）患者耳折程度与GRACE危险评分的相关性。方法选择医院心脏中心2014年1月-2015年1月收治的非ST段抬高型急性冠脉综合征患者500例。根据耳折评分分为轻微组（0、1分）、中等组（2分）、严重组（3分）、极严重组（4分）。同时行GRACE危险评分。分析耳折程度与GRACE评分的相关性。结果极严重组GRACE评分明显高于其他组（ P<0.01）。结论 NSTE-ACS患者随耳折程度加重,GRACE评分越高,从早期血管重建术中获益越大。     

急性脑梗死静脉溶栓桥接动脉取栓后并发脑疝1例的急救与护理

总结1例急性脑梗死患者静脉溶栓桥接动脉取栓后并发脑疝的急救与护理。护理的重点包括静脉溶栓桥接动脉取栓后的观察与护理,脑疝的急救与护理,做好去骨瓣解压术+颅内压探头植入术的术前准备,术后加强气管切开护理并积极预防下肢深静脉血栓形成。患者经过45d的住院治疗,好转出院。     

蒙药玉簪花总多糖提取工艺优选与含量测定

目的：筛选玉簪花总多糖的最佳提取工艺并建立测定其含量的方法。方法通过单因素试验及正交试验设计考察玉簪花总多糖水提醇沉的制备条件,以葡萄糖标准液作为考察指标绘制标准曲线,苯酚-硫酸法测定玉簪花总多糖的含量。结果玉簪花总多糖的最佳提取工艺为加30倍量水,提取温度80℃,浸提3次,每次3 h;测定样品的玉簪花总多糖含量达3.65%。结论优选工艺合理、可行,含量测定方法准确、简便,具有良好的重现性。     

2009-2018年国家自然科学基金康复医学领域资助现状分析

目的 分析国家自然科学基金康复医学领域资助现状,为康复医学研究的进一步发展提供参考。 方法 以科学基金共享服务网为数据来源,对2009-2018年国家自然科学基金康复医学领域资助项目进行汇总,从资助项目的数量及金额、地区分布、负责人、研究方向、项目成果五个方面分析其特征。 结果 2009-2018年期间共有348名研究者获得国家自然科学基金康复医学领域资助,累计资助项目421项,资助金额达16854.10万元,取得成果1395项,资助项目数量、金额以及成果数量整体均呈上升趋势。在资助项目研究内容方面,以神经康复相关研究数量最多,骨科康复次之,心肺康复、疼痛康复等数量较少。 结论 2009-2018年期间我国康复医学快速发展,相关研究数量不断提高、内容不断深入,但存在各研究方向发展不平衡等问题。     

克罗恩病发病机制的研究进展

<正>克罗恩病(Crohn’s disease,CD)是一种以慢性肉芽肿性炎性病变为表现的非特异性肠炎,目前多认为CD与自身免疫缺陷、感染、遗传等因素有关,可累及全胃肠道,全壁层炎症,节段性分布。胃肠道以外的器官如关节、皮肤、眼及肝胆胰等也可累及[1]。CD是炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的一种亚型,目前认为它是一个涉及多基因的复杂疾病,本质上为遗传易感个体在肠内微生     

新型按摩集锦之一——按摩催眠

本刊1999年第6期刊出《我认识的魏大夫》一文之后,许多读者来信询问魏大夫的新型按摩法。魏大夫发掘祖国医药学遗产并结合现代科技研究成果,发扬了新型按摩理论。“新型按摩”又称“小剂量按摩”、“无痛按摩”或“轻量按摩”。其特点是轻巧、松柔、愉悦、深透,能使患者在少痛、无痛甚至舒适的状态下接受治疗,达到痛减病除的目的。新型按摩不仅可用来防治疾病,还可用来健身、美形、养生。对新型按摩,只要细心钻研,人人都可掌握,实践中也一定会有收获。新型按摩对接受者来说,分为被动(术者)操作和主动(自我)操作两部分。本刊将陆续刊登防治失眠、预防感冒操、慢性支气管炎防治法、经络减肥美形法及经络强身美形法、面瘫防治操等等。希望对中老年朋友有所帮助,也希望有点滴收获的读者能将心得反馈给我们。     

日本血吸虫虫源性抗原诱导效应性B细胞分化的研究

目的 目的 观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原 （SEA） 和可溶性成虫抗原 （SWAP） 诱导小鼠效应性B细胞分化情况。方 方 法 法 SEA、 SWAP和脂多糖 （LPS） 分别体外刺激小鼠脾脏单个核细胞和脾脏CD19+ B细胞, 72 h后采用流式细胞术检测 CD19+ IL?6+ 及CD19+ IFN?γ+ 细胞比例; 用酶联免疫吸附试验 （ELISA） 检测抗原刺激后脾脏B细胞培养上清中IL?6和IFN?γ 水平。用SEA、 SWAP、 PBS分别和不完全弗氏佐剂混合免疫小鼠, 每周1次, 共3次, 末次免疫后7 d取小鼠脾脏, 流式细胞 术检测CD19+ IL?6+ 及CD19+ IFN?γ+ 细胞比例, 用ELISA法检测培养上清中IL?6和IFN?γ水平。 结果 结果 SEA与LPS可以体 外诱导脾脏单个核细胞和脾脏B细胞分化为CD19+ IL?6+ B细胞 （F = 5.099, P < 0.05; F = 6.951, P < 0.05）, 并刺激脾脏B细 胞分泌IL?6 （F = 55.184, P < 0.01）; SEA免疫小鼠后, 可以在体内刺激小鼠脾脏B细胞分泌IL?6 （F = 19.244, P < 0.01）, 并诱 导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+ IL?6+ B细胞 （F = 14.904, P < 0.05）。SWAP可以体外诱导脾脏单个核细胞分化为 CD19+ IFN?γ+ B细胞 （F = 3.277, P < 0.05）, 但不能单独诱导脾脏B细胞分化为IFN?γ+ B细胞, 也不能刺激脾脏B细胞分泌 IFN?γ; SWAP免疫小鼠后, 可以在体内刺激小鼠脾脏B细胞分泌IFN?γ （F = 31.886, P < 0.01）, 并诱导其分化为CD19+ IFN? γ+ B细胞 （F = 49.873, P < 0.01）。 结论 结论 日本血吸虫SEA可以优势诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+ IL?6+ B细胞, 而 SWAP可以优势诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+ IFN?γ+ B细胞, 但依赖于其他免疫细胞的参与。