早期非创伤性股骨头坏死患者脂联素及相关因子与骨髓水肿及疼痛分级的相关性研究

目的:探讨早期股骨头缺血性坏死患者( INFH)脂联素、CRP、TNF-α和NO等相关因子水平与骨髓水肿及疼痛分级的相关性.方法:回顾性分析我院门诊及住院部2010年5月～10月收治的120例INFH患者(138个髋关节).根据MRI将骨髓水肿分为0～2级,根据主诉疼痛分级法将疼痛分为0～2级,脂联素、TNF-α及NO水平采用ELISA方法检测,CRP及血脂水平送我院生化室常规检测.统计学分析脂联素因子水平与骨髓水肿及疼痛分级的相关性.结果:104髋发生骨髓水肿,发生率为75.4％,相关性分析显示疼痛分级与骨髓水肿存在正相关(P＜0.01).在骨髓水肿患者中测定血清脂联素、CRP、TNF-α及NO含量,各级患者间比较有统计学差异(P均＜0.05),在不同程度疼痛患者中,血清脂联素、CRP、TNF-α及NO含量在各级间比较有统计学差异(P均＜0.05).相关分析显示脂联素与骨髓水肿及疼痛分级存在明显负相关(P＜0.01),CRP、TNF-α、NO等与疼痛存在正相关(P＜ 0.01).结论:早期INFH患者体内脂联素水平与骨髓水肿、疼痛分级关系密切,可作为病情进展评价及疗效判定的指标,为临床诊疗该疾病提供新的思路.     

尼莫地平缩小脑梗死小鼠梗死体积与时间窗的关系

目的:研究尼莫地平缩小脑梗死小鼠梗死体积的最佳时机。方法:经右侧颈总动脉将尼龙单丝线栓至大脑中动脉造成永久性缺血模型。经尾静脉及腹腔给药。动物均于术后第7天处死取脑,用TTC染色、图像分析仪测定脑梗死体积。结果:单缺组脑梗死体积最大,为(224.00±56.88)mm3,术后6h以内为(110.23±43.29)～(129.64±65.42)mm3,术前给药组为(107.12±62.34)mm3,脑梗死体积较小,术后12h以后给药组为(173.82±57.28)～(242.67±65.28)mm3,脑梗死体积介于二者之间。结论:术前及术后6h以内给药可使小鼠脑梗死体积减小,这一段时间可能为治疗时间窗。     

72例不明原因腹水探讨

自1994年～1997年本科收住不明原因腹水72例,男39例,女33例,年龄25～80岁,其中40～70岁51例,占本组70.8％。 1 研究对象和方法 1.1 对象:凡入院时已有明确的病因诊断不列入本研究范围。 1.2 方法:腹水病因的诊断包括临床症状、体征、化验检查、影像学检查(X光、B超、CT、核磁共振)及病理检查。 2 结果     

柴胡疏肝散治疗慢性胃炎108例临床观察

本病以慢性浅表性胃炎为研治的主要对象,是消化系统常见病,多发病,属于祖国医学的"胃脘痛"、"心下痛"、"痞满"范畴,临床上常以上腹部胀满疼痛,食少纳呆,嗳气恶心,舌苔多薄白或微腻,脉弦为主要特点.本人以柴胡疏肝散为主方随症加减治疗,取得了满意效果.     

养阴活血方对胃癌前病变肠道菌群变化及转归的影响

目的:观察养阴活血方对胃癌前病变肠道菌群变化及转归的影响。方法:将66例胃癌前病变患者分为2组各33例。对照组为口服四联给药方案,治疗组在对照组基础上加用养阴活血方,通过比较临床疗效,胃黏膜组织病理检测及肠道菌群(乳酸杆菌、大肠杆菌、双歧杆菌)数量进行疗效评定。结果:治疗组总有效率为87.88%,优于对照组总有效率66.67%,经秩和检验,差异有统计学意义(P 0.05)。经治疗,治疗组提高患者肠道菌群中乳酸杆菌、双歧杆菌,降低大肠杆菌,与治疗前比较,差异有统计学意义(P 0.05)。治疗组治疗后乳酸杆菌、大肠杆菌、双歧杆菌与对照组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。治疗后,治疗组胃镜下黏膜病变积分大体分级、部分分级均较治疗前改善(P 0.05),且治疗组治疗后2个分级积分与对照组比较,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论:养阴活血方能调控胃癌前病变患者肠道菌群平衡,改善胃黏膜病理变化,有益于胃癌前病变的转归。     

外源性组织型纤溶酶原激活物信号肽突变体增强蛋白质在哺乳细胞中的表达及分泌

目的 比较不同tPA信号肽突变体对目的蛋白表达和分泌水平的影响,优化并筛选通用性外源信号肽序列.方法 通过定点突变技术将人类组织型纤溶酶原激活物（tPA）的信号肽第22位氨基酸由脯氨酸（P）突变为丙氨酸（tPA22P/A）或甘氨酸（tPA22P/G）,并将突变前后的3种信号肽序列分别插入HIV-1 p24基因的N末端,构建不同的p24蛋白表达载体,这些重组表达载体体外瞬时转染人胚肾HEK293T细胞,转染72 h后,通过SDS-PAGE与western blot检测并比较各组培养上清和细胞中p24蛋白的表达水平.结果 成功构建了3个p24蛋白的真核表达载体P24T.tPA、P24T.tPA22P/A和P24T.tPA22P/G,经序列测定证实基因序列和方向与预期相符;重组载体转染293T细胞72 h后均检测到分泌性p24的表达.与P24T.tPA组相比,P24T.tPA22P/A转染组培养上清中和细胞内p24蛋白表达水平分别提高62%和29%,P24T.tPA22P/G转染组分别提高8%和6%.结论 tPA信号肽22位由脯氨酸突变为丙氨酸或甘氨酸,这就提高了目的蛋白的表达和分泌水平,为优化外源蛋白在哺乳细胞中的表达和分泌提供了实验基础.     

胫后动脉内踝上穿支皮瓣顺行或逆行移植修复小腿远端及足踝部皮肤软组织缺损

目的探讨应用胫后动脉内踝上穿支皮瓣顺行或逆行移植修复小腿远端及足踝部皮肤和软组织缺损的临床效果。方法应用胫后动脉内踝上穿支皮瓣顺行或逆行移植修复小腿远端及足踝部皮肤和软组织缺损35例。结果35例转移之皮瓣均成活,术后随访3～24个月,皮瓣均成活且功能良好。结论胫后动脉内踝上穿支血管皮瓣具有手术简单易行,对机体的损伤较小,易于切取和转位等优点。应用胫后动脉穿支血管皮瓣修复小腿及足踝部皮肤软组织缺损是较为理想的方法。     

Effect of nuclear factor-κB p65 ASOND on I typ collagen expression and rat hepatic stellate cells proliferation

Objective Sstudy effect of nuclear factor-κB ASOND on I type collagen expression and rat hepatic stellate cells(HSC)proliferation.Methods Rat HSCs were separated by affusing and digestingof Ⅳ type collagenenzyme and density acentric method.Lipid-mediated NF-κB p65 ASOND(0.001,0.01,0.1,1μmol/L)Was transferred into rat HSCs.Toxicity of HSCs caused by NF-κB p65 ASOND and activity of LDH were determined by trypan blue staining.Proliferation affection of transferring NF-κB p65 ASOND into HSCs was determined by MTT.In different concentration NF-κB p65 ASOND.expression of Ⅰ type collagen stimulated by 1mg/L TNF-αwas determined by RT-PCR and ELISA.Results After transfection of NF-κB p65 ASODN,expression of NF-κB protein in HSCs was decreasing.Toxicity experiment indicated that NF-κB p65 ASOND of different concentration(0.001,0.01,0.1 and 1.0 μmol/L)had no effect on HSCs livability and LDH activity(P<0.05).Four different concentration NF-κ B p65 ASOND could restrain HSCs proliferation stimulated by 1 mg/L TNF-α.The expression of I type collagen and mRNA stimulated by 1mg/LTNF-αwas increased,and had a positive correlation with concentration(P>0.05).Conclusion NF-κB p65 ASOND may depress NF-κB activity to restrain HSCs proliferation and Ⅰ type collagen expression,and reduce extracellular matrix.     

THBS2 特异性单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备THBS2特异性单克隆抗体并鉴定其特性,为临床应用奠定基础。方法:表达并纯化THBS2不同截断体片段的GST融合蛋白,经小鼠免疫、细胞融合及筛选,制备THBS2特异性单克隆抗体,然后对获得的单抗亲和力和特异性及在不同免疫学实验中的应用进行鉴定,最后采用免疫沉淀法对36例胰腺癌患者及20例正常人血清THBS2进行检测。结果:获得了10株杂交瘤细胞株,均能稳定分泌抗体;10株单抗经ELISA、Western blot和免疫沉淀证实均能特异性识别人THBS2,且发现THBS2在胰腺癌患者血清中的表达水平显著高于正常人(P0.000 1)。结论:成功制备获得了亲和力高、特异性好的抗人THBS2单克隆抗体,为血清THBS2的检测奠定了基础。     

核因子κB p65反义寡核苷酸对大鼠肝星状细胞增殖和I型胶原表达的影响

目的 探讨核因子κB(NF-κB)p65反义寡核苷酸(ASOND)对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖和I型胶原表达的影响.方法 Ⅳ型胶原酶消化密度梯度离心法分离培养大鼠HSC;脂质体介导的不同浓度的NF-κB p65 ASOND(0.001、0.01、0.1和1μmol/L)进入HSC;台盼蓝染色排斥法检测NF-κBp65 ASOND对HSC的毒性实验并检测各组乳酸脱氢酶(LDH)活性;MTT法测定NF-κB p65 ASOND对1mg/LTNF-α刺激后HSC增殖影响;RT-PCR法和ELISA法检测不同浓度NF-κB p65 ASOND对1mg/LTNF-α刺激后HSC I型胶原表达的影响.结果 转染NF-κB p65 ASODN后,HSC细胞NF-κB蛋白的表达下降,不同浓度(0.001、0.01、0.1和1 μmol/L)的NF-κB p65 ASOND对于体外培养HSC的存活率和LDH无明显影响(P>0.05),0.01～μmol/L的NF-κB p65 ASOND抑制HSC的增殖,lmg/L TNF-α刺激HSC的I型胶原蛋白和mRNA的表达,且随浓度的增加作用增强(P<0.05).结论 NF-κB p65 ASOND可通过抑制NF-κB活性减少HSC活化增殖及Ⅰ型胶原生成,从而减少细胞外基质的产生.